Биохимические, морфологические и иммунологические показатели у свиноматок при стимуляции воспроизводительной функции препаратами "Е-селен" и "Гамавит"

Введение . Репродуктивные показатели свиноматок являются залогом успешного развития свиноводства. Ряд авторов считают, что существует прямая связь между защитными свойствами крови матерей и их репродуктивными свойствами [1, 2].

Выполняя многочисленные функции, кровь является наиболее информативной тканью животного организма. По картине крови можно определить интенсивность обменных процессов и прогнозировать продуктивность животных. Известно, что кровь является лабильной средой, что способствует проявлению адаптационных свойств организма животных к изменяющимся условиям внешней среды. Кровеносная система и её состояние дают представление об интенсивности окислительных процессов и обмена веществ в животном организме, что является косвенным показателем их роста и развития. Роль иммунной системы неоспорима в поддержании гомеостаза организма, в процессе гематогенеза, оплодотворения и эмбриогенеза [3–8].

В настоящее время в свиноводстве для повышения эффективного воспроизводства применяют современные биотехнологические методы, а именно: введение в рацион свиноматок биологически активных веществ, применение гормональной регуляции, внедрение интенсивного освещения на участке осеменения и др. [9– 12].

Несмотря на это, актуальными остаются поиск новых препаратов и разработка схем стимуляции репродуктивной функции свиноматок, не оказывающих побочных явлений на здоровье животных, в связи с чем представляло интерес изучение влияния селеносодержащего препарата «Е-селен» и иммуномодулятора «Гамавит» на производственные показатели самок.

Цель исследований . Определить влияние селенсодержащего препарата «Е-селен» и иммунокорректора «Гамавит» на репродуктивные показатели и иммунитет свиноматок.

Задачи : выявить изменения биохимических, гормональных, морфологических, иммунологических и репродуктивных показателей животных после применения препаратов, а также оценить производственные показатели исследуемых свиноматок.

Материалы и методы. Исследования проводили на промышленном свиноводческом комплексе Омской области производственной мощностью более 100 тыс. голов. Для эксперимента были отобраны клинически здоровые свиноматки (n=20), из которых сформировали две группы (по 10 гол. в каждой) по принципу аналогов (порода, живая масса, возраст и количество опоросов). Подопытные животные находились в одинаковых условиях кормления и содержания согласно промышленной технологии.

Первая группа свиноматок (n=10) – контрольная.

Вторая группа (n=10) – свиноматки, которым после отъема поросят вводили внутримышечно однократно селеносодержащий препарат «Е-селен» (NITA-FARM, г. Саратов) в дозе 5 мл и иммуномодулятор «Гамавит» (ЗАО «Микроплюс» и ООО «ГамаВетФарм», г.Москва) по 0,05 мл/1 кг на одно животное.

Свиноматок контрольной и опытной групп после отъема поросят осеменяли в первую половую охоту искусственным способом.

Пробы крови для биохимических, гормональных, морфологических и иммунологических исследований были взяты с использованием общепринятых методов сразу после отъема поросят до введения препаратов и через 30 сут после начала эксперимента. Полученную кровь помещали в пробирки с активатором свертывания и в пробирки с гепарином (или ЭДТА). Исследования крови осуществляли в учебноклинической лаборатории университетской ветеринарной клиники ФГБОУ ВО Омский ГАУ и в ФГБНУ «Омский аграрный научный центр».

Исследования на гормоны были проведены в ветеринарной клинике «Биота», г. Омск. Анализ выполнен на микростриповом фотометре для иммуноферментного анализа Stat Fax 303 Plus реагентом для количественного иммунофер-ментного определения прогестерона в сыворотке крови «СтероидИФА-прогестерон».

Морфологические исследования крови проводили по общепринятым методикам, руководствуясь «Клинической гематологией животных» А.А. и Л.А. Кудрявцевых (Москва: Колос, 1974). Биохимические исследования проводили на биохимическом анализаторе Bio Chem SA с использованием реагентов «HTI» (США).

Популяцию Т-лимфоцитов определяли в реакции спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана, популяцию B-лимфоцитов выявляли в реакции комплементарного розет-кообразования с эритроцитами быка, образовавшими иммунные комплексы с гетерофильными антителами и комплементом. Популяцию цитотоксических Т-лимфоцитов изучали используя реакцию непрямого глобулинового розетко-образования с эритроцитами быка, образовавшиеся иммунные комплексы – лишь с гетерофильными антителами [13]. Концентрацию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови определяли методом осаждения полиэтиленгликолем (ПЭГ) с молекулярной массой 6000 [14]. Функциональную активность нейтрофилов оценивали в тесте с нитросиним тетразолием (НСТ-тест) фотометрическим способом в спонтанном и стимулированном варианте. Для характеристики функционального резерва нейтрофилов был рассчитан коэффициент стимуляции (КС) как отношение индуцированного уровня клеточной активности к спонтанному [15].

Результаты исследований крови животных опытной группы сравнивали с контролем. При оценке производственных показателей учитывали количество осемененных и опоросившихся свиноматок; начало проявления первой половой охоты; эффективность осеменения (оплодотворение); продолжительность супоросности. Цифровой материал обрабатывали методами вариационной статистики на компьютере с использованием приложения M. Excel.

Результаты исследований и их обсуждение . На первом этапе исследований проводили анализ биохимических, гормональных, морфологических и иммунологических показателей крови у всех экспериментальных свиноматок перед введением препаратов. Повторно кровь исследовали на 30-е сутки после их применения. Результаты представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1

Биохимические показатели сыворотки крови у клинически здоровых свиноматок контрольной и опытной групп (M±m, n=10)

Показатель	Норма	Группа
		Контрольная (n=10)		Опытная (n=10) Е-селен+Гамавит
		до введения	через 30 сут	до введения	через 30 сут
АЛТ, Ед/л	22–47	33,46±2,21	26,47±0,36	38,27±3,64	27,65±1,32
АСТ, Ед/л	15–55	27,38±2,45	36,21±2,97	24,43±2,12	35,19±1,54
Билирубин общий, Ммоль/л	0,3–8,2	7,13±0,44	5,89±0,53	7,57±0,38	5,32±0,41
Фосфатаза щелочная, Ед/л	41–176	90,8±18,95	130,00±35,59	96,25±8,33	113,11±19,26
Белок общий, г/л	58–83	78,63±1,79	71,65±1,34	73,74±1,56	80,39±2,78*
Альбумин, г/л	23–40	28,48±0,86	44,26±2,89	30,29±0,61	35,71±0,65
Креатинин, Мкмоль/л	70–208	168,02±6,50	76,5±3,43	157,16±7,89	75,18±3,69
Азот мочевины, Ммоль/л	2,9–8,8	5,37±1,08	6,53±0,89	6,19±0,24	6,73±0,84
Холестерин, Ммоль/л	2,1–3,5	2,53±0,06	3,06±0,19	2,41±0,05	3,12±0,14
Витамин Е, кг%	0,2–0,4	0,21±0,03	0,24±0,05	0,22±0,02	0,31±0,07
Прогестерон, нмоль/л	–	7,4±0,27	44,36±1,25	6,5±0,31	59,2±2,36***

Примечание . Здесь и далее * – P ≤ 0,05; ** P ≤ 0,01; *** – P ≤ 0,001.

Анализ всех биохимических параметров до введения препаратов показал отсутствие значимых различий между показателями у животных исследуемых групп. На 30-е сутки биохимические параметры также существенно не различались, за исключением содержания общего белка, концентрация которого достоверно увеличивалась у свиноматок опытной группы до 80,39 против 71,65 г/л в контрольной. Кроме того, отмечено значительное повышение уровня прогестерона у свиноматок опытной группы от-

Таблица 2

Морфологические и иммунологические показатели крови свиноматок контрольной и опытной групп (M±m, n=10)

носительно контроля (соответственно 59,2±2,36, 44,36±1,25, Р<0,001).

Анализ количества иммунокомпетентных клеток, состояния функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов периферической крови, а также концентрации циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови свиноматок контрольной и опытной групп перед применением препаратов показал отсутствие значимых различий.

Показатель	Норма	Группа
		Контрольная (n=10)		Опытная (n=10) Е-селен+Гамавит
		до введения	через 30 сут	до введения	через 30 сут
1	2	3	4	5	6
СОЭ, мм/ч	2–9	3,52±0,11	8,23±0,28	3,26±0,15	7,04±0,08**
Лейкоциты, 109/л	8,0–16,0	10,48±0,27	9,10±0,48	11,12±0,90	13,28±0,62***
Эритроциты, 1012/л	4,3–6,7	4,41±0,8	4,88±0,19	4,67±0,23	5,94±0,27*
Гемоглобин, %	9,0–11,0	9,6±0,51	10,7±0,21	9,83±0,37	10,42±0,31

Окончание табл. 2

1	2	3	4	5	6
Лимфоциты, % (абс.,109/л)	40-50	42±3,30 (4,41±0,39)	37±4,08 (3,33±0,33)	41,8±2,13 (4,38±0,26)	35,8±2,92 (4,77±0,35*)
Т-лимфоциты, тыс/мкл	–	0,46±0,08	0,52±0,11	0,47±0,08	0,91±0,23
Цитотоксические Т-лимфоциты, тыс/мкл	–	0,30±0,14	0,55±0,06	0,27±0,12	1,53±0,32*
В-лимфоциты, тыс/мкл	–	0,68±0,32	0,93±0,13	0,69±0,12	1,68±0,29*
НСТ, спонт., ед. оп. пл.	–	0,16±0,03	0,37±0,12	0,14±0,02	0,42±0,05
НСТ, стимулир., ед. оп. пл.	–	0,14±0,08	0,57±0,11	0,15±0,03	0,46±0,07
Функциональный резерв нейтрофилов, у.е	–	0,87±0,37	1,54±0,52	1,15±0,25	1,23±0,55
ЦИК, у.е.	–	7,40±2,18	14,2±2,94	7,12±2,34	11,08±1,62

При изучении морфологических показателей на 30-е сутки после введения препаратов отмечали ускорение СОЭ вдвое относительно фоновых значений. Вместе с тем у особей опытной группы по сравнению с интактными животными данный показатель достоверно снизился до 7,04±0,08 против 8,23±0,28 мм/ч (Р<0,01). В этой же группе на 30-е сутки исследования достоверно увеличился уровень лейкоцитов и достиг 13,28±0,62 против 9,10±0,48 109/л (Р<0,001) в контроле.

Количество эритроцитов у всех животных до введения препаратов не имело значительной разницы, но на 30-е сутки существенно увеличилось у самок опытной группы, у которых данный показатель был на уровне 5,94 против 4,88 1012/л в группе интактных животных (Р<0,05).

На 30-е сутки после введения «Е-селена» и «Гамавита» у животных опытной группы регистрировали повышение концентрации лимфоцитов в 1,4 раза (Р<0,05) относительно значений контроля. Повышение количества лимфоидных клеток происходило за счет всех популяций, в частности можно обратить внимание на цитотоксические Т-лимфоциты, концентрация которых значительно (Р<0,05) увеличилось в среднем до 1,53 против 0,55 тыс/мкл в контрольной группе. Претерпело изменение и число B-лимфоцитов во 2-й группе во второй срок исследования – 1,68 тыс/мкл (Р<0,05).

Число спонтанного НСТ у животных опытной группы не отличалось от показателей контроля. По результатам определения иммунных комплексов в сыворотке крови установили, что у животных опытной группы с высокой бактерицидной активностью лейкоцитов содержание ЦИК было наименьшим.

При оценке репродуктивных показателей свиноматок, при комплексном введении селенсодержащего препарата и иммуномодулятора, нами также были зарегистрированы различия . В период эксперимента одна свиноматка контрольной группы была выбракована из-за прихода в охоту после третьего осеменения. У свиноматок опытной группы – успешное осеменение проведено на 4,2±0,20 сут после отъема поросят, что раньше контроля в 1,2 раза (P ≤ 0,05), при этом данный период в группе интактных животных составил 5,1±0,24 сут. В то же время четырех самок контрольной группы оплодотворили в первую охоту, а пять – в последующие половые охоты. В опытной группе после применения «Е-селена» и «Гамавита» оплодотворение наступило у всех животных в первую половую охоту, что на 60 % выше значения контроля. Важным фактором, влияющим на количество опоросов в год, является длительность супоросности. Была установлена достоверная разница показателей в опытной группе, где период супоросности составил 115,1±0,12 суток против 115,68±0,11 в контроле

(P ≤ 0,01), при этом все свиноматки данной группы опоросились, а в контрольной принесли потомство только девять свиноматок.

Выводы. Комплексное введение селенсодержащего препарата «Е-селен» и иммуномодулятора «Гамавит» свиноматкам после отъема поросят оказывает положительное влияние на биохимические, гормональные, морфологические и иммунологические показатели крови, которые сопровождались усилением белкового обменного процесса, интенсивной стимуляцией выработки гормона прогестерона, а также ускоренным формированием клеточного звена иммунитета, тем самым повышая резистентность организма свиноматок.

У свиноматок сократился период после отъема поросят и проявления охоты (P ≤ 0,05), длительность периода супоросности и повысилась эффективность оплодотворения в первую половую охоту.