Биоремедиация нефтезагрязненных грунтов на технологических площадках

Загрязнение земель нефтью и нефтепродуктами, особенно в регионах интенсивной разработки месторождений углеводородного сырья, является одной из серьезных экологических проблем современной России. Нефтезагрязнения оказывают отрицательное воздействие на химические, физические и биологические свойства почв. Под влиянием нефти и ее компонентов изменяется численность полезных почвенных микроорганизмов основных физиологических групп, уменьшается активность окислительно-восстановительных и гидролитических ферментов, ухудшаются агрофизические, агрохимические свойства почвы, снижается обеспеченность почвы подвижными формами азота и фосфора. На сегодняшний день при данном уровне развития в промышленности проблема восстановления природного потенциала нефтезагрязненных территорий весьма актуальна. Для снижения неблагоприятных воздействий нефтяного загрязнения на окружающую среду необходимо знание закономерностей биохимической трансформации загрязняющих веществ в различных природных условиях, прогноз их изменения во времени и в пространстве, научное обоснование мероприятий по обезвреживанию нефтезагрязнений.

Известно, что биодеградация нефти и нефтепродуктов в почве происходит при активном участии почвенных микроорганизмов, способных использовать нефтесоединения в качестве источника энергии. Микроорганизмы способны разрушать практически любые соединения: органические или минеральные, но при условии

применения смесей культур. Штаммы микроорганизмов, утилизирующие углеводороды, эффективно применяют для биоремедиации нефтезагрязненных экосистем. Биоремедиация основана на принципе ex situ, т.е. процесс очистки ее от поллютантов за пределами места загрязнения, что делает этот подход более дорогостоящим, чем биоремедиация in situ. Тем не менее, у технологий данного типа есть ряд преимуществ: они требуют меньше времени и обеспечивают полный контроль процесса очистки.

Основную роль в разложении углеводородов в почве играет бактериальная микрофлора. В почве преобладающая часть углеводородокис-ляющих микроорганизмов принадлежит бактериям рода Pseudomonas, Azotobacter, Bacillus, которые могут успешно развиваться в широком диапазоне природно-техногенных условий и являются одним из важнейших факторов в процессе деструкции нефтепродуктов [1]. Созданные отделом биотехнологии ОАО «МНИИЭКО ТЭК» бактериальный препарат БИОР-АВ содержит активные культуры микроорганизмов, разлагающих нефть, которые депонированы во ВНИИсельхозмикробиологии (г. Санкт-Петербург) и имеют санитарно-эпидемиологическое заключение, выданное Государственной санитарно-эпидемиологической службой РФ [2]. Препарат биорекультиват АВ (БИОР-АВ) – биодеструктор нефти содержит следующий состав (%): гуминовые кислоты – 65,0; карбоновые кислоты – 11,0; аминокислоты – 13,36; полисахариды – 0,6; витамины группы В – 0,04; активная микрофлора – 10,0. Активная микрофлора препарата содержит Azotobacter chroococcum, Bacillus megaterium, Pseudomonas fluarescens.

Способ обезвреживания нефтезагрязненных грунтов предусматривает разложение нефти и нефтепродуктов с помощью микроорганизмов рода Pseudomonas, Azotobacter, Bacillus до уровня санитарных норм (не более 20 г/кг почвы) для последующего использования грунта в дорожном строительстве. Последовательность выполнения работ по восстановлению грунтов:

• -    техническая подготовка участка, включающая размещение нефтезагрязненных грунтов с помощью специальной техники и планировку поверхности;

• -    внесение минеральных удобрений (например, нитроаммофоска), содержащих азот, фосфор, калий, необходимых для развития микроорганизмов, разлагающих нефть в дозе 150 кг/га. Внесение минеральных удобрений производится 1 раз перед первым рыхлением (фрезерованием) на глубину ~ 20 см, рыхление используется для улучшения водно-физического режима и условий аэрации грунта;

• -    внесение бактериального препарата с последующим рыхлением (фрезерованием) на глубину ~ 20 см производится от 3 до 5 раз в сезон в зависимости от остаточного содержания нефти в грунтах с интервалом в 20 дней; максимальная доза бактериального препарата при первой обработке составляет 100 кг/га, при последующих обработках доза корректируется в зависимости от результатов химических и микробиологических анализов грунта.

Работы по биоремедиации нефтезагрязненных грунтов с использованием бактериального препарата «Биорекультиват АВ (БИОРАВ)» проводятся в летнее время с мая по октябрь. До начала работ отбираются пробы грунта для выполнения химических анализов на содержание нефтепродуктов. Пробы отбираются по правилу «конверта» в 5 точках в каждом расчетном квадрате с глубины 15-20 см в соответствии с ГОСТ 17.4.4.02-84 в полиэтиленовые пакеты. Параллельно с химическими анализами выполняются микробиологические анализы отделом биотехнологии на содержание родов бактерий, разлагающих нефть (Pseudomonas, Azoto-bacter,Bacillus). В процессе работ отбор проб грунта, выполнение химических и микробиологических анализов производится каждый раз перед очередным рыхлением (фрезерованием) грунта.

Бактериальный препарат производится, хранится и перевозится в сухом виде в пакетах весом 5 кг и вносится в грунт в виде суспензии.

Для получения суспензии сухой бактериальный препарат разводят в воде и выдерживают в течение 2 часов при периодическом перемешивании. На 1 кг бактериального препарата используется 100 л воды. Обработка рекультивируемого участка бактериальным препаратом обычно производится с помощью поливочной машины. Биопрепарат содержит культуры микробов-деструкторов нефтепродуктов с титром 10^-12 и применяется в дозе 100-150 кг/га в зависимости от содержания нефтепродуктов. Рыхление проводится 1-2 раза в неделю с помощью боронования на глубину 20 см для ускорения микробного окисления загрязняющих почву нефтепродуктов. Приблизительно через 20 дней проводится дополнительное внесение микробов рода Pseudomonas, Azotobacter, Bacillus . Доза бакпрепарата определяется по количеству оставшихся нефтепродуктов в грунтах, т.е. при их уменьшении снижается количество вносимых микроорганизмов.

Опытно-промышленное применение способа биоремедиации нефтезагрязненных грунтов осуществлялось в течение летнего периода 2009 г. на технологических площадках (рабочих зонах) МУП по утилизации отходов Пермского района, расположенных на полигоне «Ольховка» Пермского района Пермского края: рабочая зона №1 V- 2400 м3 и S- 0,8 га, рабочая зона № 2 V-900 м3 и S- 0,3 га. В процессе проведения опытно-промышленных работ на опытных участках после обработки их биопрепаратом определялись следующие химические, микробиологические и биологические показатели:

• -    нефтепродукты, содержащиеся в почвогрунтах, методом РД 39-014 7098-015-90 п. 4.1;

• -    содержание микроорганизмов-деструкторов нефти количественным методом на селективных средах [3];

• -    токсичность почногрунтов методом биотестирования с помощью дафний Magna straus[4].

Результаты химических и микробиологических анализов опытно-промышленных работ на полигоне Ольховка представлены в таблице. Результаты химического анализа на содержание нефтепродуктов на участке рабочая зона № 1 (Полигон Ольховка) показали что количество нефти снизилось с 44760 до 20045 мг/кг, в рабочей зоне № 2 - с 27520 до 19325 мг/кг.

Таблица. Результаты химических и микробиологических анализов нефтезагрязненных грунтов на полигоне Ольховка МУП по утилизации отходов

Из таблицы следует, что аборигенная угле-водородокисляющая микрофлора, являющаяся постоянным компонентом почвенных биоценозов, заметно активизировалась после обработки микроорганизмами рода Pseudomonas, Azotobac-ter, Bacillus и возросло их количество, что подтверждает высокий потенциал очистки от нефти обработанных участков. Из приведенных в таблице данных видно, что количество нефти на всех технологических площадках снизилось до санитарных норм, что обеспечило их использование в строительстве дорог и обваловке нефтезагрязнённых участков. Биотестирование показало, что очищенные от нефти почвогрунты не оказывают токсического действия на тест объекты.

Таким образом, проведенные опытнопромышленные испытания по обезвреживанию нефтезагрязненных грунтов с помощью активных штаммов микроорганизмов показали, что данный способ является перспективным и может быть использован на техногенных и деградированных территориях, загрязненных нефтепродуктами. Количество нефти после обработки препаратом БИОР-АВ снижается до санитарных норм, что обеспечивает их использование в строительстве дорог и обваловке нефтезагрязненных участков

Выводы: используемый метод при правильном применении позволяет обеспечить высокое качество детоксикации земель за вегетационный период. Применение комплексного биопрепарата, содержащего микроорганизмы рода Pseudomonas, Azotobacter,Bacillus, активизированных к условиям детоксикации нефтезагрязненных земель позволяет очищать почвогрунты от нефти до санитарной нормы с содержанием остаточной нефти до 20 г/кг и использовать впоследствии в дорожном строительстве, отсыпке площадок, обустройства обваловок.