Генетические модели оценки прогноза у пациентов с первичным миелофиброзом

Цель. Определить прогностическую значи мость маркеров клональности, мутаций генов эпигенетической регуляции, кариотипа и их комбинации для ОВ пациентов с ПМФ.

Материалы и методы. В исследование включены ПО пациентов с диагнозом ПМФ (38 (34,5%) мужчины), медиана возраста 59 лет (16-82 лет). Медиана наблюдения 2,6 года (0,14-22,97 лет). У всех пациентов проводили определение 1АК2У617Р-статуса (ПЦР-ПДРФ), при JAK2(-) детектировали мутации в 515 кодоне гена MPL (ПЦР-ПДРФ) и мутации 9 экзона гена CALR (секвенирование по Сенгеру). У 106 пациентов выполнен анализ генов ASXL1, EZH2, IDH1/2 методом кривых плавления с последующим секвенированием. У 48/110 (43,6%) боль-

Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием «АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ГЕМА ТОЛОГИИ И ТРАНСФУЗИОЛОГИИ», посвященная 85-летию Российского научно-исследовательского       Санкт-Петербург института гематологии и трансфузиологии 6-7 июня 2017 г.

ных проведено цитогенетическое исследование.

Результаты. МК обнаружены у 81,8% пациентов: JAK2( + ) — 50,0%; CALR( + ) —25,5% (14,5% —тип 1, 10,9% —тип 2), 6,4%— MPL( + ) больных. У 20 (18,2%) человек МК не выявлены (TN - triple-negative). Мутации генов ЭР обнаружены в 20,8% случаев: мутации нонсенс и сдвига рамки считывания гена ASXL1 (мутации преждевременной терминации — ASXLlterm)— 8,5%, сочетание ASXLlterm и ASXLlmis (миссенс) — 3,8%, ASXLlmis— 4,7%, сочетание ASXLlterm и EZH2-1,9%, сочетание ASXLlterm и IDH2-0,9%, IDHl-0,9%. У 27,1% пациентов выявлен неблагоприятный кариотип ( + 8, +21, +7,—7/7q-,—5/5q-, перестройки llq и 12р, моносомии, комплексный кариотип, а также del(6)(ql5), add(6)(p25), del(X) (q22), t(X;7)(p21; qll)). По данным однопараметрического регрессионного анализа на ОВ оказывали влияние: мутации ASXLlterm (отношение рисков (ОР) 2,9, р = 0,018), неблагоприятный кариотип (ОР 8,2, р<0,001) и три-негативный статус (ОР 8,1, р< 0,001). Для мутаций в гене CALR значение р было пограничным: ОР 0,3, р = 0,052. ASXLlmis не оказывали влияния на ОВ (р = 0,378). По результатам многопараметрического регрессионного анализа, включавшего такие переменные, как TN-, CALR-, ASXLlterm-статус и неблагоприятный кариотип, ключевое влияние на ОВ независимо друг от друга оказывали неблагоприятный кариотип (ОР = 7,4, р = 0,001) и наличие терминирующей мутации в гене ASXL1 (ОР = 2,8, р = 0,023). При оценке модели Кокса без учета кариотипа значимое влияние на ОВ оказывали TN- статус (ОР = 2,4, р = 0,050) и ASXLlterm-статус (ОР = 3,3, р = 0,012), тогда как наличие мутаций в гене CALR теряло порог статистической значимости (ОР = 0,3, р=0,075). Тем не менее данный фактор был значим (ОР = 0,2, р = 0,015), когда в качестве ковариаты выступал только ASXLlterm-статус, который также сохранял свою значимость в данной модели (ОР = 3,9, р = 0,004). В модели, включавшей TN- и ASXLlterm-статус, оба параметра значимо влияли на выживаемость (ОР = 3,6, р = 0,003 и ОР = 2,5, р = 0,048, соответственно). Таким образом, оценку значимости различий ОВ проводили в зависимости от CALR/ASXL1 и TN/ASXL1 статуса, а также в группах с раз личным вариантом кариотипа и ASXLlterm-статусом. При анализе ОВ с учетом CALR/ ASXL1 статуса худшую выживаемость демонстрировали CALR(-)/ASXLlterm пациенты (медиана 2,5 года, р = 0,021). Прослеживалась статистическая тенденция к улучшению выживаемости среди CALR( + )ASXL1 wild-type (wt) (медиана не достигнута при времени наблюдения 10,1 года) пациентов по сравнению с CALR(-) ASXLlwt (медиана 13,5 года) (р = 0,124). Достоверных отличий по ОВ между CALR( + ) ASXLlterm и С ALR( + ) ASXLlwt, CALR(+) ASXLlterm и CALR(-)ASXLlwt не выявлено. Медиана ОВ среди TN/ASXLlterm пациентов составила 0,9 года, TN/ASXLlwt — 3,6 года, MK( + )/ASXLlwt—13,8 лет, не достигнута в MK( + )/ASXLlterm группе (при времени наблюдения 10,3 года) (р< 0,0001). Попарный анализ показал, что обнаружение ASXLlterm достоверно снижает ОВ TN больных (р = 0,007). Общая выживаемость MK( + )ASXLlterm пациентов была достоверно лучше в сравнении с TNASXLlwt больными (р = 0,044). Значимых отличий ОВ у МК( + ) пациентов с различным ASXL1-статусом не выявлено. При комплексном учете данных анализа генов ЭР и кариотипа медиана ОВ ASXLlterm пациентов с кариотипом низкого риска статистически значимо не отличалась от таковой у ASXL 1 wt пациентов с хромосомными аномалиями высокого риска (медиана 1,6 и 1,4 года, соответственно, р = 0,291). Статистически значимых отличий не было обнаружено и среди ASXLlterm пациентов с кариотипами низкого и высокого риска (медиана ОВ 1,6 и 1,2 года, р = 0,610). Медиана ОВ ASXLlwt пациентов с кариотипом низкого риска составила 6,4 года (р = 0,0005).

Выводы. Наиболее высокая степень значимости различий отмечена при сравнении ОВ в группах, сформированных по комплексу характеристик TN/ASXL1 и кариотип/ASXLl. Наличие терминирующей мутации в гене ASXL1 существенно ухудшает выживаемость у больных без специфических маркеров клональности. Выживаемость пациентов с наличием любого из параметров — кариотипа высокого риска или ASXLlterm — достоверно хуже, чем у ASXLlwt пациентов с кариотипом низкого риска.