Бактерицидная активность слюны и сыворотки крови крупного и мелкого рогатого скота при гельминтозах

Значительный экономический ущерб народному хозяйству, в частности животноводству, наносят гельминтозы.    Широко распространены стронгилятозы и мониезиозы овец и крупного рогатого скота. Между тем вопросы патогенеза иммунной системы, ее неспецифического звена и соответственно адекватной профилактики, разработаны на сегодня недостаточно. При изучении факторов неспецифического иммунитета обычно ограничиваются исследованием сыворотки крови (Петров Р. В.,1987), хотя и эти данные немногочисленны. Между тем удобным и информативным, на наш взгляд, объектом изучения является слюна.

Вышеизложенное свидетельствует о необходимости дальнейшего, более углубленного изучения факторов неспецифического иммунитета, в том числе слюны, у животных разных видов при гельминтозах. Целью наших исследований явилось определение бактерицидной активности слюны и сыворотки крови коров и овец при стронгилятозе и мониезиозе.

Материалы и методы. Слюну и сыворотку крови получали от здоровых и больных стронгилятозом нестельных коров черно-пестрой породы, (КРС) в возрасте 18-24 месяцев массой 300-400 кг (всего 12, из них 6 - здоровых и 6 – больных; количество гельминтов не менее 10 в поле зрения), в хозяйстве ООО «Сокуры» Атнинского района Республики Татарстан и у овец романовской породы в возрасте 24-30 месяцев массой 25 - 30 кг (всего 12, из них 6 - здоровых из Казанского зооботсада и 6 – больных сочетанным гельминтозом, а именно мониезиозом и стронгилятозом; соотношение возбудителей не менее 10:5, из вивария Казанской государственной академии ветеринарной медицины).

Слюну получали фармакологической активацией секреции подкожным введением 1 % - ного раствора пилокарпина гидрохлорида (глазные капли) крупному рогатому скоту в область лопатки в дозе 15 мл и овцам в область шеи в дозе 2,5 мл.

Сыворотку крови у вышеуказанных животных получали по методике Н.И. Гурьянова (1992). Кровь брали из яремной вены стерильно специальными системами во флаконы емкостью 250 мл, выдерживали 3 ч при 20-22 °С до получения первичной сыворотки, которую затем центрифугировали при 3 000 об./мин в течение 15 мин и стерилизовали фильтрацией через мембранные фильтры фирмы «Millipore» (США), после чего замораживали.

Свежие фекалии для выявления гельминтов брали от крупного рогатого скота и овец сразу после выделения из прямой кишки с пола (для этого использовали резиновые перчатки), в количестве 10 г помещали в целлофановые пакеты. На пробах указывалась клички животных, дата взятия материала.

При диагностике гельминтозов использовали гельминтоовоскопический метод Котельникова Г.А., Хренова В.М. (1980). При этом в качестве флотационной жидкости применяли аммиачную селитру (нитрат аммония), 1,5 кг которой растворяли в 1 л воды, доводя плотность раствора до 1,3. Пробу фекалий массой 3 г помещали в стакан, заливали небольшим количеством флотационной жидкости и тщательно размешивали. Затем добавляли 30 мл этого раствора и процеживали через металлическое сито в сухой, чистый стакан. Взвесь отстаивали 10 мин, после чего прикосновением металлической петли снимали поверхностную пленку и переносили на предметное стекло для микроскопирования.

Дегельминтизацию осуществляли фебталом в форме гранулята индивидуально. Овцам давали 1 г гранулята на 22 кг массы животного по 2 г с кормом, крупному рогатому скоту давали 1 г гранулята на 29 кг массы животного по 10-13 г с кормом.

Бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) и слюны определяли по методике Смирновой О.В., Кузьминой Т.А. (1966), при этом в качестве тестовой культуры использовали B. subtilis в дозе 150 млн микроб. клеток и E. coli в дозе 5 млн микроб. клеток. В качестве основы мясопептонной бульона применяли гидролизат Хоттингера в количестве 5 мл в пробе, продолжительность инкубации в контрольных и опытных проб со слюной составила 5 ч, с сыворотки крови - 3 ч для B. subtilis и 5 ч - для E. coli.

Результаты исследований и обсуждение. Данные по бактерицидной активности слюны и сыворотки крови представлены в таблице.

У коров и овец из хозяйств, имеющих идентичные условия содержания и кормления, при гельминтозах выявлены различия в бактерицидной активности слюны и сыворотки крови с использованием B. subtilis.

Бактерицидная активность (%) слюны и сыворотки крови у КРС и овец в норме, при гельминтозах и после дегельминтизации при использовании в качестве тестовой культуры Е. coli и В.subtilis

Из таблицы следует, что бактерицидная активность сыворотки крови у коров выше, чем у слюны, а у овец, наоборот, ниже. Установлено, что БАСК у КРС, в норме составлявшая 68,1±1,3 % для B. subtilis и 91,6±1,1 % - E. coli, при гельминтозе падает до 53,0±1,1 % при использовании B. subtilis и до 80,9±2,7 % - при использовании E. coli. Обработка антгельминтиком возвращает ее величину к исходному значению (68,0±1,2 % - с B. subtilis и 88,9±1,5 % - с E. coli).

Также из таблицы видно, что величина этого показателя слюны у КРС при гельминтозе падает до 32,9±1,6 % для B. subtilis и до 20,0±0,7% -для E. coli, тогда как в норме она равняется 56,9±4,4 и 28,5±1,2 % соответственно. Дегельминтизация повышает величину БАСК до 43,0±1,9% для B. subtilis, но этот показатель остается все же ниже исходных значений; тогда как для E. coli его величина выше исходного значения - 37,5±5,5 %. Величина БАСК у овец при гельминтозах падает до 38,3±1,9 % при использовании B. subtilis и возрастает до 56,0±13,9 %, при использовании E. coli, а после дегельминтизации повышается до 49,1±1,8 и 73,6±7,8 % соответственно.

Согласно представленным данным, бактерицидная активность слюны овец в норме при использовании B. subtilis равняется 58,0±2,7 % и 47,6±4,8 % - для E. coli, а при гельминтозе снижается до 42,9±2,9 и 21,6±1,0 % соответственно. Дегельминтизация незначительно повышает эту величину (до 49,3±1,9 и 25,3±0,7 % соответственно), но она остается все же ниже исходных значений.

Обсуждение. Данные по изменению БАСК при различных видах гельминтозов у животных разноречивы: величина ее либо снижается (Безнос Т.В., 1987; Ященко Н.Ф., 1987; Ятусевич А.И., 1987; Довгiй Ю., 1998; Пушкарев А.С., 1999), либо не изменяется (Баранова Н.Ф., 1986). По нашим данным, при гельминтозах во всех случаях наблюдается снижение величины бактерицидной активности слюны и сыворотки крови у КРС и овец. Вероятно, это связано с нарушение процесса всасывания питательных веществ в желудочно-кишечном тракте жвачных, отрицательным азотистым балансом и интоксикацией организма животных продуктами метаболизма гельминтов, а также сдвигом основных физиологических констант макроорганизма, что ведет к нарушению гомеостаза. После дегельминтизации же, отмечается повышение величины бактерицидной активности обеих биологических жидкостей и у коров и у овец. Возможно, это объясняется устранением самого гельминта, нормализацией обменных процессов, восстановлением иммунного статуса и гомеостаза у животных. Вероятно, использованный антгельминтик фебтал помимо основного терапевтического действия способствовал повышению резистентности макроорганизма, нормализовал его иммунное состояние и гомеостаз в целом и действовал на факторы неспецифической резистентности.

Выводы. Из полученных данных следует, что величина бактерицидной активности слюны и сыворотки крови при гельминтозах снижается и повышается после дегельминтизации фебталом.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Баранова, Н.Ф. Клинико-иммунологической характеристике анаплазмоза / Н.Ф. Баранова, К.К. Новинский, Ю.Г. Шубик // Сб. науч. тр. Ленингр. вет. ин-та. - 1986. – С. 12-16. 2. Безнос, Т.В. Применение левамизола при описторхозе / Т.В. Безнос, В.Я. Линник // Вет. наука - пр-ву. -1987. - Т. 25. - С. 114-117. 3. Довгий, Ю. Еффективность комплексной терапии при фасциолезе крупного рогатого скота в зоне радиоактивного загрязнения / Ю. Довгий // Вет. медицина Украины. - 1998. - С. 21. 4. Гурьянов, Н.И. Усовершенствование технологий получения сывороток крови кур, бычков, эмбрионов коров и изучение их свойств при культивировании клеток и вирусов: Автореф. дисс. … канд. биол. наук / Н.И. Гурьянов - Казань, 1992. - 19 с. 5. Котельников, Г.А. Методические рекомендации по диагностике наиболее распространенных гельминтозов сельскохозяйственных животных // Г.А. Котельников, В.М. Хренов. - М., 1980. – 34 с. 6. Петров, Р.В. Иммунология и иммуногенетика. М., 1976. – 326 с. 7. Пушкарев, А. С. Действие дисалара на иммунобиологическую реактивность при фасциолезе крупного рогатого скота и овец / А. С. Пушкарев // Ветеринария. – 1999. - №1 - С. 28-30. 8. Ятусевич, А.И. Влияние салиномицина на интенсивность эймериозной инвазии и естественную резистентность организма кроликов / А.И. Ятусевич, Т. В. Медведская // Ученые зап. Витеб. гос. академии вет. медицины. - 1998. - Т. 34. - С. 191-192. 9. Ященко, Н.Ф. Влияние желудочно-кишечных паразитов на показатели естественной резистентности овец / Н.Ф. Ященко // Тезисы докладов научной конференции, 1987. - С. 129. 10 . Ahmad, M. Immunocytochemical localization of histatins in human salivary glands / M. Ahmad, M. Piludu, F.Oppenheim, et al. // J. Histochem. Cytochem. - 2004. - V. 52. - P. 361-370.

БАКТЕРИЦИДНАЯ АКТИВНОСТЬ СЛЮНЫ И СЫВОРОТКИ КРОВИ КРУПНОГО И МЕЛКОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ ГЕЛЬМИНТОЗАХ

Махамат M.K., Гильмутдинов Р.Я., Покровская Е.С. Резюме

В статье изложены результаты исследования бактерицидной активности слюны и сыворотки при гельминтозах. Показано снижение величины данного показателя у слюны и сыворотки крови жвачных при мониезиозе и стронгилятозе. Выявлено повышение бактерицидности обеих биологических жидкости у исследованных животных после дегельминтизации фебталом.

BACTERICIDAL ACTIVITY OF SALIVA AND BLOOD SERUM OF CATTLE AND SMALL CATTLE IN HELMINTHIASIS

Mahamat M.K., Guilmutdinov R.Y., Pokrovskaya E.S.