Физиолого-иммунологические показатели телят при стимуляции коров-матерей иммуномодулятором азоксивет в сочетании с синэстролом 2 %

При современной системе ведения интенсивного скотоводства, телята рождаются с низким иммунным статусом, что является фактором возникновения заболеваний различной этиологии. Современная литература описывает множество случаев появления вторичных иммунодефицитов из-за нехватки в рационе животных белковых, витаминных и минеральных компонентов. Заболевания, развивающиеся на фоне иммунных дефицитов, проявляются наиболее часто желудочно-кишечным, ре- спираторным и септическим синдромами. Для профилактики болезней и с целью повышения защитных свойств организма животных в настоящее время применяется немалое количество синтетических и природных препаратов [1, 3, 5, 6].

Первой точкой формирования резистентности телёнка является корова-мать, она формирует иммунитет теленка путём передачи иммуноглобулинов и клеток иммунной системы (нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов, тканевых макрофагов) в составе молозива [7, 8, 9, 10].

Большую роль в образовании молочной железой высококачественного молозива играют женские половые гормоны - эстрогены (эстрон, эстриол, эстрадиол), синтезирующиеся в фолликулах яичников [4, 9].

Целью нашего исследования стало изучение влияние парентерального введения глубокостельным коровам синтетического аналога эстрона и иммуностимулятора «Азоксивет» на образование в организме, накопление в молочной железе коров перед отелом иммуноглобулинов и выделение их в составе молозива, а также изучение состояния колострального иммунитета и естественной резистентности полученных от них телят. Синтетический аналог женского полового гормона эстрона - Синэстрол 2 % - это производное стильбена, обладающее действием естественного женского полового гормона эстрона, но действующее медленнее и эффективнее. Иммуноглобулины начинают накапливаться в молозиве на последней неделе стельности. Мы предположили, что иммуномодуляторы поспособствуют выработке и последующей аккумуляции иммуноглобулинов в вымени коровы, что позволит получить биологически ценное молозиво [2, 4, 9].

Материал и методы исследований. Опыт проведен в условия СПК «Нижегородец», расположенного в Дальнеконстантиновском районе Нижегородской области, в летний период (июнь-август) 2019 года. Объектом исследования послужили телята, полученные от коров голштинской породы. Предметом исследования стали пробы крови, полученные от телят. Для проведения исследования были сформированы три группы по двадцать животных в каждой: контрольная, 1-опытная и 2-опытная. Группы формировались из клинически здоровых животных по принципу пар-аналогов. При отборе животных для эксперимента учитывались следующие параметры животных: возраст в отёлах (2-3), дни лактации, количество осеменений, физиологическое состояние. Коровам 1-опытной группы за 3-5 дней до предполагаемого отела, внутримышечно вводили Азоксивет в дозе 6 мг. Коровам 2 опытной группы, в тот же период времени, внутримышечно вводили Азоксивет в дозе 6 мг и Синэстрол 2 % подкожно в дозе 1 мл. Коровам контрольной группы внутримышечно вводили 2 мл физиологического раствора. Полученные от коров телята распределялись в соответствующие группы. В течение первых 40 минут жизни телятам выпаивали 2,5 литра молозива от коров-матерей при помощи дренчер зонда. Перед выпойкой, молозиво проверялось визуально на предмет мастита. Если в ходе проверки молозиво было не пригодно для употребления теленком, корова и полученный от неё приплод исключались из эксперимента. Для лабораторных исследований у телят отбирали кровь в первые 30 минут жизни, затем через 1 час после выпойки молозива, спустя сутки от рождения, а также на 7, 14 и 30 день жизни.

Лабораторные исследования крови проводились на анализаторе Minicap, Sebia (белковые фракции), определение БАСК при помощи тест-культуры Escherichia coli, ЛАСК с использованием тест-культуры Micrococcus lysodeikticus; ФАН с использованием тест-культуры Staph. albus; содержание Т-лимфоцитов методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК) и В-лимфоцитов - методом розеткообразования с эритроцитами быка в системе ЕАС-РОК (Скопичев В.Г., Максимюк Н.Н., 2009). Содержание общих иммуноглобулинов молозива (Ig) определяли методом, описанном в справочнике «Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики», на фотометре КФК-3 «ЗОМЗ» с использованием натрия сульфита. Полученный цифровой материал подвергали статистической обработке с использованием общепринятых биометрических методов, степень достоверности определяли по t-критерию Стьюдента с применением пакета прикладных программ Microsoft Excel-2007.

Результат исследований. Лабораторный анализ проб молозива первой дой- ки показал, что среднее содержание иммуноглобулинов в молозиве контрольной группы коров составило 50,9±1,93 мг/мл, в тоже время, этот показатель у коров 1 опытной группы составил 63,64± 2,14 мг/мл, а у 2-опытной группы 75,36±1,12 мг/мл (Рисунок 1).

Рисунок 1 - Динамика лейкоцитов в пробах венозной крови телят

Таблица 1 - Гематологические показатели крови телят

Показатель		Период времени
		до выпойки	час после выпойки	сутки от рождения	7 суток	14 суток	30 суток
Лимфоциты/ Сегментоядерные нейтрофилы		1,28±0,13	1,18±0,09	1,45±0,07	1,52±0,08	1,75±0,12	2,57±0,15
		1,22±0,07	1,16±0,08	1,75±0,07	1,62±0,13	1,54±0,11	1,45±0,12
		1,36±0,13	1,18±0,11	2,15±0,13	2,06±0,12	2,07±0,14	2±0,11
Нейтрофилы/ Лимфоциты		0,95±0,12	1,04±0,12	0,83±0,11	0,8±0,09	0,69±0,08	0,5±0,12
		0,96±0,12	1,07±0,11	0,73±0,08	0,77±0,07	0,81±0,09	0,84±0,1
		0,88±0,09	1,01±0,08	0,61±0,09	0,64±0,08	0,63±0,09	0,64±0,08
2 о S	%	31,12±0,54	36,68±0,59	32,86±0,47	35,98±0,53	41,42±0,55	45,97±0,72
		27,51±0,51	38,77±0,48 **	54,02±0,48	56,97±0,51	55,41±0,55	52,65±1,54
		42,18±0,49 **	49,72±0,53	46,51±0,51	50,13±0,47	52,05±0,39	66,72±0,54
	тыс/ мкл	1,31±0,16	1,35±0,13	2,29±0,12	2,31±0,11	2,34±0,15	2,36±0,15
		1,37±0,14	1,83±0,09 **	2,35±0,11 **	2,41±0,18	2,46±0,17	2,48±0,27
		2,21±0,12 **	2,69±0,16	3,73±0,15	3,79±0,11 **	3,81±0,14	3,85±0,17
о S и	%	17,58±0,33	17,93±0,36	20,23±0,42	21,51±0,37	22,07±0,34	23,35±0,46
		13,25±0,31 **	13,56±0,34	18,08±0,28	20,09±0,31	23,89±0,26	28,29±0,28
		12,21±0,32	13,86±0,31 **	17,21±0,28	18,65±0,36	19,95±0,32 **	27,38±0,31
	тыс/ мкл	0,74±0,05	0,66±0,06	0,88±0,07	0,91±0,09	0,98±0,12	1,1±0,15
		0,66±0,05 **	0,64±0,05 **	1,26±0,08	1,29±0,07 **	1,35±0,11	1,44±0,09
		0,64±0,04 **	0,75±0,05 **	1,38±0,08	1,41±0,09	1,46±0,07 **	1,58±0,16

Примечание: 1 строка - контрольная группа; 2 строка 1 опытная группа; 3 строка 2 опытная группа. * p<0,05; ** p<0,01

При рождении у телят 1 и 2 опытных групп было большее содержание лейкоцитов в крови на 15,57 и 16,8 % соответственно, по сравнению с контрольной. Через час после выпойки молозива, количество белых кровяных клеток у телят 1 опытной группы незначительно выросло, у 2 опытной выросло на 10,23 %, у контрольной группы снизилось на 8,12 %. На следующие сутки количество лейкоцитов выросло у контрольной 1 и 2 опытных групп на 5,81, 20,5 и 17,43 % (p<0,05), соответственно. Стоит отметить, что рост числа лейкоцитов в крови у телят 2 опытной группы за первые сутки жизни соста- вил 29,44 % (3,05 тыс./мкл), что на 24,26 % больше в сравнении с 1 опытной группой и в 1,08 раза выше, чем у контроля. В последующих пробах крови мы наблюдаем плавное уменьшение числа лейкоцитов у телят подопытных групп (Таблица 1).

Несмотря на активное снижение числа белых кровяных клеток у телят 2 опытной группы, на 30 день жизни их больше, по сравнению с контрольной группой на 26,16 % (p<0,01).

В таблице 2 представлены биохимические показатели сыворотки крови телят подопытных групп.

Таблица 2 –Биохимические показатели крови телят

Показатель	Период времени
	до выпойки	час после выпойки	сутки от рождения	7 суток	14 суток	30 суток
ОБС г/л	40,62±1,78	42,31±2,22	58,37±2,35	57,64±2,41	56,49±2,26	54,67±2,12
	40,66±2,23	44,79±2,78	69,29±2,29	68,78±2,35	67,28±2,31	65,46±2,17
	41,48±2,61	47,52±3,09	77,72±2,33	76,52±2,47	75,07±2,37	70,43±2,21
Альбумин г/л	18,87±1,94	19,32±1,68	19,35±1,8	19,84±1,23	20,15±1,21	21,31±1,24
	19,2±0,99	19,47±1,41	19,5±2,14	20,16±1,14	20,71±1,15	22,03±1,19
	18,65±1,36**	19,72±1,48**	20,77±1,44**	21,47±1,21	22,13±1,17	22,49±1,21
А/Г отношение	0,87±0,03	0,84±0,07	0,5±0,07	0,52±0,09	0,55±0,06	0,64±0,07
	0,89±0,05	0,77±0,08	0,39±0,07	0,41±0,05	0,44±0,05	0,51±0,06
	0,82±0,04	0,71±0,05	0,36±0,04	0,39±0,06	0,42±0,04	0,47±0,04

Примечание: 1 строка – контрольная группа; 2 строка 1-опытная группа; 3 строка 2-опытная группа. *p<0,05; ** p<0,01

При рождении телята 2 опытной группы имели больше количество Т-лимфоцитов на 40,72 % по сравнению с телятами контрольной группы и на 38,01 % по сравнению с 1 опытной. Через час после выпойки молозива мы наблюдали повышение показателя в контрольной, 1 и 2 опытных группах на 2,96, 25,14 и 17,84 % соответственно, а на следующий день ещё один рост на 41,05, 22,13 и 27,88 %, соответственно. При этом телята 2 опытной группы имели Т-лимфоцитов на 38,61 % больше, чем в контрольной группе и на 37 % больше, чем в 1 опытной. В течение следующих 29 дней происходило плавное увеличение количества Т-лимфоцитов у телят подопытных групп, значения роста отличались между собой незначительно, в результате чего разница между группами на 30 день наблюдения сохранилась. Через час после выпойки молозива наблюдался небольшой рост количество Б-лимфоцитов у телят 2 опытной группы на 14,67 %. На следующие сутки был отмечен резкий рост Б-лимфоцитов в контрольной, 1 и 2 опытных группах на 15,91, 49,21 и 45,65 %, соответственно. Благодаря активному усвоению молозива у телят 2 опытной группы, число Б-лимфоцитов в первые дни жизни было больше, чем в контрольной и 1 опытной на 36,23 и 8,7 %. В следующие 29 дней наблюдали закономерное плавное повышение числа Б-лимфоцитов у телят подопытных групп. На 30 день разница между 2 опытной группой была 30,38 %, а у 1 опытной 8,86 %.

При рождении мы наблюдали незначительные различия в концентрации общих белков сыворотки крови (ОБС) у подопытных групп телят. Через час после выпойки первой порции молозива ОБС увеличивается у телят контрольной, 1 опытной и 2 опытных групп на 5,8, 7,15 и 11,77 %, соответственно. На следующий день было отмечено повышение значений ОБС в исследуемых группах от 25,95 до 39,37 %. Увеличение в описанные временные точки происходило в основном за счёт фракций р-глобулинов и у-глобулинов. В последующие 29 дней жизни происходил активный распад фракций глобулинов и плавное увеличение альбуминов, ОБС у контрольной, 1 и 2 опытных групп повысился на 6,11, 5,45 и 9,12% соответственно.

В таблице 3 представлены концентрации глобулинов в крови телят 1 и 2 опытных групп по сравнению с контрольной. Телята 2 опытной группы при рождении имели р-глобулинов больше 1 опыт ной на 11,87 % и на 21 % - контрольной группы. Через час после выпойки молозива, в результате всасывания кишечником, концентрация в-глобулинов в сыворотке крови увеличился у контрольной, 1 и 2 опытных групп на 39,51, 22,95 и 20,8 % соответственно, а на следующие сутки ещё на 20,89, 42,61 и 46,52 %. То есть концентрация в-глобулинов в сыворотке крови телят 2 опытной группы в суточном возрасте была выше на 15,57 %, чем у 1 опытной и на 30,08 %, чем у контрольной группы.

В течении следующих 29 дней происходило плавное снижение количества р-глобулинов в крови подопытных телят. На 30 день жизни, телята 2 опытной группы превосходили контрольную и 1 опытную по количеству р-глобулинов на 28,23 и 12,81 соответственно.

Таблица 3 - Фракции глобулинов в крови телят

Показатель	Период времени
	до выпойки	час после выпойки	сутки от рождения	7 суток	14 суток	30 суток
а-глобулин г/л	17,48±0,85	15,83±1,03	16,77±0,51	16,52±0,56	15,97±0,48	14,82±0,47
	16,75±0,97	17,54±0,23	18,54±0,95	18,26±0,54	17,53±0,47	16,31±0,41
	17,53±0,45	18,44±0,35	18,23±0,28	17,87±0,49	16,98±0,52	15,94±0,41
в-глобулин г/л	3,46±0,049	5,72±0,18	7,23±0,21	7,01±0,14	6,84±0,11	6,33±0,07 **
	3,86±0,07	5,01±0,14	8,73±0,28	8,54±0,17	8,37±0,08	7,69±0,08
	4,38±0,07	5,53±0,07 **	10,34±0,09 **	9,93±0,07	9,65±0,14 **	8,82±0,17
у-глобулин г/л	0,81±0,09	1,44±0,1	15,02±0,27	14,27±0,17	13,53±0,15	12,21±0,18
	0,85±0,03	2,77±0,03	22,52±0,27 **	21,82±0,18	20,67±0,13	19,43±0,15
	0,92±0,02	3,83±0,02 **	28,38±0,23 **	27,25±0,16	26,31±0,12	23,18±0,13

Примечание: 1 строка - контрольная группа; 2 строка 1-опытная группа; 3 строка 2-опытная группа. *p<0,05; ** p<0,01

При рождении концентрация у-глобулина в сыворотке крови телят контрольной и 1 опытной групп различалась незначительно 0,81±0,09 и 0,85±0,03 г/л, а у телят 2 опытной группы составила 0,92±0,02 г/л, что на 13,58 % больше по сравнению с контрольными телятами. Через час после выпойки молозива происходил резкий рост у-глобулинов у контрольной, 1 опытной и 2 опытной групп телят до 1,44±0,1, 2,77±0,03 и 3,83±0,02 г/л, соответственно. На следующие сутки концентрация в сыворотке крови у-глобулинов поднялась до 15,02±0,27, 22,52±0,27 и 28,38±0,23 г/л, соответственно. На 30 день наблюдения концентрация Y-глобулинов у контрольной, 1 опытной и 2 опытной групп телят достигло 12,21±0,18, 19,43±0,15 и 23,18±0,13 г/л соответственно, т.е. разница между контрольной и 2 опытной группой составила 89,84 %, а между 1 опытноной и 2 опытной 19,3%.

В таблице 4 представлены иммунологические показатели телят подопытных групп. БАСК у телят 2 опытной группы при рождении был больше, чем у контрольной на 7,16 % и незначительно отличался от показателей 1 опытной группы. Его активный рост наблюдался в суточном возрасте, так разница между 2 опытной группой и контрольной стала 14,9 %, а 1 опытной и 2 опытной возросла до 7,69 %.

В период с 14 до 30 дней рост БАСК у телят 1 и 2 опытных групп замедлился, из-за чего сократилась разница между группами.

Однако БАСК 2 опытной группы был больше, чем у контрольной на 7,19 % и на 3,97 % – 1 опытной.

Таблица 4 – Иммунологические показатели крови телят

Показатель	Период времени
	до выпойки	час после выпойки	сутки от рождения	7 суток	14 суток	30 суток
БАСК %	29,16±023	29,74±0,22	31,98±0,36	35,84±0,31	38,91±0,35	41,84±0,38
	30,97±0,22	31,48±0,27	34,69±0,32	38,55±0,33	41,53±0,36	43,29±0,37
	31,41±0,25	32,35±0,27	37,58±0,33	41,71±0,31	44,59±0,37	45,08±0,43
ЛАСК %	5,71±0,05	6,74±0,08	14,91±0,27	15,43±0,28	16,05±0,21	19,64±0,22
	5,69±0,05	6,89±0,05	17,71±0,12	18,22±0,18	18,87±0,16	22,39±0,16
	5,82±0,06	8,69±0,08	19,13±0,17	19,88±0,21	20,51±0,15	23,94±0,14
ФАН %	31,83±0,24	32,24±0,25	32,14±0,22	34,27±0,28	37,19±0,17	44,12±0,29
	33,57±0,19	33,98±0,23	33,74±0,15	36,64±0,25	41,85±0,19	46,39±0,19
	37,54±0,21	37,81±0,18	38,15±0,18	43,25±0,25	46,11±0,21	49,86±0,25

Примечание: 1 строка – контрольная группа; 2 строка 1-опытная группа; 3 строка 2-опытная группа. p<0,05; **p<0,01

При рождении ЛАСК у телят подопытных групп различался незначительно. Уже через час после выпойки молозива начался активный рост показателя, особенно у телят 2 опытной группы на 49,31 %, а у контрольной и 1 опытной групп на 18,04 и 21,09 %, соответственно. Последующие 29 дней происходило плавное увеличение ЛАСК у телят контрольной, 1 и 2 подопытных групп на 31,72 %, 26,43 % и 25,14 %, соответственно. На 30 день у телят 2 опытной группы ЛАСК был выше чем у телят контрольной группы на 17,96 % и на 6,47 % – 1 опытной. ФАН, наблюдаемый при рождении у телят 2 опытной группы, был выше по сравнению с контрольной на 15,21 % и 1 опытной на 10,58 %. Повышение ФАН начинается в период с суточного возраста и до конца периода наблюдения. За этот период показатель в контрольной группе вырос на 37,27 %, 1 опытной на 37,49 % и во 2 опытной на 30,69 %. При низких среднесуточных приростах 2 опытной группы за первый месяц жизни значение ФАН к 30 дням жизни выше контрольной группы на 11,51 % и 6,96 % – 1 опытной группы.

Заключение. Таким образом, использование иммуностимулятара «Азоксивет» и синтетического аналога эстрона «Синэстрол 2%» коровам за 3-5 дней до отела, способствует повышению содержания иммуноглобулинов в молозиве. На со- стояние телят оказывает влияние своевременная выпойка полученного от коров молозива, что благотворно влияет на становление резистентности организма теленка.

ФИЗИОЛОГО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ТЕЛЯТ ПРИ СТИМУЛЯЦИИ КОРОВ-МАТЕРЕЙ ИММУНОМОДУЛЯТОРОМ АЗОКСИВЕТ В СОЧЕТАНИИ С

Резюме

Целью исследования стало изучение влияния Азоксивета в сочетании с Синэстролом 2% на становление резистентности телят. Опыт был проведен в Дальнеконстантиновском районе Нижегородской области. Для оценки эффективности эксперимента первую порцию молозива анализировали на концентрацию Ig, а для анализа становления резистентности телёнка проводили иммунологические, морфологические и биохимические анализы венозной крови, полученной до выпойки первой порции молозива, через час после выпойки, на следующие сутки, на 7, 14 и 30 сутки жизни. В результате был зафиксирован рост фракции γ-глобулинов в крови телят уже через час после выпойки молозива, а пик показателя приходился на суточный возраст. Кроме того, наблюдался активный рост иммунологических показателей телят.