Гистологическая картина желудка белых крыс при субхроническом исследовании кормовой добавки

Современное ведение животноводства предполагает максимальный учет физиологических возможностей организма на всех этапах его индивидуального развития [2, 5]. Развитие животноводства во многом определяет уровень потребления населением продовольствия, качество продуктов питания, состояние внутреннего рынка и в конечном итоге продовольственную безопасность страны [5, 7, 12]. В настоящее время большинство хозяйств широко используют современные кормовые добавки в качестве дополнительной подкормки к основному рациону жвачным животным [4, 5, 9, 15]. Их используют в виде концентратов, премиксов, лизунцов для сельскохозяйственных животных, которые необходимы для улучшения продуктивности животных, ускорения роста и развития молодняка. Также их используют для сбалансирования рациона по основным питательным веществам – углеводам, витаминам, минеральным веществам с целью предотвращения нарушений обмена веществ в организме животных, и многие ученые разрабатывают различные составы кормовых добавок для полного раскрытия генетического потенциала высокопродуктивных животных [7, 8, 10, 13].

В настоящее время многие промышленное предприятия производят комбикорма и кормовые добавки для отраслей животноводства и птицеводства. В то же время сельхозорганизации, занимающиеся молочным и мясным скотоводством, овцеводством и козоводством, в основном используют, за исключением престартерных кормов, комбикорма и зерносмеси собственного производства. Они самостоятельно или с помощью специалистов–консультантов рассчитывают научно-обоснованные рецепты комбикормов к рационам с максимальным использованием кормов собственного производства [6, 10, 13].

Разработки и исследования в данном направлении проводились в рамках Федеральной научно-технической программы развития сельского хозяйства на 2017-2025 годы, утвержденной постановлением Правительства Российской Федерации от 25 августа 2017 г №996 в рамках государственных задач: «Мобилизация генетических ресурсов растений и животных, создание новаций, обеспечивающих производство биологически ценных продуктов питания с максимальной безопасностью для здоровья человека и окружающей среды» АААА-А18-118031390148-1 и «Разработка и внедрение функциональных кормовых добавок и биологических лечебнопрофилактических препаратов как элементов биорегулирующей терапии для органического животноводства и аквакультуры АААА-А20-120031290016-9».

Материал и методы исследований. С целью изучения действия углеводно-витаминно-минерального концентрата

«Лизунец» на строение внутренних органов и гистологические изменения желудка белых крыс провели доклинические исследования на субхроническом опыте [1, 3, 7, 14, 15].

Опыты проведены на клинически здоровых беспородных белых крысах, содержащихся в условиях вивария ФГБОУ ВО Казанская ГАВМ, разного пола со средней живой массой до 100 г., разделенных на 4 группы по 6 голов в каждой. Крысы первой группы служили контролем и получали внутрь дистиллированную воду, второй группы -получали кормовую добавку УВМК «Лизунец» в виде водной суспензии в дозе 800 мг/кг, третьей опытной группы 400 мг/кг, четвертой опытной группы - 160

мг/кг живой массы. Объем суспензии не превышал 3 мл на голову. При проведении исследования руководствовались методикой, изложенной в «Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств» [11]. При этом отмечали их внешнее состояние, поведенческие реакции и клинические признаки [13].

Через 30 суток подопытных животных умерщвляли под эфирным наркозом с соблюдением правил эвтаназии. Вскрывали грудную и брюшную полости и извлекали органы для гистологического исследования. Кусочки органов фиксировали в нейтральном 10 % растворе формалина и направили в лабораторию для изучения.

Рисунок 1 – Гистокартина желудка крысы первой контрольной группы. Окраска гематоксилином и эозином Х100

Рисунок 2 – Гистокартина желудка крысы первой контрольной группы. Окраска гематоксилином и эозином Х400

Рисунок 3 – Гистокартина желудка крысы второй опытной группы. Окраска гематоксилином и эозином Х100

Рисунок 4 – Гистокартина желудка крысы второй опытной группы. Окраска гематоксилином и эозином Х400

Рисунок 5 – Гистокартина желудка крысы третьей опытной группы. Окраска гематоксилином и эозином Х100

Рисунок 6 – Гистокартина желудка крысы третьей опытной группы. Окраска гематоксилином и эозином Х400

Рисунок 7 – Гистокартина желудка крысы четвертой опытной группы. Окраска гематоксилином и эозином Х100

Рисунок 8 – Гистокартина желудка крысы четвертой опытной группы. Окраска гематоксилином и эозином Х400

Результат исследований. По проведенным результатам исследования установлено, что за время применения кормовой добавки УВМК «Лизунец» поведение, клинические признаки, состояние шерстного покрова, прием воды и корма опытных крыс не отличались от контрольных. Результаты гистологических срезов тканей подопытных белых крыс представлены на рисунках 1-8.

Исследованиями установлено, что ткани желудка белых крыс контрольной группы (Рисунок 1, 2) состоят из четырех оболочек. Слизистый слой представлен многочисленными простыми трубчатыми железами. В центральной части слизистой имеется основа складки, образованная подслизистой. Здесь расположены расширенные, полнокровные сосуды, мышечные волокна и волокна соединительной ткани. Слизистая покрыта слизистым цилиндрическим эпителием. Ямки желез данного среза неглубокие, высота железы значительно больше глубины ямок, вероятно срез представлен телом желудка. На втором рисунке представлена область шейки и базальная часть желез слизистой желудка. Здесь у основания видны зимогенные клетки с зернистой цитоплазмой, далее в области шейки находятся уже обкладочные клетки. Они крупные, светлые. Среди них можно увидеть слизистые шеечные клетки, которые более темные и которые мельче.

В желудке крысы второй опытной группы (Рисунок 3, 4) хорошо выделяются все четыре оболочки стенки желудка. Слизистый слой покрыт цилиндрическим эпителием, складки стенки желудка сформированы. Центральная часть складки состоит из подслизистого слоя с собственным мышечным слоем. Здесь располагаются расширенные, полнокровные сосуды. Выделяются простые трубчатые железы. Глубина ямок некоторых желез превышает 1/3 их высоты. Средний мышечный слой хорошо развит, представлен гладкой мускулатурой. Ядра клеток хорошо окрашены. На большем увеличении срез представлен шеечной и базальной частью слизистого слоя желудка. Видны зимогенные клетки, выше которых темные шеечные клетки и еще выше единичные обкладочные клетки с ровными контурами, более правильной геометрической формы, со светлыми ядрами.

Слизистый слой желудка крысы третьей опытной группы (Рисунок 5, 6) с гиперхромными клетками, более толстый. Просматривается складка слизистой оболочки желудка. Железы с неглубокими ямками, срезаны косопоперечно, поперечно и продольно. Кровенаполнение сниженное. Слизистая покрыта цилиндрическим эпителием. В складке стенки желудка отмечаются мышечные волокна слизистой оболочки. Центральная часть складки состоит из подслизистого слоя с собственным мышечным слоем. Простые трубчатые железы представлены преимущественно обкладочными клетками на верхних этажах. В базальной части зимогенные клетки слабо различимы.

На 7 рисунке срез желудка крысы четвертой опытной группы на малом увеличении представлен всеми слоями стенки органа. Слизистая складчатая, дно ямок желез доходит до 1/3 высоты самой железы. Цилиндрический эпителий, покрывающий слизистый слой, имеет хорошо выраженную структуру. На поверхности просматриваются единичные слущенные фрагменты эпителия. У основания желез расположены зимогенные клетки, строение которых хорошо видно при большом увеличении. У них слабовыраженные зернистая цитоплазма, базофильные ядра, редкие шеечные клетки. У обкладочных клеток цитоплазма равномерной эозинофильной окраски. Кровенаполнение умеренное. Мышечный слой хорошо просматривается при большом увеличении, различаются разнонаправленные волокна в трех пластах. Циркулярный пласт наиболее толстый. Два других значительно тоньше.

Заключение. Исследованиями установлено, что за время применения кормовой добавки УВМК «Лизунец» внутрь в виде водной суспензии опытным групп белых крыс в различных дозах со стороны поведения, клинических признаков, состояния шерстного покрова, приема воды и корма не было отличий от животных контрольной группы. Морфометрическая картина ткани желудка белых крыс опытных групп резких отличий по сравнению с контрольной группой не имела. В основном, слизистый слой представлен многочисленными простыми трубчатыми железами. На всех рисунках видны складки слизистой оболочки, в центральной части которой имеется основа складки, образованная подслизистой. Отчетливо видны полнокровные сосуды, мышечные волокна и волокна соединительной ткани. На поверхности определяются единичные слущенные фрагменты эпителия. У основания желез расположены зимогенные клетки, строение которых лучше видно при большем увеличении. У них слабо выражены зернистая цитоплазма, базофильные ядра. Мышечный слой хорошо просматривается, при большом увеличении в трех пластах различаются разнонаправленные волокна. Из них циркулярный пласт наиболее толстый, два других значительно тоньше.

Резюме

В настоящее время большинство фермерских хозяйств широко используют современные кормовые добавки в качестве дополнительных к основному рациону животных. Они используются в виде концентратов, премиксов, слизи, которые необходимы для повышения продуктивности, ускорения роста и развития, а также предотвращения нарушений обмена веществ в организме животных. В связи с этим целью данных исследований было изучение влияния новой кормовой добавки углеводно-витаминно-минерального концентрата "Лизунец" на морфологические характеристики желудка белых крыс в субхроническом эксперименте. Эксперименты проводились на белых крысах, разделенных на 4 группы. Животным контрольной группы давали дистиллированную воду, а остальным 3 группам давали разные дозы УВМК "Лизунец" в виде водной суспензии в течение 30 дней. В конце исследования подопытных животных умерщвляли под эфирным наркозом в соответствии с правилами эвтаназии. Были вскрыты грудная и брюшная полости и извлечены органы для гистологического исследования.

Установлено, что при применении кормовой добавки УВМК "Лизунец" поведенческие реакции, потребление воды и корма не отличались от групп животных контрольной группы. Морфофункциональная картина ткани желудка белых крыс экспериментальных групп животных также не отличалась по сравнению с гистологией желудка контрольных групп белых крыс.