Гематологический профиль крыс при изучении кумулятивных свойств наноструктурного цеолита

Животные должны получать с рационом кормления питательные вещества согласно их нормам и физиологическим потребностям [1]. С основным рационом в кормлении животных обязательно входят кормовые добавки, обеспечивающие организм всеми необходимыми питательными веществами, витаминами и микроэлементами [4, 10].

Применение комплексных препаратов и кормовых добавок, содержащих жизненно необходимые компоненты для здоровья животных, позволяет совершенствовать деятельность их функциональных систем и органов [3, 12]. Особый интерес представляет состав крови, который изменяется в зависимости от возраста, продуктивности, сезонности, условий кормления и содержания животных [7].

В процессе развития науки и технологий, внедрения в животноводство новых достижений, наблюдается активное изготовление наноструктурных материалов и разработка способов их использования в качестве кормовых добавок [2].

В связи с чем, целью работы стало исследование кумулятивного действия на организм белых крыс наноструктурного цеолита, стабилизированного полиакрилатом натрия, и влияние его на морфо-биохимический состав крови.

Материал и методы исследований . В эксперименте использовали 40 белых крыс породы Вистар, массой 180-190 г, возрастом 3-4 месяца, которых содержали в виварии кафедры физиологии и патологической физиологии Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана, Казань, Россия. Перед введением в эксперимент крысы находились на карантине в течение 12 суток. Животных содержали при температуре 20-24 °C, они имели свободный доступ к водопроводной воде и стандартному рациону для крыс, находящимся под длительным экспериментом. Крысы были сформированы в две группы – контрольную и опытную по 20 животных в каждой.

Изучение кумулятивных свойств наноструктурного цеолита, стабилизированного полиакрилатом натрия, проводили с использованием теста по Lim R.K., et al. (1961) и с учетом МУ 1.2.2520-09 [6, 11]. Суспензионный препарат нарастающими дозами вводили ежедневно внутрижелудочно с помощью атравматического зонда. Контрольным животным аналогичным способом вводили деионизированную воду, которая являлась основой для стабилизации наночастиц цеолита. Длительность эксперимента составила 28 суток. Ежедневно оценивали общее клиническое состояние животных, кормовую и водную возбудимость, реакцию на внешние и внутренние раздражители, акты мочеиспускания и дефекации.

В конце эксперимента проводили забор крови на морфологические и биохимические исследования.

Исследования цельной крови проводили на гематологическом анализаторе Abacus Junior 5 (Vet), биохимические – на Chem

Well 2902 (+).

Результат         исследований .

Наноструктурный               цеолит, стабилизированный       полиакрилатом натрия, вводили крысам опытной группы по схеме, представленной в таблице 1. Крысы контрольной группы получали аналогичным способом и подобными дозами деионизированную воду.

Таблица 1 – Дозы препаратов для определения кумулятивных свойств

Показатель	Сутки эксперимента
	1-4	5-8	9-12	13-16	17-20	21-24	25-28
Суточная доза, г/кг	0,4	0,6	0,9	1,35	2,02	3,03	4,54
Суточная доза за 4 дня, г/кг	1,6	2,4	3,6	5,4	8,1	12,1	18,1
Суммарная доза, г/кг	1,6	4,0	7,6	13,0	21,1	33,2	51,3
Гибель животных, гол	0	0	0	0	0	0	0

В динамике исследований сохранность поголовья контрольных и опытных крыс составила 100 %. В течение 13 суток эксперимента состояние животных контрольной и опытных групп было удовлетворительным, крысы потребляли корм и воду согласно физиологическим нормам, акты мочеиспускания и дефекации были без нарушений. Видимые слизистые оболочки у крыс сохраняли естественный цвет. Первые изменения клиникофизиологического состояния крыс опытной группы появились на 17 сутки при суточной дозе наноструктурного цеолита 2,02 г/кг и суммарной дозе 21,1 г/кг. Симптомы проявлялись недлительным угнетением крыс в течение 1-2 часов, отказом от корма и воды, собирались в группу, прижимаясь друг к другу. Симптомы имели обратимый характер.

К 23 суткам эксперимента отмечали токсические проявления препарата при суточной дозе 3,03 и суммарной дозе 33,2 г/кг. Отмечали диарею у 16 опытных крыс, при отсутствии таковой у контрольных аналогов. У 5 крыс выявляли бледность ушей, хвоста и видимых слизистых оболочек. В первые часы после введения препарата наблюдали скрюченность крыс, шаткость походки, отмечали незначительную заторможенность общей реакции на внешние раздражители. Период угнетения сохранялся на протяжении 6-7 часов, кормовая и водная возбудимость возвращались через 7-8 часов.

К 28 суткам у опытных крыс при введении суточной дозы препарата 4,34 и суммарной дозы 51,3 г/кг в первые 4 часа отмечали, что крысы скрючивались и собирались в группу, реакция на внешние раздражители была замедленной, отдельные особи передвигались осторожно, оберегая грудо-брюшную часть тела. Наблюдали взъерошенность шерстного покрова у 18 крыс, у 4 крыс выявляли цианотичность ушей, хвоста и морды. Диарею отмечали у всех животных опытной группы, шерсть местами была взъерошена, а в области промежностей у 7 животных выявляли загрязнение каловыми массами. Симптомы сохранялись до 6-7 часов, имели обратимый характер.

Учитывая, что в ходе эксперимента не было отмечено гибели крыс, коэффициент кумуляции рассчитывали, как отношение суммарной дозы к максимальной дозе, введенной однократно [5]. Коэффициент кумуляции наноструктурного цеолита, стабилизированного полиакрилатом натрия составил 11,3. Согласно классификации Л.И. Медведь и соавт. (1968), при Ккум > 5 кумулятивные свойства вещества слабо выражены. Следовательно, препарат имеет слабовыраженные кумулятивные свойства.

Одной из самых лабильных и быстро реагирующих тканей в организме живот- ных на изменения условий внешней и внутренней среды является кровь, которая мгновенно отражает изменения уровня обмена веществ. В связи с чем были проведены сравнительные исследования состава крови контрольных и опытных крыс [9]. Морфологические и биохимические показатели крови представлены в таблице 2.

Таблица 2 – Морфо-биохимические показатели крови крыс при длительном применении наноструктурного цеолита, стабилизированного полиакрилатом натрия (М±м)

Показатель	Норма	Группа животных (n=7)
		контрольная	опытная
Эритроциты, 1012/л	4,5-10,0	4,5±0,6	4,6±0,5
Лейкоциты, 109/л	2,1-19,5	2,8±0,3	3,0±0,5
Гемоглобин, г/л	140,0-180,0	160,3±4,2	171,1±5,7*
Общий белок, г/дл	5,2-11,9	5,4±0,7	5,9±0,8
Глюкоза, мг/дл	50,0-208,0	13,5±2,5	20,2±2,9*
AЛT, ед/л	14,0-65,0	68,9±2,9	84,5±4,3*
AСT, ед/л	45,7-222,0	101,8±2,4	109,4±3,6*

* р≤0,05.

При анализе полученных данных установлено, что исследованные показатели крови у контрольных и опытных крыс находились в пределах физиологической нормы для данного вида и возраста животных с некоторыми колебаниями в пределах границ. Особенно это важно для крыс опытной группы, которым длительно вводили нарастающие дозы наноструктурного препарата, стабилизированного полиакрилатом натрия.

Достоверное повышение содержания гемоглобина на 6,7 % у опытных крыс, возможно, обусловлено длительным поступлением препарата, в составе которого содержатся соединения железа. Наблюдали тенденцию усиления работы обменных процессов: показатель АЛТ у крыс в опытной группе был выше на 22,6 % (р≤0,05), уровень АСТ – на 7,4 % (р≤0,05), по сравнению с контрольными аналогами, соответственно. Однако стоит отметить, что все остальные показатели сыворотки крови крыс находились в пределах физиологической нормы для данного вида животных.

Резюме

Авторами данной работы была исследована хроническая токсичность кормовой добавки. Хроническую токсичность изучали на белых беспородных крысах при ежедневном внутрижелудочном введении в различных дозах в течение 28 дней. Результаты исследований показали, что кормовая добавка при длительном применении не проявляет своих токсических свойств на организм лабораторных животных. В данном опыте не отмечено ни одного случая интоксикации и гибели животных. Определено положительное влияние препарата на некоторые показатели морфологических и биохимических показателей крови.