Доклиническое исследование поливалентной вакцины против мастита коров

Автор: Махмутов А.Ф., Спиридонов Г.Н., Дуплева Л.Ш., Хусаинов И.Т., Зарипов А.С.

Журнал: Вестник Красноярского государственного аграрного университета @vestnik-kgau

Статья в выпуске: 1, 2025 года.

Бесплатный доступ

Цель исследования - доклиническое изучение поливалентной вакцины против мастита коров. Вакцина изготовлена на основе инактивированных бактерий штаммов Streptococcus uberis «3Т-СД», Staphylococcus aureus «18-Ц», E. coli «19-СД». В качестве адъюванта использован 6 % гель гидроокиси алюминия. При доклиническом исследовании проведено изучение физико-химических характеристик вакцины, полноты инактивации и стерильности, безвредности, пирогенности, антигенной активности, а также определение оптимальной прививной дозы вакцины для коров и изучение безвредности двукратного введения вакцины в профилактической и повышенной дозах. Поливалентная вакцина против маститов стерильна, безвредна для лабораторных (кролики) и целевых (коровы) животных. Двукратное ее введение способствует у кроликов синтезу специфических антител в сыворотке крови к антигену Staphylococcus aureus в титре 853,33 ± 261,28, к антигенам Streptococcus uberis и E. coli в титрах 640,0 ± 0,0. Установление оптимальной прививной дозы препарата для целевых животных проведено на 3 группах коров по 5 гол. в каждой. Испытывались дозы 3; 5 и 7 см3. Оптимальная прививная доза вакцины для коров - 5 см3 при двукратном ее применении с интервалом 14 сут. После двукратного введения вакцины в профилактической и повышенной дозах у животных сохраняется нормальное физиологическое состояние, отсутствуют признаки патологических местных и системных реакций. Животные активно передвигаются, охотно принимают корм и воду, общая температура тела у них остается в пределах физиологической нормы.

Еще

Коровы, мастит коров, поливалентная вакцина, доклиническое исследование вакцины, лабораторные животные

Короткий адрес: https://sciup.org/140308004

IDR: 140308004 | DOI: 10.36718/1819-4036-2025-1-119-125

Текст научной статьи Доклиническое исследование поливалентной вакцины против мастита коров

Введение. В скотоводческих хозяйствах маститы являются одной из распространенных болезней, где ежегодно переболевают различными формами маститов от 30 до 60 % коров. Причинами возникновения субклинических и клинических форм маститов, кроме не надлежащего содержания и кормления коров, является биологический фактор – патогенные и условно-патогенные микроорганизмы, такие как Streptococcus spp., Staphylococcus spp. , E. coli, Mycoplasma bovis, грибы Aspergillus spp., Candida spp. – возбудители акушерско-гинекологических заболеваний [1–4].

Маститы, особенно субклинические формы, причиняют производителям молока большой экономический ущерб, что связано с ухудшением качества молока и заболеваниями новорожденных телят вследствие приема некачест-

венного молока/молозива, а также расходов на лечебно-оздоровительные мероприятия [5].

Широкое применение лекарственных средств для лечения и профилактики маститов не всегда достигает своей цели. Это связано с тем, что многие возбудители болезни по ходу их применения приобретают устойчивость к ним. Отрицательно сказывается также остаточное содержание антибиотиков на качество молока [6]. Поэтому необходимо изыскать новые подходы для борьбы с маститами коров. Нами для специфической профилактики мастита коров разработана вакцина поливалентная на основе инактивированных антигенов бактерий Streptococcus uberis , Staphylococcus aureus, E. coli – возбудителей мастита коров.

Цель исследования – доклиническое изучение поливалентной вакцины против мастита коров.

Объекты и методы. При доклиническом исследовании проводили изучение физикохимических характеристик вакцины, полноты инактивации и стерильности, безвредности, пирогенности, антигенной активности, а также определение оптимальной прививной дозы вакцины для коров.

Определение физико-химических характеристик вакцины проводили визуально. Контроль стерильности вакцины проводили микробиологическим путем по ГОСТ 28085-2013 «Средства лекарственные биологические для ветеринарного применения. Методы контроля стерильности», определение безвредности – по ГОСТ 31926-2013 «Средства лекарственные биологические для ветеринарного применения. Методы определения безвредности».

Определение пирогенности вакцины проводили на трех кроликах живой массой от 2,5 до 3,5 кг. В период проведения опытов кролики находились в отдельной комнате с постоянной температурой, с колебанием не более чем на ± 2 °С. Измерение температуры тела у кроликов осуществляли после введения вакцины пять раз с промежутками в один час. Вакцину считали не пирогенной, если сумма повышений температуры у кроликов была меньше или равна 1,4 °С.

Исследованием титров специфических антител в сыворотке крови вакцинированных животных оценивали антигенную активность вакцины. Для этого трем кроликам массой от 2,0 до 2,5 кг подкожно вводили испытуемую вакцину двукратно с интервалом 14 сут в дозе 2 см³. Титры специфических антител к антигенам бактерий Streptococcus uberis , Staphylococcus aureus, E. coli определяли в сыворотке крови на 14 сутки после второй вакцинации в реакции агглютинации.

Определение оптимальной прививной дозы поливалентной вакцины проводили на 15 коровах в возрасте от 3 до 5 лет, живой массой от 550 до 650 кг, разделенных на три группы по пять голов в каждой. Коровам первой группы вакцину вводили двукратно, подкожно в дозе 3 см3, второй группы – 5 см3, третьей группы – 7 см3. От животных до введения вакцины, через 14 сут после первой и второй иммунизации отбирали пробы крови для определения титров специфических антител. По уровню антител определяли оптимальную прививную дозу вакцины.

Результаты и их обсуждение. Поливалентная вакцина против мастита коров изготовлена на основе инактивированных антигенов штаммов бактерий – возбудителей мастита коров Streptococcus uberis «3Т-СД», Staphylococcus aureus « 18-Ц», E. coli «19-СД». Физикохимические и иммунобиологические показатели вакцины представлены в таблице 1.

Показатели антигенной активности вакцины представлены в таблице 2.

Таблица 1

Физико-химические и иммунобиологические показатели поливалентной вакцины против мастита коров

Physico-chemical and immunobiological parameters of the multivalent vaccine against cow mastitis

Показатель	Поливалентная вакцина против мастита коров
Физико-химические свойства	Суспензия серовато-желтоватого цвета
Стерильность	Стерильна
Безвредность	Безвредна
Пирогенность	Апирогенна
Антигенная активность в РА	Индуцирует образование специфических антител: к Streptococcus uberis «3Т-СД» – 853,33±261,28; Staphylococcus aureus « 18-Ц» – 640,0±0,0; E. coli «19-СД» – 640,0±0,0

Таблица 2

Титры специфических антител в сыворотке крови кроликов, иммунизированных вакциной против мастита коров (M ± m) (n = 3) Titers of specific antibodies in the blood serum of rabbits immunized with the cow mastitis vaccine (M ± m) (n = 3)

Из таблицы 2 видно, что поливалентная вакцина против мастита коров обладает выраженной антигенной активностью. При двукратном введении она способствует накоплению специфических антител в крови кроликов к антигену Staphylococcus aureus в титре 853,33 ± 261,28, к

антигенам Streptococcus uberis и E. coli в титрах 640,0 ± 0,0.

Результаты исследования по определению оптимальной дозы поливалентной вакцины для коров приведены в таблице 3.

Таблица 3

Номер серии вакцины	Вид антигена в поливалентной вакцине	Уровень антител в РА
		С	роки исследования
		до иммунизации	после 1-й иммунизации	после 2-й иммунизации
1	Staphylococcus aureus	0,0 ± 0,0	213,33 ± 65,32	853,33 ± 61,28
	Streptococcus uberis	0,0 ± 0,0	160,0 ± 0,0	640,0 ± 0,0
	E. coli	0,0 ± 0,0	213,33 ± 65,32	640,0 ± 0,0
2	Staphylococcus aureus	0,0 ± 0,0	213,33 ± 65,32	853,33 ± 61,28
	Streptococcus uberis	0,0 ± 0,0	213,33 ± 65,32	640,0 ± 0,0
	E. coli	0,0 ± 0,0	160,0 ± 0,0	640,0 ± 0,0

Титры специфических антител в сыворотке крови коров, вакцинированных разными дозами вакцины (M ± m) (n = 5) Titers of specific antibodies in the blood serum of cows vaccinated with different doses of the vaccine (M ± m) (n = 5)

Данные, приведенные в таблице 3, свидетельствуют, что иммунизация коров поливалентной вакциной сопровождается образованием специфических антител в крови животных в высоких титрах против всех антигенных компонентов вакцины. Наиболее высокие титры выявлены у животных второй и третьей групп, двукратно вакцинированных в дозах 5 и 10 см3, соответст-

венно. У животных третьей группы они были чуть выше, но достоверной разницы между титрами антител животных второй группы не выявлено. Таким образом, оптимальной прививной дозой вакцины для коров является 5 см3 при двукратном ее применении.

При исследовании установлено также, что после двукратного введения вакцины в профилакти-

Доза вакцины, см³	Вид антигена в вакцине	Уровень антител в РА
		Сроки исследования
		до иммунизации	после 1-й иммунизации	после 2-й иммунизации
3 + 3	Staphylococcus aureus	0,0±0,0	256,00±43,82	512,00±87,64
	Streptococcus uberis	0,0±0,0	160,00±0,00	320,00±0,00
	E. coli	0,0±0,0	192,00±35,78	384,00±71,55
5 + 5	Staphylococcus aureus	0,0±0,0	512,00±87,64	1024,00±175,27
	Streptococcus uberis	0,0±0,0	512,00±87,64	1024,00±175,27
	E. coli	0,0±0,0	576,00±71,55	1152,00±143,11
7 + 7	Staphylococcus aureus	0,0±0,0	576,00±71,55	1152,00±143,11
	Streptococcus uberis	0,0±0,0	576,00±71,55	1152,00±143,11
	E. coli	0,0±0,0	576,00±71,55	1152,00±143,11

Таблица 4

Группа животных (доза вакцины)	Инвентарный номер животного	Температура тела животных, °С
		Перед введением вакцины	После введения вакцины
		Перед введением вакцины	через 24 ч	через 48 ч	через 96 ч
Первая – опытная (5 см³)	280	38,6	38,4	38,5	38,5
	900	38,1	38,4	38,2	38,1
	922	38,4	38,5	38,5	38,6
	664	38,5	38,5	38,4	38,5
	1324	38,7	38,6	38,5	38,6
	Средняя	38,46±0,12	38,48±0,04	38,42±0,07	38,46±0,10
Вторая – опытная (10 см³)	846	38,5	38,3	38,4	38,5
	948	38,5	38,5	38,5	38,5
	1414	38,8	38,5	38,6	38,5
	1182	38,9	38,8	38,7	38,5
	16/22	38,8	38,5	38,5	38,6
	Средняя	38,70±0,09	38,52±0,09	38,54± 0,06	38,52±0,02
Третья – контрольная	732	38,7	38,6	38,5	38,6
	1756	38,4	38,4	38,4	38,4
	1494	38,5	38,5	38,6	38,5
	12/25	38,7	38,7	38,6	38,5
	1590	38,6	38,7	38,6	38,6
	Средняя	38,58±0,07	38,58±0,07	38,54±0,04	38,52±0,04

Таблица 5

Группа животных (доза вакцины)	Инвентарный номер животного	Температура тела животных, °С
		Перед ведением вакцины	После введения вакцины
		Перед ведением вакцины	через 24 ч	через 48 ч	через 96 ч
1	2	3	4	5	6
Первая – опытная (5см³)	280	38,5	38,5	38,4	38,5
	900	38,3	38,5	38,4	38,2
	922	38,5	38,4	38,5	38,5
	664	38,5	38,5	38,5	38,5
	1324	38,6	38,5	38,6	38,5
	Средняя	38,48±0,05	38,48±0,02	38,48±0,04	38,44±0,07
Вторая – опытная (10 см³)	846	38,4	38,4	38,5	38,4
	948	38,5	38,5	38,5	38,6
	1414	38,6	38,5	38,6	38,5
	1182	38,8	38,8	38,8	38,5
	16/22	38,7	38,5	38,6	38,6
	Средняя	38,60±0,08	38,54±0,08	38,60±0,06	38,52±0,04

Окончание табл. 5

1	2	3	4	5	6
Третья – контрольная	732	38,6	38,4	38,3	38,5
	1756	38,5	38,3	38,5	38,4
	1494	38,4	38,5	38,4	38,5
	12/25	38,5	38,5	38,4	38,5
	1590	38,3	38,4	38,3	38,3
	Средняя	38,46±0,06	38,42±0,04	38,38±0,04	38,44±0,04

Список литературы Доклиническое исследование поливалентной вакцины против мастита коров

Бурова Л.А., Тотолян А.А. Основные факторы патогенности Streptococcus pyogenes // Инфекция и иммунитет. 2022. Т. 12, № 1. С. 33-50. DOI: 10.15789/2220-7619-MPF-1723 EDN: LWWOGS
Хамидуллин Р.Р., Тремасова А.М., Идиятов И.И., и др. Микробиоценоз половых путей у коров при остром послеродовом эндометрите // Ветеринарный врач. 2023. № 1. С. 64-69. DOI: 10.33632/1998-698X_2023_1_64 EDN: KYPNXO
Осколкова М.В., Кузьмина Э.В. Этиология мастита и его взаимосвязь с гинекологическими заболеваниями крупного рогатого скота // Ветеринария. 2014. № 4 (48). С. 86-88.
Махмутов А.Ф., Спиридонов Г.Н., Дуплева Л.Ш., и др. Этиологическая структура маститов коров в крупных животноводческих комплексах по производству молока // Ветеринарный врач. 2023. № 2. С. 4-9. DOI: 10.33632/1998-698X_2023_2_4 EDN: EIKFNK
Новикова Е.Н., Коба И.С., Шевченко А.Н. и др.,Метод профилактики акушерско-гинекологической патологии у коров // Ветеринария и кормление. 2018. № 6. С. 25-26. 10.30917/ ATT-VK-1814-9588-2018-6-9. DOI: 10.30917/ATT-VK-1814-9588-2018-6-9 EDN: YPTMSD
Белбуцкая А.А., Скворцов В.Н., Белимова С.С. Антибиотикограмма микроорганизмов, выделенных от больных острым эндометритом коров // Ветеринарный врач. 2019. № 5. С. 4-10. DOI: 10.33632/1998-698X.2019-5-4-10 EDN: BNPHLB

Еще

Статья научная