Активность нитроксидергической системы у кошек и собак при хронической почечной недостаточности

В России наиболее распространенными домашними животными являются кошки и собаки, у которых чаще всего наблюдаются различные патологии почек, приводящие к хронической почечной недостаточности (ХПН). В основном данную патологию диагностируют у взрослых животных старше 10 лет, но она может регистрироваться и у молодых, вследствие воспалений почек, неправильного и неполного лечения, опухолевых процессов (добро- и злокачественные), различных генетических мутаций и аутоиммунных заболеваний. ХПН - опасное заболевание, которое связано с потерями функциональной почечной ткани из-за прогрессирующего устойчивого и необратимого процесса [1, 2]. Длительное и постепенное разрушение нефронов проявляется клубочковой и канальцевой недостаточностью [3]. Одним из механизмов патогенеза заболевания является снижение синтеза оксида азота (II) эндотелиальными клетками [6], которое проявляется уремией с аутоинтоксикацией. В организме происходит задержка азотистых метаболитов и других токсических веществ, приводящих к нарушению водно-солевого, кислотно-основного и осмотического гомеостаза, которые выражаются вторичными расстройствами обмена веществ, дистрофией тканей и дисфункцией всех органов и систем [4]. Результатом хронической почечной недостаточности может явиться гибель животного. На данный момент в современной ветеринарной медицине вопрос о своевременной диагностике хронической почечной недостаточности и лечении животных с данной патологией стоит остро. Знание механизмов образования и биологического действия оксида азота (II) при хронической почечной недостаточности позволит обеспечивать правильный подход к изучению патологических процессов и к разработке их терапии у кошек и собак.

Целью нашего исследования явилось изучение видовых и половых особенностей уровня метаболитов оксида азота в сыворотке крови у кошек и собак при хронической почечной недостаточности. Для достижения поставленной цели были поставлены следующие задачи:

• 1.    Изучить содержание стабильных метаболитов оксида азота в сыворотке крови здоровых и больных хронической почечной недостаточностью кошек и собак.

• 2.    Изучить видовую специфичность

• 3.    Изучить видовую специфичность системы оксида азота у кошек и собак с диагнозом хронической почечной недостаточностью.

системы оксида азота у кошек и собак с диагнозом хронической почечной недостаточностью.

Материал и методы исследований. Серия экспериментов проводилась в лаборатории кафедры физиологии и патологической физиологии ФГБОУ ВО Казанская ГАВМ в период с 2018 по 2019 годы. Исследования осуществлялись на кошках (n=10) и собаках обоего пола (n=10) разных пород. Взятие крови у кошек осуществляли из яремной вены, у собак из подкожной вены голени. Концентрацию оксида азота находили по содержанию в сыворотке крови нитрит- и нитрат-анионов, которые определяли путём восстановления нитратов до нитритов однократной навеской цинковой пыли, обработанной аммиачным комплексом сульфата меди с последующим фотометрическим определением нитритов с помощью реактива Грисса при длине волны 520,0 нм на «Фотометре фотоэлектрическом КФК - 3 -01 - ЗОМЗ» (Россия). Достоверность результатов при проведении всех экспериментальных исследований обеспечивалась достаточным количеством животных в контрольных и опытных группах и подтверждалась статистически при помощи t критерия Стьюдента.

Результаты исследований. Уровень содержания метаболитов NO в сыворотке крови у здоровых кошек и собак составляет 62,64±5,86 и 125,45±11,51 мкмоль/л соответственно. У больных животных активность системы оксида азота достоверно снижается в 1,8 раза у кошек и в 4,3 раза у собак и составляет 34,09±1,70 и 29,36±0,47 мкмоль/л (р<0,01) (Рисунок 1), что доказывает прямую зависимость патологических процессов в почках при выработке NO. Полученные данные свидетельствуют о достоверном снижении уровня метаболитов оксида азота у больных хронической почечной недостаточности кошек и собак.

В ходе исследований выяснили, что содержание метаболитов оксида азота в сыворотке крови у здоровых кошек и котов составляет 76,03±4,91 и 49,25±1,95 мкмоль/л соответственно, что согласуется с аналогичными данными Каримовой Р.Г. и Билалова И.Н. [5]. Уровень нитрат- и нитрит-анионов в крови у собак выше, чем у кошек в 1,9 раза и 2,4 раза и составляет 145,68±12,34 мкмоль/л и 118,30±8,53 мкмоль/л у самок и самцов соответственно (р<0,01). Интенсивное снижение концентрации NO у собак, вероятно, связано с тем, что чаще всего данное заболевание у собак диагностируют уже на последних стадиях заболевания, когда почечная ткань почти полностью теряет свою функциональность.

При заболевании хронической по- чечной недостаточности активность системы снижается. Так, у больных кошек концентрация метаболитов оксида азота снижается активнее, чем у больных котов почти в 2 раза против 1,6 раза и составляет 38,36±0,65мкмоль/л, тогда как у котов данный показатель равен 29,97±0,46 мкмоль/л (р<0,01) (Рисунок 2).

В ходе опытов мы пришли к выводу, что система оксида азота видоспецифична не только у здоровых животных, но и у больных хронической почечной недостаточностью.

Наиболее интенсивное образование и снижение оксида азота (II) наблюдается у собак по сравнению с кошками (Рисунок 1).

■ Кошки

■ Собаки

Рисунок 1 – Концентрация метаболитов оксида азота у кошек и собак здоровых и больных хронической почечной недостаточностью. (Примечание: * – достоверно по сравнению с контрольной группой (р<0,01))

■ Концентрация оксида азота у здоровых животных, мкмоль/л

■ Концентрация оксида азота у больных хронической почечной недостаточностью животных, мкмоль/л

Рисунок 2 – Концентрация метаболитов оксида азота у кошек здоровых и больных хрониче- ской почечной недостаточностью. (Примечание: * – достоверно по сравнению с контрольной группой (р<0,01)

145,68

Самки

118,3

28,73*

Самцы

• ■    Концентрация оксида азота у здоровых животных, мкмоль/л

30,49*

• ■    Концентрация оксида азота у больных хронической почечной недостаточностью животных, мкмоль/л

Рисунок 3 – Концентрация метаболитов оксида азота у собак здоровых и больных хрониче- ской почечной недостаточностью. (Примечание: * – достоверно по сравнению с контрольной группой (р<0,01))

У больных ХПН животных активность системы оксида азота снижается в 1,5 раза у кошек и равна 38,36±0,65мкмоль/л, и в 1,6 раза – у котов и составляет 29,97±0,46 мкмоль/л (р<0,01) (рисунок 2), что согласуется с данными Каримовой Р.Г. [6].Также снижается активность нитроксидергической системы у больных собак, у самок данный показатель составляет 30,49±0,25 мкмоль/л против 145,68±12,34 мкмоль/л, что в 4,8 раза ниже показателя здоровых самок собак. У самцов снижение концентрации NO менее интенсивно, чем у самок, и показатель составил 28,73±0,10 мкмоль/л (р<0,01), что в 4,1 раза ниже (118,30±8,53мкмоль/л), чем у здоровых самцов собак (р<0,01) (Рисунок 3).

У больных собак самок активность системы снижается в 4,8 раза и составляет 30,49±0,25 мкмоль/л, а у самцов в 4,1 раза – 28,73±0,10 мкмоль/л (р<0,01). У собак наблюдается аналогичная картина, как у кошек, наиболее активное снижение концентрации метаболитов оксида азота происходит у самок (Рисунок 3). Таким образом, у самок кошек и собак происходит не только интенсивное образование оксида азота, но также и интенсивное его снижение по сравнению с животными самцами, что говорит о половой специфичности системы NO не только здоровых, но и больных ХПН. Полученные данные позволят глубже рассмотреть патогенез заболеваний почек у кошек и собак и в дальнейшем применять эти знания при лечении почечных патологий и поддержании организма при хронических заболеваниях почек.

Заключение. Результаты экспериментов показали, что у кошек и у собак при ХПН активность системы оксида снижается, это вызвано нарушением эндотелия почечных сосудов. Выявили видовую специфичность оксида азота, так у собак его образование превышает образование оксида азота у кошек, данная особенность проявляется не только у здоровых животных, но и у кошек и собак больных ХПН, то есть у собак, страдающих ХПН уровень метаболитов NO будет снижаться интенсивнее, чем у кошек. Наиболее активное образование метаболитов NO происходит у самок, как у кошек, так и у собак. У больных хронической почечной недостаточностью животных половая специфичность сохраняется. Так, интенсивнее всего снижалась нитроксидергическая система у самок, как у кошек, так и собак, в отличие от самцов этого же вида.

Резюме

Изучены видовые и половых особенности системы оксида азота в сыворотке крови у кошек и собак больных хронической почечной недостаточностью. Выяснили, что при заболевании хронической почечной недостаточности активность системы оксида азота снижается. Так, у больных кошек концентрация метаболитов оксида азота снижается активнее, чем у больных котов почти в 2 раза против 1,6 раза, а у больных собак в 4,8 раза у самок и в 4,1 раза у самцов. Наиболее интенсивное снижение метаболитов оксида азота наблюдается у собак, что связано со временем обнаружения данной патологии.