Активность защитных систем организма у телят при разных режимах скармливания аркусита — антистрессового антиоксидантного препарата комплексного действия

Механизмы защитных систем организма многообразны и действуют совместно, дополняя друг друга. Число нейтрофилов и их функциональная активность служат важнейшим критерием состояния естественной резистентности (1). Иммунная система — одна из важнейших гомеостатических систем организма, которая во многом определяет возможность адаптации животных к внешней среде и их здоровье. У новорожденных телят часто возникают иммунодефицитные состояния, что предопределено особенностями развития иммунной системы (2). В связи с этим следует считать оправданным применение таких адаптогенов, как аркусит. Это негормональный препарат, созданный на основе синтетических антиоксидантов нового поколения, — дигидрохлорид 2-метил-4-димитриламинометил-бензимитазол-5-ола (3). Аркусит — мощный антиоксидант, обладающий стрессопротекторными свойствами, он повышает иммунный статус животных, создает благоприятные условия для нормализации липидного и белкового обмена, функций биомембран, способствует ускорению роста и повышению продуктивности (4). Положительное влияние аркусита на физиологическое состояние телят и прирост живой массы отмечено в ряде работ (5, 6).

Целью нашего эксперимента было изучение показателей естественной резистентности и состояния клеточного звена иммунной системы у телят в зависимости от схемы скармливания аркусита.

Методика . Научно-производственный опыт проводили в СПК «Красный рог» (Почепской р-н, Брянская обл., 2010-2011 годы) на телятах швицкой породы с рождения до 60-суточного возраста. По принципу аналогов были сформированы три группы по 10 животных в каждой. Контрольные особи (I группа) получали в качестве основного рациона (ОР) молоко. Во II и III группе телятам с 1-суточного возраста дополнительно к ОР ежедневно утром скармливали аркусит (ООО «Агробизнесцентр», 78

г. Москва) (соответственно в течение 14 сут по 5 мкг/кг живой массы и в течение 21 сут по 12 мкг/кг живой массы). Условия содержания всех телят соответствовали ветеринарно-зоогигиеническим требованиям. В 60-суточном возрасте у 5 особей из каждой группы до утреннего кормления брали пробы крови из яремной вены.

Фагоцитарный показатель (ФП, %) рассчитывали как процент нейтрофилов, способных к поглощению частиц латекса, фагоцитарный индекс (ФИ, усл. ед.) — как среднее число частиц латекса, поглощенных одним активным нейтрофилом (7). Кислородозависимую микробицидную активность нейтрофилов определяли с помощью НСТ-теста, основанного на восстановлении поглощенного растворимого красителя нитросинего тетразолия в нерастворимый диформазан (8, 9). Индекс активации нейтрофилов (ИАН) вычисляли согласно инструкции производителя по использованию набора для НСТ-теста (ООО Химическая компания «Реакомплекс», г. Чита). Поглотительную способность нейтрофилов (ФП, %; ФИ, усл. ед.) и активность их оксидазных систем (+НСТ, %, ИАН) оценивали в двух состояниях — базальном (в свежевзятой крови, стабилизированной гепарином) и стимулированном (после внесения в пробы крови зимозана, что моделирует условия бактериального заражения и характеризует адаптационные резервы поглотительной и микробицидной способности нейтрофильных гранулоцитов) (10). Показатель резерва оксидазной способности нейтрофилов периферической крови (ПР) и коэффициент их метаболической активации (К) рассчитывали по И.А. Пахмутову и М.С. Ульяновой (11). Содержание популяции Т-лимфоцитов (Е-РОЛ, %) определяли с помощью реакции ро-зеткообразования лимфоцитов с эритроцитами барана, В-лимфоцитов (М-РОЛ, %) — с эритроцитами мыши (12). Субпопуляции иммунорегулятор-ных Т-лимфоцитов, обладающих преимущественно хелперной (Е-РОЛ тр. , %) и киллерной/супрессорной (Е-РОЛ_чч . , %) активностью, — в тесте с теофиллином (13).

Для выявления статистически значимых различий использовали критерий Стьюдента ( t ) для трех степеней вероятности с учетом числа степеней свободы (14). Результаты рассматривались как достоверные, начиная с величины р < 0,05. В качестве значений физиологической нормы принимали интервалы соответствующих показателей, приведенные в литературе (7, 15).

Результаты . Изучение поглотительной способности нейтрофилов крови у телят всех групп выявило (табл. 1), что ФП в базальном состоянии у животных превышал нормативные значения без существенных межгрупповых различий, что указывает на наличие в их организме факторов, активирующих нейтрофилы. ФП в стимулированных условиях (после внесения в пробы крови зимозана) у всех особей не имел достоверно значимых отличий от величины ФП в базальных условиях. Однако в нейтрофилах крови телят из I группы отмечалась тенденция к снижению ФП в стимулированных условиях по сравнению с базальными (на 10,63 %), что свидетельствует о переактивации нейтрофилов крови у животных из контрольной группы под влиянием зимозана и, следовательно, отсутствии у них адаптационного резерва этого защитного механизма. У особей из II и III групп, напротив, прослеживалось некоторое повышение ФП в стимулированных условиях по сравнению с базальными (соответственно на 14,69 и 19,63 %). Это указывает на тенденцию к повышению адаптационного резерва поглотительной способности нейтрофилов крови под влиянием аркусита.

Фагоцитарный индекс в базальных условиях у животных из всех групп существенно не различался и был несколько выше, чем в стимули- рованных условиях, что указывает на отсутствие адаптационного резерва интенсивности поглощения чужеродного материала нейтрофилами крови.

Анализ активности кислородозависимых ферментных систем мик-робицидности нейтрофилов крови показал (см. табл. 1), что у телят из III группы относительное число таких клеток, проявляющих оксидазную активность в базальных условиях, соответствовало нормативным значениям и было достоверно ниже, чем у животных из I и II группы (соответственно на 63,18 и 83,57 %). Это свидетельствует о более благополучном состоянии особей, которые с 1-х по 21-е сут жизни получали аркусит в суточной дозе 12 мкг/кг живой массы.

• 1.    Характеристика функциональной активности нейтрофилов крови у телят швицкой породы при разных режимах скармливания аркусита ( X ± х , научно-производственный опыт, СПК «Красный рог», Брянская обл., 20102011 годы)

• 2.    Характеристика состояния клеточного звена иммунной системы у телят швицкой породы при разных режимах скармливания аркусита ( X ± х , научно-производственный опыт, СПК «Красный рог», Брянская обл., 20102011 годы)

Показатель	| I группа (контроль, n = 5)	| II группа ( n = 5)|	III группа ( n = 5)
ФП баз. , %	50,80±3,56	42,20±6,77	43,80±5,30
	45,40±6,27	48,40±6,54	52,40±7,79
ФИбаз., у.е.	5,46±0,39	5,02±0,37	4,72±0,30
ФИ стим. , у.е	4,74±0,13	4,89±0,36	4,65±0,39
+НСТ баз. , %	9,50±1,68	21,30±6,51	3,50±0,76* , **
+НСТ сТим. , %	18,60±5,52	30,70±5,47	33,50±2,16
ИАН баз.	0,11±0,03	0,27±0,10	0,04±0,01*
ИАН стим.	0,22±0,08	0,39±0,08	0,44±0,04
К	0,41±0,15	0,36±0,10	0,89±0,03*, **
ПР	2,39±0,79	1,65±0,25	11,76±2,68*, **

Примечание. ФП, ФИ, +НСТ, ИАН, К, ПР — соответственно фагоцитарный показатель, фагоцитарный индекс, НСТ-тест, индекс активации нейтрофилов (показатели оценивали в базовом и стимулированном зимозаном состоянии), коэффициент метаболической активации оксидаз и показатель резерва оксидазной способности нейтрофилов периферической крови. Описание режима скармливания антистрессового антиоксидантного препарата по группам см. в разделе «Методика».

* и ** Различия соответственно с контролем и показателями во II группе достоверны при р < 0,05.

Относительное число нейтрофилов, проявляющих кислородозависимую микробицидность после внесения в пробы крови зимозана, достоверно значимо повышалось относительно базального состояния только у телят из III группы (на 857,14 %); у животных из I и II группы отмечали лишь тенденцию к увеличению числа таких клеток (соответственно на 95,79 и 44,13 %).

У телят из III группы по сравнению с животными из I и II группы были достоверно выше коэффициент метаболической активации (соответственно на 117,07 и 147,22 %) и показатель резерва (соответственно на 392,05 и 612,73 %). Это свидетельствует о стимулирующем воздействии аркусита на активность кислородозависимых механизмов микробицидности нейтрофилов при использовании его с рождения в течение 21 сут в суточной дозе 12 мкг/кг живой массы.

Показатель | I группа (контроль, n = 5)  | II группа ( n = 5) | III группа ( n = 5)

13,30±1,34 ** 9,03±0,85^** 4,27±0,92^**

12,73±2,16**

73,97±1,32*, **

27,50±1,17 *

16,50±2,50 11,00±1,94

13,70±1,65

58,80±2,70

Е-РОЛ, % Е-РОЛ тр ., % Е-РОЛ р, ., % М-РОЛ, % 0-Лимфоциты, %

17,47±2,32

10,97±0,98

6,50±2,43

18,67±2,83

63,87±3,17

Примечание. Е-РОЛ, Е-РОЛ^ . , Е-РОЛ_И . , М-РОЛ и 0-лимфоциты — соответственно Т-лимфоциты, иммунорегуляторные Т-лимфоциты, обладающие преимущественно хелперной (тр.) и киллерной/супрес-сорной (тч.) активностью, В-лимфоциты и лимфоциты, не несущие отличительных маркеров Т- или В-лимфоцитов. Описание режима скармливания антистрессового антиоксидантного препарата по группам см. в разделе «Методика».

Анализ данных (табл. 2), характеризующих влияние аркусита на состояние клеточного звена иммунной системы, показал, что его скармливание телятам в суточной дозе 5 мг/кг живой массы в течение первых 14 сут жизни к 60-суточному возрасту обусловило достоверно значимое повышение относительной численности популяции Т-лимфоцитов в крови (на 57,41 % по сравнению с контролем) за счет обеих субпопуляций Т-лимфоцитов — как теофиллинрезистентных, обладающих в основном хелпер-ной активностью, так и теофиллинчувствительных, в большей степени проявляющих супрессорную активность (увеличение соответственно на 50,41 и 69,23 %). По сравнению с контролем у телят этой группы имелась тенденция к снижению относительного числа В-лимфоцитов (на 26,62 %) и 0-лимфоцитов, не образующих розетки ни с эритроцитами барана, ни с эритроцитами мыши (на 7,94 %).

В III группе скармливание препарата в суточной дозе 12 мкг/кг живой массы в течение 21 сут после рождения не вызвало у телят существенных изменений к 60-суточному возрасту по сравнению с контрольными особями по числу Т-лимфоцитов, теофиллинрезистентных и теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов и В-лимфоцитов, но обусловило достоверное повышение числа 0-лимфоцитов (на 15,81 %). При этом у животных из III группы по сравнению с животными из II группы в крови достоверно снижалось содержание Т-лимфоцитов (на 51,64 %), теофиллинрезистентных Т-лимфоцитов (на 45,27 %), теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов (на 61,18 %) и возрастало число 0-лимфоцитов (на 25,80 %). Следовательно, скармливание аркусита способствовало активизации Т-клеточ-ного звена лимфоцитарной системы к 60-суточному возрасту только при использовании препарата в суточной дозе 5 мкг/кг живой массы в течение первых 14 сут жизни, тогда как в дозе 12 мкг/кг живой массы, потребляемой в течение 21 сут после рождения, препарат подавлял дифференцировку лимфоцитов, что выразилось в увеличении содержания 0-лимфоцитов.

Таким образом, реакция защитных механизмов на поступление в организм аркусита зависит от его дозы и длительности применения. Скармливание телятам этого препарата в суточной дозе 12 мкг/кг живой массы в течение первых 21 сут жизни обусловило повышение естественной резистентности к 60-суточному возрасту, на что указывает увеличение активности кислородозависимой микробицидности нейтрофилов крови. При потреблении антиоксиданта в суточной дозе 5 мкг/кг живой массы в течение первых 14 сут жизни у телят к 60-суточному возрасту активизировалось Т-лимфоцитарное звено иммунной системы.