Гормонокорригирующие свойства синтетического тимогена при стимуляции воспроизводительной функции у свиноматок

Материал и методы исследований. Исследования проводили в условиях свинокомплекса ЗАО «Троицкое» Губкинского района Белгородской области на поголовье свиноматок средней массой 180 кг крупной белой породы, подобранных в группы на пятом опоросе по принципу групп-аналогов в зимневесенний период содержания. Глутамил-триптофановый комплекс представляет собой синтетическое соединение (C 16 H 20 N 3 О 5 Na), которое в концентрации 0,01% является действующим началом при производстве пептидного иммуномодулятора тимоген. Были подобраны четыре группы (n=5) свиноматок. 1-й группе животных вводили 0,01%-й раствор тимогена в дозе 20 мл/гол/сут внутримышечно в течение 6 сут с 21-х по 16-е сут перед родами. 3-й группе свиноматок применяли тимоген в аналогичной дозе, но с 16 по 21-е сут после родов. 2-я и 4-я группы – контрольные группы (интактные животные). Время отъема поросят в хозяйстве – на 21-е сут после родов. Определение содержания гормонов в сыворотке крови свиноматок проводили согласно общепринятым методикам [2]. При определении достоверности разницы между показателями взятия крови внутри групп использовали аргумент Стьюдента. Результаты рассматривались как достоверные начиная со значения p<0,05.

Результаты исследований . В 1-й группе свиноматок (табл.) содержание гормона эстрадиола-17β на 22-е сут до родов составило 10,1±0,63 нмоль/л, что соответствовало физиологически нормальным показателям у животных в этот период. В последующем, по мере приближения к родам, количество эстрадиола в крови животных значительно увеличилось. Так, если к 10-м сут до родов концентрация гормона имела тенденцию повышения на 10,8 %, то на 5-е сут она уже имела превышение в 8,7 раза (98,2±5,94 нмоль/л, р<0,001) по сравнению с предыдущим значением, а по сравнению с 22-ми сут до родов в 9,7 раза, р<0,001. За 1 сут до родов количество эстрадиола еще увеличилось от предыдущего значения в 1,3 раза (до 126,5±0,74 нмоль/л, р<0,001) при достоверных различиях с предыдущими показателями. Во 2-й (контроль) группе изменения концентрации гормона эстрадиола-17β, уровень которого изначально был в пределах физиологической нормы, имели такую же закономерность повышения ближе к родам животных. Но степень повышения была значительно меньше и имела недостоверные изменения по сравнению с предыдущими значениями в группе. Повышение уровня содержания эстрадиола во 2-й (контроль) группе по мере приближения к родам составило: к 10-м сут в 1,7 раза; 5-м сут – в 2,5 раза; 1-м сут – в 1,8 раза (113,1± 19,7 нмоль/л). Таким образом, превышение концентрации гормона эстрадиола ко 2-м сут перед родами по сравнению с его изначальным уровнем до применения тимогена (22-е сут) в 1-й группе было в 12,5, а во 2-й (контроль) группе – в 8,3 раза, что на 33,6 % меньше, чем в 1-й группе.

Концентрация прогестерона в сыворотке крови свиноматок 1-й группы равномерно понижалась ко времени наступления родов. К 10-м сут исследований количество прогестерона практически не изменилось, а к 5-м сут снизилось на 38,3 %, р<0,001, и в дальнейшем за 1сут до родов содержание прогестерона еще снизилось в 1,7 раза, р<0,01, достигнув 12,9±0,76 нмоль/л. У животных 2-й (контроль) группы отмечалось менее выраженное снижение количества прогестерона. К 10-м сут оно составило 8,6 %, 5-м сут - 25,4 %, р<0,05, а на 1-е сут - наоборот, имело незначительную тенденцию повышения. Прогестерон-эстрадиоловое соотношение за 22 сут до родов в 1-й группе составило 3,6 : 1, а во 2-й (контроль) группе 2,2 : 1. К 1-м сут перед родами это соотношение поменялось и было равно: в 1-й группе 1 : 9,8, а во 2-й (контроль) группе - 1 : 4,8, что характеризует стимулирующее влияние тимогена на эстрогенпродуцирующую функцию яичников, которое проявилось в повышении у свиноматок концентрации эстрадиола к моменту родов в два раза по сравнению с контролем. Таким образом, снижение количества прогестерона к 1-м сут перед родами по сравнению с первоначальным его значением до применения тимогена (22-е сут) в 1-й группе составило в 2,9 раза, а во 2-й (контроль) группе - 22,5 %. Учитывая, что повышение концентрации эстрогенов у самок животных перед родами способствует нормальному протеканию родов и, наоборот, сниженный уровень эстрогенов и повышенный прогестерона перед родами способствует возникновению заболеваний родового и послеродового периодов [1, 2, 7], отмеченное достоверное повышению перед родами концентрации эстрадиола у свиноматок после применения тимогена свидетельствует о наличии ярко выраженных биокоррегирую-щих свойств глутамил-триптофанового комплекса препарата по стимуляции процессов активизации нейроэндокринной регуляции воспроизводительной функции. Кроме того, полученные результаты содержания гормонов перед родами характеризуют положительные гормонокорригирущие свойства тимогена, так как у свиноматок с послеродовыми болезнями содержание прогестерона в крови за трое, одни сутки до опороса и в начале родов выше, а эстрадиола - ниже, чем у здоровых животных, что отмечено у свиноматок 1-й и 2-й (контроль) групп.

В 1-й группе за весь период исследований отмечено незначительное повышение уровня кортизола, который изначально также находился в пределах физиологически нормальных значений (49,94± 1,32 нмоль/л). На 10-е сут перед родами было отмечено повышение концентрации кортизола на 3,2 % по сравнению с предыдущим значением (на 22-е сут). К 5-м сут повышение составило 6,0 %, которое практически не изменилось и на 1-е сут перед родами (54,46±1,27 нмоль/л). Содержание гормона кортизола перед родами у свиноматок 2-й (контроль) группы до введения тимогена (22-е сут до родов) соответствовало физиологически нормальным значениям (50,48±0,76нмоль/л). В последующем, по мере приближения к родам, концентрация кортизола в крови постепенно снижалась и составила: к 10-м сут - на 5,0 %; 5-м сут - 11,6 %, р<0,01; 1-м сут - 20,0 % (34,04±1,07 нмоль/л), р<0,001. Таким образом, снижение концентрации гормона кортизола в крови свиноматок к 1-м сут перед родами, по отношению к изначальному, во 2-й (контроль) группе животных составило 32,6 %, р<0,001, а в 1-й группе, наоборот, установлено незначительное повышение -на 8,3 %, р<0,01. Учитывая имеющиеся данные других исследований [1, 11], где отмечено, что кортизол вы- рабатывается корой надпочечников из холестерола и стимулируется АКТГ гипофиза, можно предполагать, что механизм действия тимогена связан с высшими звеньями нейроэндокринной регуляции воспроизводительной функции у самок животных. Повышение кортизола после применения тимогена на 22-е сут перед родами свиноматок свидетельствует об активизации обменных процессов и снижении фетоплацентарной недостаточности, в том числе и синтезе в печени глюкозы из неуглеводистых соединений и аминокислот (глюконеогенез), что необходимо для нормального протекания родового и послеродового периодов. Снижение уровня содержания кортизола перед родами, например на 24 %, отмечено и другими исследователями [1, 6, 11].

Уровень содержания гормона тироксина в крови коров 1-й группы животных до начала исследований соответствовал физиологической норме. После применения тимогена к 10-м сут исследований установлено недостоверное незначительное снижение на 5 % концентрации тироксина в крови. На 5-е сут отмечено дальнейшее снижение еще на 8,7 %, а к 1-м сут снижение по отношению к предыдущему значению составило уже 27,1 %, р<0,001, и достигло 32,80±2,04 нмоль/л при высокой достоверности ко всем предыдущим значениям. Во 2-й (контроль) группе был отмечен аналогичный характер снижения концентрации тироксина у свиноматок по мере приближения к родам. На 10-е сут исследований тенденция снижения составила всего 2,7 %, на 5-е сут - 6,3, а на 1-е сут перед родами - еще на 5,6 %, достигнув 53,98±2,77 нмоль/л. Таким образом, в 1-й группе свиноматок снижение концентрации тироксина к моменту родов от первоначального значения на 22-е сут составило 36,4 %, а во 2-й (контроль) группе 13,8 %, что меньше показателя в 1-й группе в 2,6 раза. Учитывая, что влияние гормонов щитовидной железы на окислительные процессы и различные виды обменных реакций в организме способствует росту, развитию и дифференцировке тканей [11], полученный больший процент снижения содержания катаболитического гормона тироксина к моменту родов у животных 1-й группы после применения тимогена характеризует большую степень затрат тироксина на повышение активности и функций коры надпочечников и половых желез, стимулируя при этом нейроэндокринные взаимосвязи, индуцирующие половую цикличность. Применение тимогена свиноматкам 3-й группы на 16-21 сут после родов показало, что содержание эстрадиола-17в к 26-м сут после родов (5-е сут после отъема поросят) постепенно возрастает. На 16-е сут после родов (перед введением тимогена) количество эстрадиола в крови свиноматок соответствовало физиологически нормальным значениям. В дальнейшем, на 22-е сут (после отъема поросят), концентрация эстрадиола повысилась в 5,2 раза, р<0,05, на 24-е сут не имела существенных изменений, а к 26-м сут повысилась в 2,3 раза (130,14±5,6 нмоль/л), р<0,001, от предыдущего показателя и имела высокие достоверные различия по отношению ко всем предыдущим значениям. В 4-й (контроль) группе изменения концентрации эстрадиола также характеризовались различной степенью повышения к 26-м сут после опороса. На 22-е сут повышение составило в 1,8 раза, р<0,05, на 24-е сут - в 2 раза, р<0,001, и на 26-е сут - в 1,5 раза, р<0,001, и при высокой степени достоверности от всех предыдущих значений. Таким образом, характер изменения содержания эстрогенов в крови свиноматок после родов в обеих группах был одинаков. Но в 3-й группе к 26-м сут после родов (5-е сут после отъема поросят) и введения тимо-гена повышение по отношению к первоначальному значению гормона (на 2-е сут) составило в 10,3 раза, р<0,001, а в 4-й (контроль) группе - в 5,9 раза, р<0,001, то есть в 2 раза меньше, чем в 3-й группе. Учитывая, что увеличение выработки эстрогенов в конце стадии возбуждения до максимума может продолжаться сутки и более, в результате чего наступает состояние течки и половой охоты, полученные результаты показали, что применение тимогена может стимулировать процессы фолликулогенеза. Содержание прогестерона в крови свиноматок 3-й опытной группы на 16-е сут после родов соответствовало физиологически нормальным значениям [2]. В последующем, на 22-е сут, было отмечено повышение концентрации гормона на 15,1%, р<0,001, на 24-е сут количество прогестерона повысилось еще в 1,9 раза, р<0,001, а на 26-е сут было отмечено, наоборот, снижение уровня гормона в 4,8 раза, р<0,001 (23,04±0,90 нмоль/л), по сравнению с предыдущим значением. В 4-й (контроль) группе изначальный уровень прогестерона в крови свиноматок соответствовал нормальным значениям. В последующем прогестерон в крови, имея общую направленность на снижение, в середине исследований незначительно повысил свою концентрацию. На 22-е сут после родов повышение составило 9,8 %, а к 24-м сут установлено снижение от предыдущего значения на 31,2 %, р<0,001. На 26-е сут снижение было еще на 13,7 %, р<0,05, достигнув при этом 28,24±1,28 нмоль/л. Таким образом, количество прогестерона в крови свиноматок 3-й группы к 26-м суткам после родов (5-е сут после отъема поросят) по отношению к 16-м сут достоверно снизилось в 2,1 раза, а в 4-й (контроль) группе это достоверное снижение было в 1,5 раза, что было на 28,6 % меньше, чем в 3-й группе. В результате снижения уровня прогестерона из-за обратной отрицательной связи увеличивается уровень ФСГ, отсюда созревающие граафовы пузырьки в яичниках увеличивают синтез стероидных гормонов, особенно эстрогенов. Концентрация этих гормонов повышается и достигает максимума уже через 24 часа. Отмеченные изменения содержания половых стероидов в крови и, соответственно, фолликулогенез у свиноматок после отъема поросят характе- ризуют гормонально-генеративные свойства тимогена. Содержание кортизола в крови свиноматок 3-й группы до начала исследований (16-е сут после родов) соответствовало физиологически нормальным значениям. После введения тимогена установлено снижение на 22-е сутки после родов (2-е сут после отъема поросят) концентрации кортизола в 4,4 раза, р<0,05, далее на 24-е сут отмечена тенденция уменьшения уровня гормона на 36,6 %, а на 26-е сут еще на 6,5 % (47,88±3,37 нмоль/л). В 4-й (контроль) группе динамика снижения кортизола имела менее выраженный характер. На 16-е сут исследований его содержание соответствовало норме, а к 22-м сут снизилось на 12,3 %. В последующем, на 24-е сут установлена тенденция снижения кортизола на 42,2 %, а к 26-м сут – 25,2 % (73,6±18,0 нмоль/л). Таким образом, снижение количества гормона к 5-м сут после отъема поросят (26-е сут после родов) по сравнению с исходным его значением на 16-е сут составило в 1-й группе 86,8 %, а в 4-й (контроль) группе – 62,1 %, что на 24,7 % меньше, чем в 1-й группе. Выделение кортизола (под влиянием АКТГ) значительно возрастает при стрессах и воспалительных процессах, что является ответной защитной реакцией организма на повышение устойчивости и сопротивляемости организма к действию неблагоприятных факторов [2, 11]. Таким образом, отмеченный наибольший процент снижения содержания кортизола в крови свиноматок 1-й группы подтверждает иммуномодулирующие свойства тимогена. Содержание гормона тироксина в крови свиноматок 3-й группы на 16-е сут после родов соответствовало физиологической норме. В последующем, на 22-е сут (после применения тимогена), отмечено снижение концентрации гормона в сыворотке крови на 39,4 %, p<0,001, на 24-е сут снижение составило еще 13,9 %, а на 26-е сут количество тироксина изменилось незначительно и было равно 50,62±1,81 нмоль/л. В 4-й (контроль) группе уровень тироксина на 16-е сут соответствовал норме. В дальнейшем, на 22е сут исследований, отмечена тенденция его незначительного снижения (на 5,6 %), на 24-е сут снижение составило 8,2 % и на 26-е сут – 3,5 %. Таким образом, уровень снижения тироксина у свиноматок к 26-м сут после родов (5-сут после отъема поросят) составил в 3-й группе 44,4 %, р<0,001, а в 4-й (контроль) группе – 16,4 %, p<0,05, что было меньше на 28,0 %, чем в 1-й группе. Исследованиями отмечено, что между щитовидной железой, надпочечниками и яичниками у свинок существует функциональная связь: с повышением содержания в крови половых гормонов содержание тиреоидных гормонов снижается [1, 7, 10, 11], что в наибольшей степени проявилось после родов у свиноматок 3-й группы, где применяли биокорректор тимоген.

Применение тимогена свиноматкам (n=50) в дозе 20 мл/гол/сут в/мышечно:

• а)    в течение 21–16 сут перед родами стимулировало половую цикличность у 86,0 %, а оплодотворение – 80,0 % свиноматок. Средняя масса поросят при рождении составила 1,4 кг, а количество поросят ги-потрофиков –14,0 %. Наличие ММА отмечено у 10,0 % свиноматок;

• б)    в течение 16–21 сут после родов стимулировало появление половой цикличности и оплодотворяе-мости на 5-е сут после отъема поросят у 96,0 % свиноматок. Средняя масса поросят 1,3 кг, количество ги-потрофиков – 20 %, наличие ММА – у 24 % свиноматок;

• в)    в контроле: половая цикличность отмечена у 76,0 %; оплодотворяемость – 72,0 % свиноматок; масса новорожденных – 1,3 кг; количество гипотрофиков – 20,0 %; свиноматок с ММА – 24,0 %.

Выводы. Исходя из вышеизложенных данных гормоностимулирующего влияния тимогена и полученной эффективности при апробации препарата в условиях производства, наиболее оптимальным следует считать вариант применения свиноматкам 0,01%-го раствора синтетического иммуномодулятора тимогена на 21–16-е сут перед родами внутримышечно в дозе 20 мл/гол/сут.