Анализ вклада изменения нуклеотидной последовательности гена IL6 в развитии рака яичников

Рак яичников — злокачественная опухоль, поражающая яичники. Каждый год в мире регистрируются более 225 тысяч новых случаев рака яичников, более 60% из которых завершаются летально. К сожалению более 2/3 заболевших выявляются на поздних стадиях. Вместе с тем пятилетняя выживаемость при 3 стадии составляет чуть более 20%, а при 4 стадии-менее 5%[5].

Около 15% всех случаев заболевания раком яичников ассоциированы с нарушениями в генах репарации BRCA1/2, однако остальные случаи связаны с изменениями в других генах[2]. В настоящее время мало информации о том, какой вклад вносят эти малоизученные гены.

Иммунная защита организма от новообразований осуществляется комплексно с участием множества иммунокомпетентных клеток и цитокинов. Большой вклад в создание нормального иммунного ответа вносят различные интерлейкины, обладающие способностью стимулировать рост и дифференцировку клеток. Однако, при нарушении их работы, они могут перестать сдерживать развитие опухоли, а также стать индукторами ее эволюции[6,7,8,9].

Целью исследования было изучить роль изменения нуклеотидной последовательности -174 G>C гена IL6 в патогенезе рака яичников Республики Башкортостан.

Материалами для исследования послужили образцы ДНК, выделенные из венозной крови 262 женщин с установленным диагнозом «рак яичников» и 284 здоровых доноров. Выделение осуществляли методом фенольнохлороформной экстракции. Генотипирование образцов ДНК гена IL6 проводили с помощью ПЦР-ПДРФ анализа.

Амплификацию полиморфного локуса rs1800795 в гене IL6 проводили методом полимеразной цепной реакции. Скрининг полиморфного варианта гена IL6 осуществляли с помощью анализа полиморфизма длин рестрикционных фрагментов с использованием рестриктазы NlaIII с детекцией продуктов реакции в полиакриламидном геле. Были получены фрагменты ДНК размером 306 п.н для аллеля G и 133 и 173 п.н. для аллеля C соответственно.(Рис. 1)

306 п.н.

173 п.н.133 п.н.

Рис. 1 Электрофореграмма рестрикционного анализа (рестриктаза NlaIII) полиморфного варианта -174 G>C в гене IL6 . Дорожки 1,3,4,6- генотип CG; 2,7 –генотип CC; 5- генотип GG.

В результате сравнительного анализа распределения частот аллелей достоверных различий между исследуемыми группами не было выявлено (P>0,05). При сравнении общей выборки больных РЯ и контрольной группы было выявлено достоверное увеличение генотипа CG (p=0.004) в группе пациенток и генотипа GG (p=0.02) среди здоровых женщин.(рис.2)

Рис. 2 Распределение частот аллелей и генотипов полиморфного локуса -rs1800795174

G>C гена IL6 у больных раком яичников и контрольной группы

Полученные нами результаты гласят: выявлена ассоциация полиморфного варианта -174 G>C гена IL6 с риском развития рака яичников у женщин из

Республики Башкортостан (CG: OR=1.6, 95% CI 1.1-2.3, p=0.007; GG:

OR=0,7, 95% CI 0.5-1, p=0.04).