Баланс про- и антиоксидантной активности сыворотки крови и ротовой жидкости у больных лимфопролиферативными заболеваниями

В настоящее время достигнуты значительные успехи в диагностике и лечении лимфопролиферативных заболеваний (ЛПЗ), что позволило увеличить количество и продолжительность ремиссий, сделать реальным выздоровление [11]. В то же время многие вопросы патогенеза как самих ЛПЗ, так и их осложнений до сих пор остаются слабо изученными. В частности, известно, что патологические изменения в полости рта являются постоянным синдромом при ЛПЗ. Одним из наиболее часто встречающихся осложнений ЛПЗ является активация воспалительного процесса в пародонте. Как известно, активация процессов свободнорадикального окисления (СРО) является важным патогенетическим фактором, отрицательно влияющим на течение, эффективность лечения и прогноз как воспалительных, так и опухолевых заболеваний [15]. Процессу запуска и развития СРО в организме противостоит антиоксидантная система (АОС) защиты от свободнорадикальной деградации липидной фазы мембран и липопротеинов [9]. При срыве физиологической АОС защиты (в условиях низкого поступления экзогенных антиоксидантов, воспаления, стресса, ишемии, гипер- и гипоксии) процессы СРО лавинообразно разветвляются в тканях. Нарушение окислительно-антиокислительного баланса вызывает повреждения, выявляемые на уровне мембран, затем ткани (органа) и целого организма [6], что способствует прогрессированию синдрома эндогенной интоксикации (СЭИ), одновременно стимулируя пролиферацию опухолевых клеток [2, 13].

В многочисленных исследованиях было показано, что усиление СРО в пародонте, в слюнной железе и в целом в ротовой полости происходит при антиоксидантной недостаточности [6], стрессе [10], гипокинезии, пародонтите [7] и т.д. Однако в литературе не обнаружено данных об изменениях СРО и состояния анти-оксидатной защиты в ротовой полости при ЛПЗ. В связи с этим данное исследование проведено с целью изучения баланса про- и антиоксидантного статуса организма больных для установления степени системных и местных изменений СРО и антиоксидантной защиты при ЛПЗ.

Материал и методы

Под наблюдением находились 25 больных лимфопролиферативными заболеваниями, в том числе 9 больных лимфогранулематозом (ЛГМ) и 16 – неходжкинскими лимфомами (НХЛ), которые были объединены в основную группу. В группу сравнения вошли 27 больных хроническим генерализованным пародонтитом (ХГП) средней и тяжелой степени тяжести и не имеющие соматических заболеваний. Больные в обеих группах были в возрасте от 18 до 65 лет, средний возраст – 48,3 ± 2,12 года. Контрольную группу составили 12 практически здоровых лиц с интактным пародонтом.

Все обследованные больные являлись пациентами Городского гематологического центра г. Новосибирска, госпитализировавшимися в специализированное гематологическое отделение муниципального учреждения здравоохранения городской клинической больницы №2. Идентификацию морфологического варианта опухолей осуществляли в соответствии с REAL (1997) и классификацией ВОЗ (2000). Среди больных ЛПЗ в 35 % случаев диагностирована лимфома высокой степени злокачественности, в 65 % – низкой степени злокачественности.

Для диагностики воспаления пародонта применялись методы индексной диагностики состояния пародонта: оценку гигиенического состояния полости рта проводили с помощью индекса гигиены по Грину–Вермильону (1969). Для определения степени воспаления десны использовали папиллярно-маргинально- альвеолярный индекс в модификации Парма (1964), для оценки тяжести пародонтита – па-родонтальный индекс Рассела (1956). У всех пациентов было получено информированное согласие на использование данных обследования в научных целях и согласие этического комитета на проведение исследования.

Комплексная оценка окислительно-антио-кислительного статуса организма проведена путем определения общей про- (ПОА) и антиоксидантной активности (АОА) сыворотки крови и ротовой жидкости (РЖ) с расчетом коэффициента соотношения ПОА/АОА. Антиоксидантную активность сыворотки крови и РЖ определяли по методу Г.И. Клебанова и др. [3] на биохемилюминометре «Скиф-0301». Уровень АОА оценивали в условных единицах, соответствующих кратности подавления хемилюминесценции (ХЛ), индуцируемой перекисью водорода, в присутствии сыворотки крови или РЖ больного. АОА наиболее адекватно отражает состояние антиоксидантной защиты в целом, так как степень подавления ХЛ зависит от содержания в исследуемой сыворотке всего комплекса неферментативных и ферментативных компонентов антиоксидантной системы, а также от их функциональной активности. ПОА сыворотки крови и РЖ зависит от всех содержащихся в них факторов, обладающих прооксидантными свойствами. К таким факторам относят в первую очередь реактивные метаболиты кислорода, лейкотриены, кинины и некоторые цитокины, способные оказывать провоспалительное действие [5]. ПОА сыворотки крови и РЖ оценивали по действию тестируемых жидкостей на интенсивность ХЛ нейтрофилов стандартных пулированных лейкоконцентратов здоровых доноров с люминолом по методу Д.Н. Маянского и соавт. [5]. Коэффициент соотношения ПОА/ АОА является расчетной величиной, позволяющей объективно оценить баланс про- и антиоксидантного статуса организма. Обследование больных и исследование АОА и ПОА сыворотки крови и РЖ проводили до лечения.

Статистическая обработка данных осуществлялась с помощью лицензированных пакетов прикладных программ «Statistica 5.0» и «Microsoft Exel 7.0». Проводилась оценка значимости различий двух средних арифмети-

Т.Г. ПЕТРОВА, Д.Д. ЦЫРЕНДОРЖИЕВ, А.В. ЕФРЕМОВ, Н.П. КАРЕВА И ДР.

ческих значений по t-критерию Стъюдента и его достоверность.

Результаты и обсуждение

Результаты исследования про- и антиоксидантной активности сыворотки крови различ-ных групп больных свидетельствуют о значительных нарушениях баланса окислительно-антиоксидантной системы у больных ЛПЗ (табл. 1), причем ПОА сыворотки крови больных ХГП (группа сравнения) вдвое превышает контрольное значение, а показатель АОА, напротив, был в 1,44 раза ниже (в обоих случаях p<0,05). Отсюда соотношение ПОА/ АОА сыворотки крови у больных в 2,7 раза было выше, чем в контроле (p<0,05). В то же время уровень ПОА сыворотки крови больных ЛПЗ был повышенным в 4,3 раза, тогда как ее АОА была в 2,6 раза ниже контрольного значения (p<0,001). Соответственно, коэффициент соотношения ПОА/АОА сыворотки крови больных ЛПЗ превышает нормальный уровень в 10 раз, что свидетельствует о системном угнетении антиоксидантных факторов защиты и стимуляции СРО в тканях (табл. 1).

О местных изменениях СРО и антиоксидантной защиты судили по изменению показателей ПОА и АОА в ротовой жидкости больных ХГП и лимфомами (табл. 2). У больных лимфомами ПОА РЖ превышала нормальный уровень 3,4 раза (p<0,001), а в группе сравнения – в 2,8 раза (p<0,01). При этом выявлено, что прооксидант-ный потенциал РЖ больных ЛПЗ достоверно выше, чем у пациентов с ХГП (p<0,05). В то же время АОА РЖ больных ХГП был ниже контроля в 1,4 раза, тогда как при ЛПЗ – в 2,23 раза (в обоих случаях p<0,05). Соответственно, коэффициент соотношения ПОА/АОА РЖ больных ХГП и ЛПЗ превышает нормальные показатели в 4,33 раза и в 8 раз (p<0,001).

Сравнительный анализ показателей ПОА и АОА сыворотки и РЖ показал, что у больных ЛПЗ развиваются более значимые нарушения антиоксидантного статуса организма с активацией процессов СРО, чем при ХГП. При этом у больных ХГП, судя по данным исследования РЖ, нарушения про- и антиоксидантного статуса в большей степени выражены в ротовой полости, тогда как у пациентов с ЛПЗ эти изменения сопровождались как на системном, так и на мест-

Таблица 1

Показатели про- и антиоксидантной активности сыворотки крови и их соотношение в сыворотке крови больных групп сравнения (M±m)

Примечание: * – различия статистически значимы по сравнению с группой контроля, X – различия статистически значимы по сравнению с группой сравнения (p<0,001).

Таблица 2

Показатели про- и антиоксидантной активности сыворотки крови и их соотношение в сыворотке крови больных групп сравнения (M±m)

Примечание: * – различия статистически значимы по сравнению с группой контроля, X – различия статистически значимы по сравнению с группой сравнения (p<0,001).

ном уровне. Кроме того, следует отметить, что нарушения про- и антиоксидантного статуса не зависят от нозологической формы и морфологического варианта ЛПЗ. Так, средние значения интегральных показателей (АОА, ПОА и коэффициент их соотношения) у больных ЛГМ и НХЛ статистически не отличались друг от друга, поэтому они были объединены в одну группу.

Как известно, ключевым патогенетическим звеном воспалительного процесса пародонта при ХГП является повышенная миграция лейкоцитов в полость рта, обусловленная высоким содержанием микробных антигенов и других хемотактических факторов. Причем между тяжестью ХГП и размером миграции фагоцитов существует прямая зависимость [4]. Фагоцитирующие клетки (нейтрофилы и макрофаги) санируют очаг воспаления через продукцию активных метаболитов кислорода (АМК) и лизосомальных ферментов, способствуя росту прооксидантного потенциала в зоне поражения [8]. Данная ситуация, суть которой наиболее точно характеризует термин «окислительный стресс», которая типична не только для воспаления, но и опухолевых процессов [5]. Однако каковы механизмы системных и местных нарушений антиоксидантного статуса организма и повышения прооксидантного потенциала у больных ЛПЗ? Доказанным фактом является то, что опухолевая ткань способна к накоплению природных и естественных антиоксидантов, в результате чего в самой опухоли происходит подавление перекисного окисления липидов, а в нормальных тканях снижается антиоксидантная защита и повышается уровень АМК с запуском процессов СРО [12]. Кроме того, явление «окислительного стресса» рассматривается как проявление СЭИ, в развитие которого вносят вклад как сама опухоль, так и методы ее лечения (химиотерапия, лучевая терапия) [13, 15]. С другой стороны, с современных позиций к важным патогенетическим механизмам канцерогенеза и опухолевой прогрессии относится дисбаланс цитокинового профиля с преимущественной гиперпродукцией провоспалительных цитокинов [1, 16]. Повышенный уровень IL-1β, IL-6, TNF-α вносит определенный вклад в развитие и поддержание окислительного стресса при опухолевых заболеваниях [14].

В целом, из полученных результатов можно сделать вывод о том, что при ЛПЗ характерны системные и местные нарушения антиоксидантного статуса с развитием окислительного стресса, усугубляющие характер течения основного заболевания и его осложнений, в частности, в виде активации воспалительного процесса пародонта и поражений слизистой оболочки ротовой полости.