Глутамилтрансфераза в тканях толстого кишечника у молодняка свиней

Гамма-глутамилтрансфераза (ГГТ) - микросомальный фермент, участвующий в обмене аминокислот. Катализирует перенос гамма-глутамилового остатка с пептида или пептидоподобного вещества, содержащего концевой глутаматный остаток, на аминокислоту, другой пептид или иную субстратную молекулу. В клетке фермент локализован в мембране, лизосомах и цитоплазме, причем мембранная локализация ГГТ характерна для клеток с высокой секреторной, экскреторной или реабсорбционной способностью. В связи с этим возникает большой научный интерес к изучению активности этого фермента в тканях органов у растущего организма.

В предыдущих наших работах представлены результаты исследований активности ГГТ в тканях печени и желудка [2, 4].

Материалы и методики исследований . Для исследований выбраны поросята белой крупной породы в возрасте 1, 7, 14, 21, 28, 60, 120 и 180

суток, выращенные в условиях ОАО «Вурнарский мясокомбинат» Вурнарского района Чувашской Республики. Поросят натощак вводили в состояние общего наркоза. Эвтаназию и все манипуляции выполняли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» [5]. Патологоанатомическое вскрытие проводили по методу Шора [1]. Кишки очищали от содержимого, промывали холодным физиологическим раствором, взвешивали, из проксимальной, медиальной и дистальной частей каждой кишки толстого кишечника брали пробы тканей и для дальнейших исследований замораживали в жидком азоте. Активность фермента ГГТ определяли унифицированным колориметрическим методом по «конечной точке» [3]. При определении активности фермента в тканях кишок использовали набор реактивов «Витал Диагностик» (СПб). Активность фермента в тканях выражали в мкмоль/г*ч. Цифровой материал исследований обработали методом вариационной статистики, с использованием программного комплекта «Microsoft Excel–2007».

Установлено, что поросята рождаются с разной активностью ГГТ в тканях слепой кишок. У односуточных поросят активность фермента в тканях медиальной части кишки самая низкая, а в тканях проксимальной части кишки у поросят этого возраста она превышает таковой медиальной части в 4,1 раза, р≤0,001, дистальной – в 7,2 раза, р≤0,001. К недельному возрасту активность ГГТ в тканях проксимальной ччасти слепой кишки возрастает в 1,8 раза, р≤0,001, в тканях медиальной части – в 3,2 раза, р≤0,001, а в тканях дистальной части величина фермента не изменяется, сохраняется на уровне односуточных. В первой фазе молочного питания поросят, у двухнедельных, активность ГГТ увеличивается в тканях проксмальной и медиальной частей слепой кишки, соответствено - в 1,4 раза, р≤0,01 и – в 2,9 раза, р≤0,01. В последующем, во второй фазе молочного питания, у трехнедельных поросят, активность фермента в тканях наружной ободочной кишки не изменяется, сохраняется на уровне двухнедельных. В тканях внутренней ободочной кишки у трехнедельных поросят активность фермента в тканях всех частей слепой кишки снижается существенно: проксимальной части на 78,4%, р≤0,001; медиальной – на 74,6%, р≤0,001 и дистальной на 42,3%, р≤0,001. К четырехнедельному возрасту поросят, наоборот, активность, фермента значительно возрастает: в тканях проксимальной части 4,2 раза, р≤0,001, медиальной - в 3,8 раза, р≤0,001 и дистальной – в 1,7 раза, р≤0,001. На уровене четырехнедельных актиность фермента сохрняется в тканях медиальной части слепойкишки, а в тканях проксимальной и дистальной частей в эту фазу она питания она увеличивается соответственно в 1,2 раза. р≤0,05и в 1,4 раза, р≤0,001. Активность исследуемого фермента в фазе первого дефинитивного питания поросят, у двухмесячных, в тканях всех трех частей слепой кишки значительно падает: проксимальной части - на

82,4%, р≤0,001, медиальной – на 31,1%, р≤0,001. В дистальной – на 80,9%, р≤0,001. У шестимесячных, во второй фазе дефинитивного питангия, активность ГГТ существенно возрастает в тканях проксимальной части (в 4,1 раза, р≤0,001) и в тканях дисталь ной части (в 7,4 раза р≤0,001).

Результаты исследований . Они обобщены в таблице.

Таблица — Гамма-глутамилтрансфераза в тканях кишок толстого кишечника у поросят, мкмоль/г*час

У односуточных поросят, находящихся в фазе молозивного питания, в тканях наружной и внутренней ободочных кишок уровень фермента ГГТ относительно низкий. Вместе с тем в тканях внутренней кишки он в 4,0 раза выше, чем в тканях наружной ободочной кишки. Через семь суток, в молозивно-молочной фазе, в тканях наружной ободочной кишки активность фермента увеличивается значительно, в 2,8 раза, р≤0,001, а в тканях внутренней ободочной кишки он сохраняется на уровне односуточных. В последующие семь суток жизни поросят, в первой молочной фазе, у двухнедельных, активность фермента продолжает повышаться, соответственно в тканях наружной кишки в 2,4 раза, р≤0,001; внутренней – в 1,2 раза, р≤0,05. Во второй молочной фазе, у трехнедельных, в тканях наружной и внутренней ободочной кишках величина фермента существенно снижается: на 30,7%, р≤0,001и на 68,1%, р≤0,001 соответственно. В третьей молочной фазе питания, у четырехнедельных поросят, активность ГГТ в тканях наружной кишки сохранятся на уровне трехнедельных, а в тканях внутренней кишки существенно возрастает, в 4,3 раза, р≤0,001.В дальнейшем, у двух и четырехмесячных поросят, активность исследуемого фермента в тканях обеих ободочных кишок колеблется на уровне четырехнедельных. К шестимесячному возрасту поросят активность ГГТ в тканях обеих ободочных кишок значительно увеличивается: в тканях наружной кишки в 2,4 раза, р<0,001, в тканях внутренней кишки - в 1,7 раза, р<0,001. Вместе с тем у шестимесячных поросят в тканях внутренней ободочной кишки уровень исследуемого фермента выше, чем в тканях наружной ободочной примерно в 1,2 раза, р<0,01.

Активность ГГТ у односуточных поросят, в фазе молозивного питания, в тканях прямой кишки определяется на разных уровнях, в тканях внутренней обоочной кишки он превышает наружной в 2,7 раза, р≤0,001. Через семь суток жизни поросят в тканях изучаемой кишки активность этого фермента в обеих частях существенно увеличивается: в тканях наружной части - в 3,4 раза, р<0,001, в тканях внутренней - в 1,9 раза, р<0,001 соответственно. В первой молочной фазе питания поросят, у двухнедельных, уровень ГГТ продолжает повышаться: в тканях проксимальной части выше предыдущего возраста в1,4 раза, р≤0,001, в дистальной в 1,8 раза, р<0,001 соответственно. Во второй молочной фазе питания она в тканях обеих частей прямой кишки существенно снижается: в тканях проксмальной части на 60,2%, р<0,001, дистальной - на 71,7%, р<0,001 соответственнно. В третьей молочной фазе, у четырехнедельных, активность ГГТ значительно возрастает: в тканях наружной ободочной в 4,2 раза, р≤0,00 и в тканях внутренней в 4,3 раза, р≤0,001. К двухмесячному возрасту, в первой дефинитивной фазе питания, активность фермента в тканях обеих частях проямой кишки также достоверно возрастает: в проксимальной части в - в 1,3 раза, р<0,01 и в дистальной - в 1,3 раза, р<0,01. В последующем у четырехмесячных, она достоверно снижается: в тканях проксимальной части на 42,0%, р≤0,001 и на, а дистальной - на 67,8%, р<0,001, Активность ГГТк шестимесячных -му возрасту в обеих частях прямой кишки существено повышается, в тканях проксимальной части в 1,7раза, р≤0,001 и дистальной в 2,3 раза, р≤0,001. Уровень фермента в тканях обеих частей прямой кишки у шестимесячных поросят примерно одинаков.

Обсуждение результатов. Уровень ГГТ в тканях всех частей слепой кишки высокой интенсивностью изменяется в такие фазы питания, как молозивно-молочная, вторая молочная, третья молочная и третья дефинитивная.

Наиболее интенсивные возрастные изменения активности ГГТ в тканях наружной ободочной кишки выявляются в первой молочной, во второй молочной и в третьей фазе дефинитивного питания. В тканях внутренней ободочной кишки значительные возрастные изменения активности фермента обнаруживаются во второй молочной, в третьей молочной и в третей дефинитивной фазах питания.

В тканях прямой кишки наиболее интенсивные изменения активности фермента отмечаются в такие фазы, как молозивно-молочная, вторая молочная, третья молочная и третья дифинитивная.

Заключение. Таким образом, характер возрастных изменений активности исследуемого фермента ГГТ в тканях слепой, наружной и внутренней ободочных и прямой кишок у поросят разнообразный. В каждую фазу питания поросят уровень фермента изменяется с различной интенсивностью.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Вскрытие и паталогоанатомическая диагностика болезней сельскохозяйственных животных / Под ред. В.П. Шишкова, А.В. Жарова. – М.: Колос, 1999. – 318 с. 2. Игнатьев Н.Г. Активность гамма-глутамилтрансферазы в тканях желудка у поросят / Н.Г. Игнатьев, М.Г. Терентьева // Аграрный вестник Урала. – 2011. - №9 (88). – С. 12 – 13. 3. Методы биохимического анализа: справочное пособие / под ред. академика РАСХН Б.Д. Кальницкого. – Боровск, 1977. – 356 с. 4. Терентьева М.Г. Активность γ-глутамилтрансферазы в тканях печени поросят при добавлении в рацион свиней БВМД / М.Г. Терентьева // Materiały VIII Międzynarodowej naukowi-praktycznej konferencji «Nauka i inowacja — 2012». Volume 17. Ekologia. Rolnictwo. Weterynaria.: Przemyśl. Nauka i studia — 2012.— S. 96 — 99. 5. Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных // Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР №775 от 12.03. 1977 г.

ГЛУТАМИЛТРАНСФЕРАЗА В ТКАНЯХ ТОЛСТОГО КИШЕЧНИКА У МОЛОДНЯКА СВИНЕЙ

Терентьева М.Г., Игнатьев Н.Г.

Резюме

Определён характер возрастных изменений активности ГГТ в тканях разных кишок толстого отдела кишечника у поросят. Наиболее интенсивные колебания активности ГГТ у поросят выявляются в молочный период питания и после постановки их на откорм.

GLUTAMYLTRANSFERASE IN COLON TISSUE IN YOUNG PIGS

Terentyeva M.G., N. Ignatyev N.G.