Гистологическая характеристика почек белых крыс на фоне применения УВМК "Лизунец"

Животноводство – одно из перспективных и динамично развивающихся направлений сельского хозяйства не только в России, но и зарубежье. Несмотря на то, что животноводство является самой затратной отраслью сельского хозяйства, но, тем не менее, остается весьма рентабельной. Основными затратами, являются заготовка качественных кормов и их хранение должным образом [2, 3, 9, 11].

Жвачные животные, у которых рацион состоит из растительных кормов, не всегда обеспечивается полноценным кормлением [7]. Для чего в настоящее время в питании животных обращают большое внимание, на то чтобы оно было полноценным и содержало все необходимые макро-, микроэлементы и витамины. Это со своей стороны будет способствовать интенсивности роста и повышению массы животного, которые улучшают репродуктивные функции и предотвращают нарушения обмена веществ [10, 11].

Для профилактики нарушений обмена веществ, улучшения роста и продуктивности сельскохозяйственных животных в настоящее время используют для их кормления современные кормовые добавки, лизунцы и др., содержащие агроминералы, которые со своей стороны могут повлиять на развитие морфологических изменений органов и тканей, в частности, почек [7, 8]. Так как почки являются одним из важнейших органов гомеостаза, кото- рые обеспечивают выведение из организма не усваиваемых продуктов, чужеродных веществ, они также поддерживают кислотно-щелочное равновесие, кровяное давление, обмен кальция, эритропоэз [4].

Целью наших исследований явилось изучение возможного влияния на морфологические характеристики внутренних органов, в том числе почек, длительного экспериментального применения УВМК «Лизунец» [1].

Материал и методы исследований. Исследования были проведены в рамках государственных заданий: Мобилизация генетических ресурсов растений и животных, создание новаций, обеспечивающих производство биологически ценных продуктов питания с максимальной безопасностью для здоровья человека и окружающей среды. Номер регистрации: АААА-А18-118031390148-1; Разработка и внедрение функциональных кормовых добавок и биологических лечебнопрофилактических препаратов, как элементов биорегулирующей терапии для органического животноводства и аквакультуры. Номер регистрации АААА-А20-120031290016-9.

Работа по изучению субхронической токсичности УВМК «Лизунец» была проведена в условиях вивария ФГБОУ ВО Казанской ГАВМ на клинически здоровых беспородных белых крысах с начальной живой массой 55±2,41 г. Для чего было сформировано 4 группы белых крыс одного возраста, обоего пола по 12 голов в каждой. Первая группа служила контролем, которым ежедневно в течение 30 суток задавали физиологический раствор внутрь при помощи атравматического зонда. Животным второй опытной группы задавали кормовую добавку УВМК «Лизунец» в виде водной суспензии в 1/10 дозе от условной смертельной дозы (800 мг/кг), третей группе в 1/20 дозе (400 мг/кг), четвертой группе в 1/50 дозе (160 мг/кг). Объем вводимой суспензии не превышал 2 мл на одну голову за один прием. После введения УВМК «Лизунец» за экспериментальными животными ежедневно вели наблюдение. Учитывали поведенческие реакции, аппетит, внешнее состояние, физиологические функции. При изучении параметров субхронической токсичности придерживались требований, изложенных в «Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств» [5].

На 30 сутки подопытных животных умерщвляли, согласно «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. №755) и «Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» от 18 марта 1986 г.

После наступления биологической смерти у животных вскрывали грудную и брюшную полости, визуально изучали их состояние. Далее внутренние органы были извлечены для последующего гистологического исследования. Внутренние органы белых крыс, их фрагменты фиксировали в нейтральном 10 % растворе формалина и затем направляли в лабораторию для изготовления гистосрезов и последующего описания. Гистологическое исследование выполнено стандартными методами.

Результаты исследований. За время проведения исследований при длительном применении внутрь в виде водной суспензии УВМК «Лизунец» белыми крысами, у опытных животных со стороны поведения, внешнего состояния, волосяного покрова и физиологических отклонений, по сравнению с контрольными группами животных, отличительных особенностей не замечено.

Результаты проведенных анатомотопографических исследований внутренних органов опытных групп животных, в том числе и почек, видимых изменений по сравнению с контрольной группой животных не выявили (Рисунок 1, 2, 3, 4).

Гистологическое исследование почек у подопытных белых крыс представлено на рисунках 5-8.

Почки контрольных белых крыс (Рисунок 5) представлены следующей картиной. В корковом слое равномерно распределены клубочки, капиллярные петли, которых плотно прилегают друг к другу. Капилляры заполнены эритроцитами. Париетальный листок капсулы и висцеральный плотно прилегают друг к другу, так что пространство боуменовой капсулы не определяется.

•• <*

Рисонок 1 - Почки крысы контрольной      Рисунок 2 – Почки крысы первой группы                                опытной группы

Рисонок 3 - Почки крысы второй

Рисунок 4 - Почки крысы третей опытной группы

опытной группы

Рисунок 5 – Гистокартина почки крысы первой контрольной группы

Рисунок 6 – Гистокартина почки крысы второй опытной группы

Рисунок 7 – Гистокартина почки крысы третей опытной группы

Рисунок 8 – Гистокартина почки крысы четвертой опытной группы

В срезе видны проксимальные извитые канальцы. Эпителий, из которого они состоят, имеет эозинофильную окраску, базофильные ядра. Просветы этих канальцев неширокие, свободные. Также в поле зрения попали единичные попереч- ные срезы собирательных трубочек. У них просвет более широкий, эпителий имеет меньше высоту и бледнее окрашен, ядра расположены ближе к просвету, сами просветы свободные.

Почки крысы второй опытной группы на рисунке 6 представлены косопоперечными срезами извитых канальцев. Кровенаполнение в препарате сниженное. Эпителий канальцев без особенностей. В срезе представлен корковым слоем с единичными клубочками (видны два в поле зрения). Структура в срезе нечеткая, «смазанная». В клубочках обнаружены небольшие скопления эозинофильных хлопьевидных масс (первичная моча). В срезе определяются извитые канальцы, эпителий которых местами с нарушением структуры в виде поверхностной десквамации и скоплением слущенных фрагментов клеток в просветах самих канальцев. Капилляры клубочков неравномерно полнокровные. Капсулы без особенностей. В поперечных срезах собирательных трубочек можно увидеть эозинофильные глыбки.

У третьей опытной группы (Рисунок 7) почки представлены корковым слоем с одним клубочком. Капсула в срез не попала. Препарат имеет нечеткую структуру, «размытость» контуров. На фоне этого можно констатировать наличие десква-мации верхних частей эпителия извитых канальцев до ½ и слущивание их в просветы канальцев. Клубочек имеет нечеткую структуру, капилляры его полнокровные, расширенные, в просвете капсулы некоторое количество эозинофильного содержимого в виде остаточного (первичная моча).

В четвертой опытной группе (Рисунок 8) определяются многочисленные клубочки. В них полнокровные капилляры, строение эндотелия капилляров четкое. Форма клубочков чуть сплюснутая. Клубочки расположены среди извитых канальцев с поперечными и косопоперечными срезами. Эпителий канальцев с четкими контурами, ядра базофильные, цитоплазма эозинофильная. Просветы канальцев свободные, широкие.

Заключение. Таким образом, полученные результаты анатомотопографических и морфологических исследований почек белых крыс в разных дозах применения УВМК «Лизунец» в течение 30 суток установили, что во всех представленных опытных группах структура сходна с контролем, но имеет слабо выраженные признаки быстро наступив- шей смерти, в виде наличия остаточной первичной мочи в просветах капсул клубочков почек. Кроме того, есть признаки десквамации некоторых клеток эпителия извитых канальцев почек, что может наблюдаться, как и у здоровых животных.

Резюме

Исследования были проведены по изучению действия новой кормовой добавки УВМК «Лизунец» при длительном его применении (субхроническая токсичность). Для чего белых крыс разделили на 4 группы, которым задавали внутрь в разных дозах изучаемую кормовую добавку. Оценивали их внешнее физиологическое состояние, были проведены анатомоморфологические и гистологические исследования почек.

Полученные результаты сравнивали с показателями почек контрольной группы. Установлено, что во всех представленных препаратах структура сходна с контролем. Имелись случаи слабо выраженных признаков быстро наступившей смерти в виде наличия остаточной первичной мочи в просветах капсул клубочков почек и признаки десквамации некоторых клеток эпителия извитых канальцев почек, что может наблюдаться и в норме.