Динамика показателей крови крыс при внутрижелудочном введении экстракта семян лотоса орехоносного (Nelumbo nucifera)

О целебных свойствах лотоса орехоносного ( Nelumbo nucifera ) (ЛО) известно с древних времен. Еще в древнем Китае его корневища использовали как мочегонное, кровоостанавливающее, тонизирующее средство, а также при недостатке витамина B₁ [1]. Плоды лотоса входят в состав более двухсот препаратов китайской и индийской медицины. Экстракт семян ЛО обладает гепатопротективным и снижающим интенсивность процессов свободнорадикального окисления действием [2]. Исключительной особенностью крови как функциональной системы является то, что она объединяет работу многих физиологических систем организма [3]. Таким образом, состояние крови является важнейшим показателем для определения воздействия различных факторов на живой организм.

Цель данной работы: изучить динамику показателей крови при внутрижелудочном введении экстракта семян ЛО.

Материал и методы исследования. Водно-спиртовой экстракт семян ЛО был приготовлен согласно протоколу WHO CG-04 [4]. 500 г семян высушивали, измельчали до порошкообразного состояния и подвергали спиртовому

экстрагированию 50%-ным этиловым спиртом в аппарате Сокслета, затем отгоняли спирт в ротационном испарителе. Выход активного экстракта – около 5% вязкого смолообразного вещества. Раствор экстракта ЛО (0,5%-ный), приготовленный на физиологическом растворе, вводили животным внутрижелудочно с помощью зонда в дозе 50 мг/кг массы тела. В эксперименте были использованы 117 самок крыс (средняя масса – 220 г, возраст – 20-24 мес.). Животные содержались в стандартных условиях вивария при свободном доступе к воде и пище. Самки крыс были разделены на три группы: I – интактный контроль, II – животные, получавшие внутрижелу-дочно физиологический раствор, III – животные, получавшие внутрижелудочно раствор экстракта семян ЛО. Животные получали раствор экстракта ЛО и физиологический раствор ежедневно в одно и то же время с 10 до 12 часов. Декапитацию животных проводили после предварительной наркотизации легким диэтиловым эфиром на 7, 14, 21, 28 и 42 дни введения растворов. Были исследованы: процентное соотношение между различными видами лейкоцитов, количество эритроцитов и лейкоцитов, степень перекисного гемолиза эритроцитов [5]. Полученные данные были подвергнуты статистической обработке с использованием критерия Стьюдента.

Результаты и их обсуждение. В ходе эксперимента было выявлено, что в группе, где животные получали экстракт ЛО, количество эритроцитов на 21-й день после начала введения достоверно повышалось по сравнению с интактным контролем. На 28 день после начала введения данный показатель практически не отличался от контрольного значения. Перекисный гемолиз эритроцитов (ПГЭ) является чувствительным показателем, отражающим про- и антиоксидантный баланс организма. Внутрижелудочное введение экстракта ЛО не приводило к существенным изменениям исследуемого показателя. На 28 день была отмечена тенденция к росту ПГЭ при внут-рижелудочном введении физиологического раствора, в то время как при введении экстракта данный показатель стабилизировался после незначительного увеличения на 14 день. Вероятно, это может быть связано с мембраностабилизирующим действием экстракта ЛО. Количество лимфоцитов в группе, где животные получали экстракт ЛО, резко понизилось на 7 день введения, а в последующие 14, 21, 28 и 42 дни эксперимента стабильно повышалось и достигло контрольного значения. В группе, где животные получали физиологический раствор, данный показатель на 7 день эксперимента не отличался от контрольного значения, а в последующие дни введения незначительно понижался (рис. 1).

физиологический р-р; экстракт Л. Орехоносного

Рис. 1. Влияние экстракта ЛО на количество лимфоцитов, %

Условные обозначения (здесь и далее): * - достоверность различий между группами животных интактного контроля и остальными группами животных (по Стьюденту); * - р<0,05; ** - p<0,01;*** - p<0,001. # - достоверность различий между группами животных физ. р-р. 1 гр. и экстракт лотоса 1 гр. (по Стьюденту): # - р<0,05; ## - p<0,01;### - p<0,001; о - достоверность различий между группами животных физ. р-р. 3 гр. и экстракт лотоса 3 гр. (по Стьюденту): о - р<0,05; оо - p<0,01; ооо - p<0,001; ■ - достоверность различий между группами животных физ. р-р. 4 гр. и экстракт лотоса 4 гр. (по Стьюденту): ■ - р<0,05; ■■ - p<0,01; ■■■ - p<0,001; • - достоверность различий между группами животных физ. р-р. 5 гр. и экстракт лотоса 5 гр. (по Стьюденту): • - р<0,05; •• -p<0,01; •• • - p<0,001.

Количество моноцитов на 7, 14 день после начала эксперимента практически не отличалось от контрольного значения как у животных, получавших физиологический раствор, так и у животных, получавших экстракт ЛО. В последующие 21, 28 и 42 дни после начала введения, у животных получавших экстракт, данный показатель повышался практически в 2 раза, а у животных, получавших физиологический раствор - в 10 раз (рис. 2).

Количество нейтрофилов изменялось следующим образом: в группе, где животные получали экстракт ЛО, самый высокий уровень данный показатель достигал на 7 день эксперимента, затем стабильно понижался и на 28, 42 день введения не отличался от контрольного значения.

У животных, получавших физиологический раствор, количество нейтрофилов повышалось только на 14 и 21 день эксперимента, а в остальные дни не отличалось от интактного контроля (рис. 3).

физиологический р-р; экстракт Л. Орехоносного

Рис. 2. Влияние экстракта ЛО на количество моноцитов, %

физиологический р-р;  экстракт Л. Орехоносного

Рис. 3. Влияние экстракта ЛО на количество нейтрофилов, %

Уровень эозинофилов при введении физиологического раствора незначительно повышался на 7, 14, 28 и 42 день эксперимента, на 21 день от начала эксперимента данный показатель достоверно понизился. У животных, получавших экстракт ЛО, количество эозинофилов достоверно повышалось практически в 2 раза на 28 и 42 дни введения, в остальные дни отличия от контроля незначительны (рис. 4).

физиологический р-р; экстракт Л. Орехоносного

Рис. 4. Влияние экстракта ЛО на количество эозинофилов, %

Общее количество лейкоцитов значительно понизилось на 7 день эксперимента, как в группе, где животные получали экстракт ЛО, так и в группе, где животные получали физиологический раствор. В последующие 14, 21, 28 и 42 дни введения, показатели практически не отличались от контрольного значения в обеих группах. Нейтрофилия, сочетающееся с лейкопенией на 7 день эксперимента при воздействии на животных экстракта семян ЛО может являться своеобразной защитой организма в ответ на действие экзогенных (стресс животного при внутрижелудоч-ном введении экстракта) и эндогенных (действие экстракта) факторов [6]. Это подтверждает и тот факт, что в последующие дни эксперимента оба показателя нормализовались и на 42 день введения практически не отличались от контрольного значения. Понижение количества эозинофилов на 7, 14, 21 дни введения может быть реакцией организма на стресс, а последующее резкое возрастание, практически в 2 раза, данного показателя является гиперкомпенсаторной реакцией системы крови.

Выводы: внутрижелудочное введение экстракта семян ЛО не приводило к патологическим изменениям показателей крови, что свидетельствует об отсутствии токсического эффекта экстракта.

физиологический р-р; экстракт Л. Орехоносного

Рис. 5. Влияние экстракта ЛО на количество лейкоцитов (× 10⁹)