Гельминтоовоскопическая диагностика трематодозов и пути улучшения ее эффективности

Основой профилактики гельминтозов являются профилактические и лечебные дегельминтизации, целесообразность проведения которых определяется результатами гельминтоовоскопических исследований животных.

В практических условиях для гельминтоовоскопических исследований при трематодозах (фасциолез, дикроцелиоз, парамфистоматоз) у крупного рогатого скота, в основном, применяют метод последовательных смывов. Предложены также многочисленные флотационные и комбинированные методы. Однако данные исследований многих авторов о диагностической эффективности этих методов противоречивые.

Нами была изучена диагностическая эффективность седиментационного и некоторых флотационных и комбинированных методов для диагностики фасциолеза крупного рогатого скота.

Испытывали существующие флотационные и комбинированные методы Щербовича, Вереты, Маллори, Котельникова-Хренова, Вишняускаса, Вольфа, Сафиуллина, Котельникова-Вареничева и Демидова. В качестве контроля использовали седиментационный метод последовательных промываний.

Для стандартизации исследований в работе использовали один и тот же материал и идентичную посуду (стаканчики объемом 30 мл, центрифужные пробирки объемом 10 мл). Отстаивание и центрифугирование проб проводили в течение одного и того же времени. Удельный вес приготовленных флотационных растворов определяли с помощью денсиметра при температуре окружающей среды 20°С.

Собранные из маток гельминтов яйца фасциол закладывали в количестве 100 экз. в пробы фекалий крупного рогатого скота весом 1 г, которые были изначально свободны от яиц трематод. Всплывшие яйца диагностировали путем снятия их с поверхностной пленки с помощью металлической петли и подсчитывали их сначала в одной капле, а затем в 1 мл флотационной жидкости. Работали петлями с диаметром кольца 0,9 мм. Подсчет яиц вели с использованием сетки Акбаева, внося на нее 0,2 мл (5

капель) поверхностной пленки. Каждую пробу исследовали 5 раз, внося в общей сложности 25 капель (1 мл) поверхностного слоя пленки. Зная количество заложенных в пробах фекалий яиц трематод, оценку осуществляли количественным методом.

Исследования проводили в десяти повторностях, а полученные результаты подвергали статистическому анализу.

Данные о сравнительной эффективности различных гельминтоово-скопических методов диагностики трематодозов крупного рогатого скота с искусственной закладкой яиц показаны в таблице 1.

Установлено, что флотационные методы Щербовича с нитратом натрия, Маллори оказались не эффективными при диагностике фасциолеза у крупного рогатого скота (таблица 1).

С помощью флотационного метода Котельникова-Хренова с нитратом свинца удалось обнаружить 1,5% яиц фасциол. Методом Вереты в комбинации солей нитрата аммония с хлоридом натрия диагностировали в среднем 0,7% яиц фасциол, а методом Вишняускаса - 0,5% трематод.

Несколько выше была диагностическая эффективность комбинированных методов Щербовича и Вольфа. Так, при использовании в качестве флотационной жидкости сульфата магния, методом Щербовича было обнаружено в среднем 2,1% яиц фасциол, а при использовании тиосульфата натрия - 2,8%. Методом Вольфа с карбонатом калия выявили в среднем 2,2% яиц фасциол. При использовании комбинированного метода Демидова обнаружено в среднем 1,4 ± 0,05% яиц фасциол.

Широко применяемый на практике для диагностики трематодозов седиментационный метод последовательных смывов проявил сравнительно низкую диагностическую эффективность, этим методом выявлено в среднем 1,0 ± 0,03% яиц фасциол.

Диагностическая эффективность комбинированного метода Котельникова-Вареничева была намного выше по сравнению с другими методами. При его использовании выявлено в среднем 20% яиц фасциол в 1 мл поверхности взвеси.

С помощью метода Сафиуллина, где в состав флотационной жидкости входят насыщенные растворы хлорида цинка и хлорида натрия в соотношении 1:2, обнаружено в среднем 14% заложенных яиц фасциол.

Таким образом, наибольшую диагностическую эффективность при фасциолезе показали методы, в состав флотационной жидкости которых, входит хлорид цинка.

Однако необходимо отметить, что из-за большого удельного веса насыщенного раствора хлорида цинка, поверхностная пленка после центрифугирования взвеси, бывает сильно засорена непереваренными остатками корма, что в определенной степени затрудняет просмотр материала. Поэтому в целях устранения этих недостатков мы апробировали разные флотационные жидкости из хлорида цинка, приготовленные как из одного ингредиента, так и в комбинации с насыщенным раствором хлорида натрия, отрабатывая их оптимальное соотношение. Нами был модифицирован комбинированный метод Котельникова-Вареничева с насыщенным раствором хлорида цинка (на 1 л воды 2 кг ZnCl2, имеющий плотность 1,82 при 20°С), который приняли за базовый. К этому раствору добавляли насыщенный раствор поваренной соли (второй базовый раствор – на 1 л воды 420 г NaCl), имеющий плотность 1,19 при 20°С в соотношениях 1:0,5, 1:1, 1:1,5, 1:2, 1:2,5, 1:3, 1:4.

Результаты изучения сравнительной эффективности метода Котельникова-Вареничева с различными моно- и комбинированными 2-х компонентными флотационными жидкостями показали, что по методу Котельникова-Вареничева с насыщенным раствором хлоридом цинка было выявлено в среднем 18% заложенных в пробу фекалий яиц фасциол. При использовании базисных растворов хлорида цинка и хлорида натрия в соотношении 1:0,5 было обнаружено в среднем 32% яиц фасциол, комбинированный раствор этих же солей в соотношении 1:1 дал возможность обнаружить 21 ± 0,7% яиц фасциол. Флотационные растворы в соотношении 1:1,5 и 1:2 выявили в среднем 19% заложенных яиц фасциол.

При использовании комбинированных растворов с более низким удельным весом (1,32 – 1,41) яйца фасциол не всплывали на поверхность жидкости. Так, при соотношении базисных растворов 1:2,5 было обнаружено в среднем 1% яиц фасциол, в соотношении 1:3 и 1:4 яйца фасциол в этих растворах не были выявлены.

Таким образом, использование при методе Котельникова-Вареничева 2-х компонентной флотационной жидкости, состоящей из насыщенных растворов хлорида цинка и хлорида натрия в соотношении 1:0,5 вместо однокомпонентной флотационной жидкости (насыщенного раствора хлорида цинка), дало возможность повысить процент выявления яиц фасциол от 18 до 32%. Кроме того, при этом отмечено увеличение времени кристаллизации исследуемой капли до 3-х часов, а поверхностная пленка после центрифугирования становится чистой.

Следующим этапом наших исследований явилось усовершенствование метода Котельникова-Вареничева при гельминтоовоскопии яиц фасциол, используя разные флотационные жидкости, приготовленные из 3х ингредиентов. Ими служили насыщенные растворы хлорида цинка (на 1 л воды 2 кг ZnCl2, имеющий плотность 1,82 при 20°С), хлорида натрия (на 1 л воды 420 г NaCl, имеющий плотность 1,19 при 20°С), сахара (на 1 л воды 1670 г сахара, имеющий плотность 1,28 при 20°С). Диагностическую эффективность метода Котельникова-Вареничева определяли в разных соотношениях базовых растворов, которые использовались в качестве флотационных жидкостей.

1.Сравнительная эффективность различных гельминтоовоскопических методов диагностики трематодозов крупного рогатого скота с искусственной закладкой яиц

№ п/п	Методы исследований	Реактив		Удельный вес раствора	Количество заложенных в 1 пробе яиц фасциол	Количество обнаруженных в 1 пробе яиц фасциол	Процент выявленных яиц фасциол
		Хим. формула	Норма расхода на 1 л
1	Котельникова-Хренова Вишняускаса	Pb (NO 3 ) 2	650	1,5	100	1,5 ± 0,02	1,5 ± 0,02
2	Щербовича	ZnSO 4	450	1,39	100	0,5 ± 0,01	0,5 ± 0,01
3	Щербовича	NaNO 3	1000	1,38	100	–	–
4	Щербовича	MgSO 4	920	1,28	100	2,1 ± 0,06	2,1 ± 0,06
5	Вереты	Na 2 S 2 O 3	1750	1,40	100	2,8 ± 0,14	2,8 ± 0,14
6	Вольфа	NH 4 NO 3 +NaCl	550+250	1,27	100	0,7 ± 0,02	0,7 ± 0,02
7	Маллори	K 2 CO 3	600	1,42	100	2,2 ± 0,07	2,2 ± 0,07
8	Котельникова-	C 12 H 22 O 11	1670	1,28	100	—	—
9	Вареничева Сафиуллина	ZnCl 2	2000	1,82	100	20,0 ± 1,0	20,0 ± 1,0
10	Демидова	ZnCl 2 +NaCl	666+280	1,49	100	14,0 ± 0,6	14,0 ± 0,6
11	Последовательных	NaCl	420	1,19	100	1,4 ± 0,05	1,4 ± 0,05
12	смывов	H 2 O	1000	1,0	100	1,0 ± 0,03	1,0 ± 0,03

Исследования показали, что по методу Котельникова-Вареничева с использованием флотационной жидкости, состоящей из 3-х ингредиентов -насыщенных солей хлорида цинка, хлорида натрия и сахара в соотношении 2:1:1 (удельный вес 1,63) было выявлено в среднем 60,2% заложенных яиц фасциол.

При уменьшении удельного веса флотационной жидкости из 3-х ингредиентов снижалась и диагностическая эффективность этого метода. Так, при соотношении базисных растворов 2:1:2 (при удельном весе 1,60) было обнаружено в среднем 52,6% яиц фасциол, а соотношение ингредиентов 2:2:1 (при удельном весе 1,58) позволило выявить в среднем 40,8% яиц гельминтов.

Наименьшее число яиц фасциол (28,6%) было выявлено с помощью флотационного раствора в соотношении ингредиентов 1:1:1, удельный вес которого составил 1,55.

На последнем этапе наших изысканий была изучена эффективность упрощенного варианта гельминтоовоскопического метода, с использованием 3-х ингредиентной флотационной смеси, отличающегося однократным центрифугированием. Этим методом было выявлено 58,7% яиц фасциол.

Заключение. В контролируемых опытах с искусственной закладкой яиц фасциол установлено, что из 12 гельминтоовоскопических методов диагностики фасциолеза крупного рогатого скота, наиболее высокой разрешающей способностью обладают методы, в состав флотационной жидкости которых входит хлорид цинка.

Метод с флотационной жидкостью, состоящей из насыщенных растворов хлорида цинка, хлорида натрия и сахара в соотношении 2:1:1, с однократным и двукратным центрифугированием, позволяет выявить от 58,7 ± 1,1 до 60 ± 1,2% заложенных яиц фасциол. Метод с однократным центрифугированием позволяет значительно сократить время, затраченное на исследование.

ГЕЛЬМИНТООВОСКОПИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ТРЕМАТОДОЗОВ И ПУТИ УЛУЧШЕНИЯ ЕЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ

Лутфуллин М.Х., Латыпов Д.Г., Никифоров П.Г.

Резюме

Изучена эффективность различных методов при диагностике фасциолеза жвачных животных. Установлено, что наиболее эффективными являются методы, в состав флотационной жидкости которых входит хлорид цинка.

GELMINTOOVOSKOPICHESKAYA TREMATODOZOV DIAGNOSIS AND WAYS OF IMPROVING ITS EFFICIENCY

Lutfullin M.H., Latypov D.G., Nikiforov, P.G.