Активность и субъединичный состав протеасом в гиперплазированном и неоплазированном эндометрии

Актуальность. Пролиферативные заболевания эндометрия являются одним из наиболее распространенных видов онкогинекологиче-ской патологии. Протеолитические системы могут играть важную роль в патогенезе новообразований, в связи с этим большой интерес представляет изучение «ракового деградома» – комплекса протеаз, экспрессируемых опухолью. Одной из наиболее значимых систем внутриклеточного протеолиза является про-теасомная система. Однако на сегодняшний день исследований, посвященных изучению протеасомной системы при новообразовани- ях эндометрия, немного, и они проводятся, главным образом, на клеточных линиях и культурах.

Цель исследования – изучение активности протеасом в тканях гиперплазированного эндометрия (ГЭ), рака эндометрия (РЭ) и субъединичного состава протеасом в тканях РЭ.

Материал и методы. Первую группу составили 49 больных с морфологически верифицированным диагнозом РЭ I–II стадии (средний возраст – 56,8 ± 1,5 года). Все больные РЭ получали лечение в соответствии с рекомендованным алгоритмом объемов диагностики и лечения злокачественных новообразований, утвержденным приказом МЗ РФ, где на первом этапе проводилось оперативное лечение. Вторая группа состояла из 31 больной с ГЭ (средний возраст – 50,7 ± 1,5 года). Все больные с ГЭ получали либо гормональное, либо хирургическое органосохранное лечение. Материалом для исследования послужили послеоперационные или полученные путем биопсии при проведении гистероскопического исследования образцы тканей малигнизированного, неизмененного, гиперплазированного эндометрия. Визуально неизмененную ткань брали на расстоянии не менее 1 см от границы опухоли. Активность протеасом определяли в осветленных гомогенатах опухолевой, неизмененной и гиперплазированной ткани по гидролизу флуорогенного олигопептида Suc-LLVY-AMC и выражали в Ед/ мг белка. Разделение протесом на пулы (26S и 20S) проводили методом фракционирования с помощью сульфата аммония. Субъединичный состав изучали с помощью метода Вестерн-блоттинг с последующей хемилюминесцентной визуализацией. Содержание белка определяли по методу Лоури.

Результаты. Анализ активности протеасом в группах больных с ГЭ и РЭ показал, что тотальная активность протеасом и активность

20S пула при РЭ увеличивалась в 2,3 и 1,5 раза соответственно по сравнению с активностью ферментов при гиперплазии, в то время как для 26S пула в обеих группах наблюдались одинаковые значения активности. Тотальная активность протеасом и активность пула 20S также оказались выше в ткани опухоли по сравнению с неизмененной тканью (в 2,6 и 2,0 раза). Кроме того, в малигнизированном эндометрии активность пула 26S также оказалась выше в 1,7 раза по сравнению с неизмененной тканью. Было установлено изменение субъединичного состава протеасом в ткани РЭ по сравнению с неизмененной тканью: экспрессия α1α2α3α5α6α7 составила 81,8 %, LMP7 – 146,4 %, LMP2 – 164,5%, PA28 – 125,5 %, RPT6 – 133,7 % относительно неизмененной ткани.

Выводы. Показано повышение интенсивности протеасомзависимого протеолиза при РЭ, которое сопровождается изменением их молекулярного состава, где начинают преобладать иммунные субъединицы. При ГЭ наблюдается высокая активность 26S протеасом, в то время как тотальная и 20S активности ниже, чем при РЭ. Выявленный факт расширяет фундаментальные представления о патогенезе гиперпластических процессов и рака эндометрия.