Действие растительных полисахаридов на гемопоэз здоровых животных

Установлено, что полисахариды донника желтого, крапивы двудомной [ 3,6 ] , пижмы обыкновенной, мать и мачехи и др., при введении в организм животных увеличивают количество эритробластических островков костного мозга, изменяя при этом соотношение островков различного уровня зрелости. Полисахариды ускоряют процессы пролиферации и дифференциации клеток эритробластов и увеличивают количество зрелых эритроцитов, лимфоцитов в периферической крови. При этом количество гемоглобина в крови так же увеличивается [ 7 ] .

Материалы и методы

Полисахариды экстрагировали из растительного сырья бузины черной (Sambucus nigra), цветков календулы (Calendula off), травы лопуха большого (Arctium Lappa), предварительно обработанного 40% водным раствором этанола для удаления экстрактивных веществ, моно- и олигосахаридов, кислот, полифенольных соединений [2]. Полисахариды из растительного сырья извлекали экстракцией 1% водным раствором щавелевокислого аммония в течение 1,5 часов на кипящей водяной бане. Экстракцию повторяли 2-3 раза, объединённые экстракты упаривали в вакуумном роторном испарителе до небольшого объема. Полисахариды из экстракта осаждали 7-кратным избытком 96% этанола, промывали несколько раз этанолом, ацетоном, диэтиловым эфиром. Очищали полисахариды переосаждением, диализом.

Все полисахариды представляют собой вещества светло-серого цвета растворимые в воде. Выход из растительного сырья составил: для полисахарида лопуха большого – 12,83%, цветков календулы – 13,5%, растений бузины черной – 14,2%.

В работе с животными использовали 5% водный раствор каждого полисахарида.

Все животные контрольных и подопытных групп массой 180-220 г крысы самцы линии Wistar содержались в стандартных условиях вивария. Крысам подопытных групп полисахариды вводили per os через зонд в дозе 0,1 г/кг массы тела в одно и тоже время, ежедневно в течение 10-15 суток. Животным контрольных групп вводили дистиллированную воду в том же объеме и в тоже время.

У всех животных контрольных и подопытных групп в каждом эксперименте для исследований брали кровь, бедренные кости, тимус и селезенку. Животных выводили из эксперимента передозировкой средствами для наркоза Ксила или Золетил. Кровь животных анализировали оптическим методом на гемоанализаторе фирмы SYSMEX, а так же для подсчета клеток крови использовали мазки крови, которые готовили по стандартной методике, окрашивали по Романовскому-Гимзе.

Для определения численности эритробластических островков костного мозга использовали методику Захарова Ю.М. [ 1 ]

Все полученные результаты обрабатывали методами математической статистики с использованием программы StatSoftStatistica 13.

Результаты и обсуждения

Нами впервые было установлено, что 5% водные растворы полисахаридов бузины черной (латынь), цветков календулы и лопуха большого при введении подопытным здоровым крысам самцам линии

Wistar в дозе 0,1 г/кг массы тела стимулируют увеличение общего количества эритробластических островков в структуре костного мозга максимально на 5 сутки опыта при действии полисахарида бузины черной на 53,73%. Полисахарид календулы максимально увеличивает число эритробластических островков на 5 день введения на 14,62%, а полисахарид лопуха большого на 5 день эксперимента на 20,7% (р<0,05). При этом в костном мозге происходит ускорение процесса созревания эритроидных клеток, количество островков III класса заметно возрастает, превосходит контрольные значения на 15%-25% (р<0,05) под воздействием указанных полисахаридов.

Седьмые сутки опыта показали, что общая численность островков продолжает увеличиваться и превосходит показатели контрольных значений под действием полисахарида бузины черной на 40,5%, лопуха большого 15,8% и цветков календулы 6,43% (р<0,05).

На 10 день введения полисахаридов общее количество островков в костном мозге немного уменьшается, но превосходит показатели здорового контроля при действии полисахарида бузины черной на 29,7%, цветков календулы 3,12%, а растительного полисахарида лопуха большого на 9,36% (р<0,05).

После 15 дней введения полисахаридов листьев лопуха большого и бузины черной группам экспериментальных животных общая численность эритробластических островков в костном мозге крыс снижается, но на 57% превосходит контрольные значения. Под влиянием воздействия полисахарида цветков календулы общее количество островков остается на уровне контрольных значений.

Состав крови подопытных животных заметно меняется при введении полисахаридов растений. Количество эритроцитов и уровень гемоглобина в периферической крови крыс на 3 сутки опыта увеличивается под действием полисахарида лопуха большого на 4,57% и 11,58%, а календулы на 9,8% и 7,93% соответственно (р<0,05). Под действием полисахарида бузины черной количество эритроцитов и гемоглобина остаются на уровне верхней границы нормы.

На 5 сутки введения полисахаридов здоровым животным под действием полисахарида из бузины черной численность эритроцитов возрастает на 5,6%, а гемоглобина на 5,4% по отношению у здоровому контролю (р<0,05). Введение полисахарида лопуха большого приводит к максимальному росту количества эритроцитов на 10,56% и гемоглобина на 19,6% (р<0,05) по сравнению с показателями здоровых крыс на получающий полисахарид.

Введение полисахарида календулы в течение 5 дней вызывают увеличение числа эритроцитов и гемоглобина на 19,93% и 10,6% (р<0,05) по отношению к контролю.

Максимальный рост численности эритроцитов и количество гемоглобина происходит на 7 день введения полисахаридов календулы и составляет 17,1% и 13,2% соответственно. Полисахарид лопуха большого увеличивает количество эритроцитов в крови подопытных крыс до 8,20±0,31•1012/л, а гемоглобина 175,3±0,21 г/л (р<0,05). Под воздействием полисахарида календулы на 10 день опыта уровень эритроцитов составляет 6,4±0,12•1012/л (р<0,05), а гемоглобина 130,7±1,22 г/л (р<0,05), что на 6,4% и на 3,65% соответственно превосходит контрольные показатели.

Полисахарид бузины черной максимально увеличивает количество эритроцитов до 8,36±0,12•1012 г/л, а гемоглобин до 154,7±1,12 г/л (р<0,05), что превосходит показатели здоровых крыс на 27,24% и на 14,85% соответственно, на 10 сутки.

Показатели значений эритроцитов и гемоглобина в последующие дни введения полисахаридов снижаются, но на 15 сутки опыта превосходят контрольные значения на 3%-5% под действием полисахаридов календулы, лопуха большого и бузины черной. Данные отражены в таблице 1 и рисунках 1 и 2.

Таблица 1. Показатели значений эритроцитов и гемоглобина после введения полисахаридов

Показатели числа эритроцитов, *1012 /л
	контроль	3 сутки	5 сутки	7 сутки	10 сутки	15 сутки
Бузина черная	6,57±0,28	6,60±0,18	6,96±0,62	8,02±0,31	8,36±0,12	7,50±0,28
Календула	5,92±0.24	6,50±0,72	7,1±0,81	6,93±0,40	6,40±02.1 8	6,00±0,25
Лопух большой	6,57±0,30	6,87±0,52	7,60±0,35	8,20±0,42	8,66±0,24	7,41±0,14
Показатели уровня гемоглобина, г/л
	контроль	3 сутки	5 сутки	7 сутки	10 сутки	15 сутки
Бузина черная	152,8±1,18	154,6±0,58	162,9±1,85	159,7±0,18	154,7±1,1 2	160,1±1,02
Календула	126,0±1,80	136,0±0,35	139,3±1,42	137,6±1,12	130,7±0,8 9	125,2±0,56
Лопух большой	155,5±1,54	170,6±0,45	177,9±0,56	175,3±0,21	164,3±0,4 5	157,8±0,32

(р<0,05)

Рисунок 1. Динамика изменения количества эритроцитов

Показатели значений эритроцитов под действием введения полисахарида, *1012 /л

Показатели уровня гемоглобина под действием введения полисахарида, г/л

■ Бузина черная ■ Календула ■ Лопух большой

Рисунок 2. Динамика изменения количества гемоглобина

(р<0,05)

Выводы

• 1)    Полисахариды лопуха большого, бузины черной, цветков календулы

при введении в организм здоровых животных максимально увеличивают общее количество эритробластических островков в костном мозге на 5 сутки эксперимента на 20,7%, 53,73%, 14,62% соответственно.

• 2)    Введение растительных полисахаридов значительно увеличивает численность эритроцитов в периферической крови под влиянием полисахарида лопуха большого на 5 сутки на 10,56%, полисахарида календулы на 5 день опыта на 19,93%, а при воздействии полисахарида бузины черной на 10 день эксперимента на 27,24% и соответственно.

• 3)    Под воздействием полисахаридов растений лопуха большого и цветков календулы количество гемоглобина максимально увеличивается на 5 сутки опыта на 19,6% и 10,6% соответственно, а под влиянием полисахарида бузины черной на 10 сутки опыта на 14,85%.