Гисто- и цитологические, гисто- и цитохимические характеристики иммунной системы стенки тонкой кишки плодов и телят новорожденного этапа развития

Изучение закономерностей развития тканей, органов и систем организма сельскохозяйственных животных остается одной из главных проблем современной анатомии, физиологии, эмбриологии и гистологии [1, 2].

Цель работы - изучение возрастных особенностей и закономерностей морфофункционального развития тонкой кишки, оболочек стенки тонкой кишки и формирования иммунной системы стенки тонкой кишки у плодов и телят новорожденного этапа развития крупного рогатого скота черно-пестрой породы на разных уровнях организации (органном, тканевом, клеточном). Работа частично осуществлена при финансовой поддержке Минобрнауки РФ в рамках госзадания. Проект 6.3841.2011 «Изучение обмена веществ, энергии и биоритмов в агробиогеоценозах».

Материал и методы исследований. Исследования проведены на материале, полученном от 87 датированных 2 - 9-мес. плодов и 56 телят новорожденного этапа развития (от рождения до 15-сут. возраста) крупного рогатого скота черно-пестрой породы, разводимых в хозяйствах Республики Мордовия.

Материалом исследования служили тонкая кишка и ее составляющие двенадцатиперстная, тощая, подвздошная кишки. Кусочки материала, для исследований брали из разных участков кишечной стенки. Материал фиксировали в различных фиксаторах, уплотняли путем заливки в парафин и готовили серийные срезы. Возрастные особенности строения кишечной стенки и составляющих ее оболочек изучали на депарафинированных срезах, окрашенных гематоксилин-эозином и по Доминичи-Кедровскому.

Цито- и гистохимическими методами исследования выявляли: рибонуклеопротеиды и дезоксирибонуклеопротеиды; основные, кислые и суммарные белки; сульфгидрильные, дисульфидные , карбоксильные группы белков. Для более объективного сопоставления полученных результатов выводили средний гистохимический коэффициент для различных клеточных дифферонов. Люминисцентно-микроскопические исследования нуклеопротеидов и углеводов проводили на срезах флюохромированных в растворе акридинового оранжевого в разведении 1:10000, приготовленном на цитратно-фосфатном буфере [2].

Результаты исследований. Процесс закладки и формирования иммунных структур в стенке тонкой кишки начинается с дифференциации Мкл в лимфоциты. Лимфоциты впервые выявляются в мезенхимном слое кишечной стенки у 30 - 34-сут. эмбрионов [1]. Первые диффузные скопления лимфоцитов выявляются в собственной пластине слизистой оболочки тощей и подвздошной кишок у 3 - 4,5-мес. плодов. Одиночные мелкие лимфоузелки первоначально (у плодов 4,5 - 5 мес.) формируются в двенадцатиперстной кишке, а позднее (у плодов 5 - 6 мес.) выявляются в тощей и подвздошной кишках. В 6 - 7-мес. возрасте плода лимфоциты и мелкие лимфоузелки формируют пейеровые бляшки. У плодов к 7 мес. лимфоузелки стенки тонкой кишки принимают форму сходную с дефинитивной. В двенадцатиперстной кишке чаще встречаются одиночные лимфоузелки, в тощей и подвздошной кишках - обобщенные фолликулы. Располагаются они в кишечной стенке с противоположной стороны брыжейки. Основу лимфоузелка составляет ретикулярная СТ. В 4,5 - 5-мес. возрасте плода впервые среди лимфоцитов и бластических клеток выявляются предшественники плазмобластов. У 7-мес. плодов, в % выражении, клеточный состав лимфоузелков представлен: стромальные клетки - 13,3 %; бласты - 6,8 %; большие лимфоциты - 14,8 %; средние и малые лимфоциты - 38,6 %; нейтрофилы - 0,3 %; плазмобласты - 0,2 %; плазмоциты - 0,2 %; лаброциты - 0,1 %. У 15-сут. телят, по-прежнему, в 267

составе лимфоцита превалируют средние и малые лимфоциты – 45,2 %, большие лимфоциты – 16,1 % и стромальные клетки – 15,6 %. На плодном и новорожденном этапах развития происходит постепенное увеличение продольного диаметра лимфоузелка и одновременно уменьшается толщина СТ между лимфоузелками. Увеличивается соотношение продольного диаметра лимфоузелков к интервалу между ними от 1,5 % у 6-мес. плодов до 6,3 % у 15-сут. телят. С момента образования (на 50 – 70 сут.) эпителиально-соединительнотканных выростов и до 15-сут. возраста телят между эпителиоцитами выявляются клетки «мигранты». Первоначально они состоят из лимфоцитов, позднее в их состав входят эозинофилы, базофилы и лаброциты. В раннем онтогенезе количество клеток «мигрантов» увеличивается, что выражено в уменьшении соотношения количества эпителиоцитов к ним: от 26,7:1 у 3-мес. плодов до 6,8:1 у 15-сут. телят. В ядре и цитоплазме основной массы «мигрантов» наблюдается усиленный обмен РНП, суммарных белков и –SH групп белков, а интенсивность реакции на протеогликаны, кислые ГАГ типа ГК снижается. Количество «мигрантов» со специфическим строением, «мигрантов» лимфоцитов и эозинофилов, включая, глобулярные лейкоциты больше в ворсинках, чем в криптах. Количество же «мигрантов» утративших специфическое строение, «мигрантов» лаброцитов, базофилов, нейтрофилов, макрофагоцитов больше в криптах, по сравнению с ворсинками. Межэпителиальные лаброциты, меньше, чем лаброциты СТ. Хроматин их ядра окрашивается гомогенно, в них выявляются суммарные белки, -SH, –S-S-, –COOH, –NH группы белков, РНП, ШИК-позитивные амилазоустойчивые вещества. Следовательно, наряду с индукционно-формативной формой взаимосвязи между эпителием и СТ ,на плодном этапе развития, устанавливается лимфоидная форма развития по А.Н. Студитскому [4]. Она выражается в миграции клеток СТ в эпителиальный пласт и, возможно, поступление их, или продуктов их распада, обратно в СТ [2, 3].

ЛИТЕРАТУРА: 1. Тельцов Л.П. Функциональная морфология тонкой кишки в эмбриогенезе/ Л.П. Тельцов, П.А. Ильин, В.А. Столяров – Саранск, изд-во Мордов. Ун-та, 1993. -196 с. 2. Столяров В.А. Закономерности развития тканей тонкой кишки у плодов и телят чернопестрой породы: Диссертация … докт. ветерин. наук./В.А. Столяров – Саранск. 2001. – 435 с. 3. Столяров В.А. Гистологические и цитологические характеристики иммунной системы стенки тонкой кишки в раннем онтогенезе / В.А. Столяров., С.В. Кулемин // Сб. материалов научно-практ. конф. технологического факультета ФГОУ ВПО «Пензенская ГСХА». - Пенза: РИО ПГСХА, 2005. С. 150-151. Студитский А.Н. Очередные вопросы теории тканевой регеляции (Тканевых формообразовательных взаимодействий) /А.Н. Студитский// Тез. докл. V Всесоюз. совещ. эмбриологов. М., 1974. -С. 167-168.

ГИСТО- И ЦИТОЛОГИЧЕСКИЕ, ГИСТО- И ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ СТЕНКИ ТОНКОЙ КИШКИ

ПЛОДОВ И ТЕЛЯТ НОВОРОЖДЕННОГО ЭТАПА РАЗВИТИЯ

Столяров В.А., Едукова А.Е., Вилкова М.А.

Резюме

Развитие иммунных структур стенки тонкой кишки происходит последовательно в 3 этапа: Первый этап - закладки - от 30 - 34 сут. до 3 -4,5-мес. возраста плода; Второй - формирования - у плодов от 3 - 4,5 до 6 -6,5 мес. и имеет 2 стадии 1 - дифференциации мезенхимных клеток в лимфоциты - у плодов от 3 до 4,5 мес. и 2 - формирования одиночных лимфоидных узелков - у плодов от 4,5 до 6 - 6,5 мес.; Третий этап -специализации - у плодов от 6 - 6,5 мес. до 15-сут. возраста телят. Началом специализации служит формирование лимфатических узелков, образование в них очагов кроветворения и дифференциации плазмоцитов из плазмобластов.

HISTO- AND CYTOLOGICAL, HISTO- AND CYTOCHEMICAL CHARACTERISTICS OF IMMUNE SYSTEM OF SMALL INTESTINE WALL OF FETAL AND CALVES OF NEWBORN STAGE OF DEVELOPMENT

Stolyarov V.A., Yedukova A.E., Vilkova M.A.