Характеристика генотипов детей и взрослых, проживающих в условиях воздействия химических факторов риска
Автор: Долгих О.В., Кривцов А.В., Бубнова О.А., Старкова К.Г., Лучникова В.А., Пирогова Е.А.
Журнал: Анализ риска здоровью @journal-fcrisk
Рубрика: Экспериментальные модели и инструментальные исследования для оценки риска в гигиене и эпидемиологии
Статья в выпуске: 1 (9), 2015 года.
Бесплатный доступ
Проведена сравнительная оценка результатов иммунодиагностики и анализа полиморфизма генов детей, экспонированных аэротехногенными загрязнителями, с генотипами их родителей. Установлен генетический полиморфизм генов детоксикации CYP1A1, CPOX, SULT1A1, а также вариантная аллельность генов, характеризующих состояние эндотелия сосудов (VEGF и eNOS), как у детей, так и их родителей. Представленные данные свидетельствуют о генетической фиксации минорных генотипов родителей у детей в условиях воздействия химических факторов риска.
Аэрогенная внешнесредовая нагрузка, полиморфизм генов, генетическая фиксация, гены детоксикации, факторы риска
Короткий адрес: https://sciup.org/14237898
IDR: 14237898
Текст научной статьи Характеристика генотипов детей и взрослых, проживающих в условиях воздействия химических факторов риска
Актуальным является проведение объективной и достоверной оценки систем детоксикации и полиморфизма генов у населения в условиях повышенной техногенной химической нагрузки с использованием современных диагностических молекулярно-генетических технологий [1–4, 7–11]. Анализ и использование в дельнейшем современных генетических диагностических критериев, прежде всего генов детоксикации 1-й и 2-й фазы, позволит расширить доказательную базу по выявлению причинно-следственных связей патологических и преморбидных состояний, обусловленных воздействием химических факторов среды обитания [5, 6, 12].
Целью исследования являлся сравнительный анализ генетических маркеров у детского
и взрослого населения, проживающего на территории воздействия химических факторов риска.
Материалы и методы. В качестве территории наблюдения были выбран район крупного промышленного города с развитой химической промышленностью. Ведущими факторами аэрогенной внешнесредовой нагрузки на территории являются формальдегид (превышение ПДК сс до 3,57); фенол (до 1,42 ПДК сс ), бенз(а)пи-рен (до 5,41 ПДК сс ). Приоритетный путь поступления вредных веществ – ингаляционный. В качестве контрольной, условно-чистой территории выбран район с допустимым уровнем химического воздействия. Обследовано детское население (75 человек), постоянно проживающее и посещающее ДДУ в соответствующих
районах, а также взрослое население (родители детей) в количестве 36 человек.
Забор материала для ПЦР проводился методом взятия мазков со слизистой оболочки ротоглотки. Затем выделяли ДНК с помощью сорбентного метода, в основе которого лежит разрушение клеток с дальнейшей сорбцией нуклеиновых кислот на сорбент.
Для исследования полиморфных вариантов в изучаемых генах применяли методику ПЦР, в основе чего – реакция амплификации и детекция продуктов этой реакции в режиме реального времени с помощью флюоресцентных меток, которыми предварительно помечают используемые для реакции амплификации праймеры. Для одновременной детекции нескольких продуктов реакции применяют разные флюоресцентные метки и зонды (мультиплексная ПЦР). В качестве праймеров использовали участок ДНК генов CYP1A1, CPOX, VEGF, eNO-синтаза, SULT1A1. Для определения генотипа человека применяли метод аллельной дискриминации, когда различия между гетерозиготами, гомозиготами дикого и минорного вариантов устанавливали по различиям в протекании реакций амплификации соответствующих праймеров.
Обработка данных по генотипированию проводилась с использованием унифицированной программы «Ген Эксперт». Данная программа служит для расчета статистических параметров для исследований «случай – контроль», использующих SNP (диагностику однонуклеотидных полиморфизмов). Применялись статистические методы для описания равновесия частот генотипов и аллелей генов по равновесию Харди-Вайнберга.
Результаты и их обсуждение. Поведен анализ особенностей однонуклеотидных полиморфизмов у проживающего в условиях комбинированной многофакторной химической экспозиции техногенными факторами взрослого населения и закрепления измененного генотипа у детей, также живущих на данной территории (таблица).
Установлено, что полиморфизм гена детоксикации CYP1A1 отличается преимущественными негативными отклонения у детей основной группы, тогда как гетерозиготный вариант генотипа CPOX характерен для взрослых основной группы, закрепляясь по наследству в виде патологической гомозиготы на уровне, превышающем аналогичную распротраненность генотипа у взрослых в 3 раза. Повышенная распространенность гетезиготного генотипа гена
Сравнительный полиморфизм генов у детей и их родителей в условиях экспонирования химическими техногенными факторами
Установленные генетические ассоциации указывают на наличие негативной генетической селекции большинства анализируемых генов, чему способствует присутствие в атмо-
сферном фоздухе формальдегида, фенола, бенз(а)пирена, так как для контрольной группы подобные ассоциации не характерны.
Выводы. Таким образом, проведенная сравнительная оценка результатов иммунодиагностики и анализа полиморфизма генов детей, экспонированных техногенными загрязнителями, с генотипами их родителей позволила выявить особенности генетического полиморфизма генов детоксикации CYP1A1, CPOX, SULT1A1, а также аллельность иммунокомпетентных генов и генов, характеризующих состояние эндотелия сосудов (VEGF и eNOS) у детей и их родителей. Представленные данные свидетельствуют о генетической фиксации у детей существующих полиморфизмов родителей и росте распространенности мутантных аллелей генов эндотелиального фактора роста и эндотелиальной NO-синтазы в условиях воздействия химических факторов риска (формальдегид, фенол, бенз(а)пирен).
Список литературы Характеристика генотипов детей и взрослых, проживающих в условиях воздействия химических факторов риска
- Долгих О.В., Предеина Р.А., Дианова Д.Г. Экспериментальная оценка влияния фенолов на иммунорегуляцию EX VIVO//Анализ риска здоровью. -2014. -№ 1. -С. 83-87.
- Зайцева Н.В., Дианова Д.Г., Долгих О.В. Особенности апоптоза у детей при хроническом аэрогенном воздействии фенола//Фундаментальные исследования. -2014. -№ 2. -С. 56-59.
- Измеров Н.Ф. Профессиональный отбор в медицине труда//Медицина труда и промышленная экология. -2006. -№ 3. -С. 1-5.
- Иммунологические и генетические маркеры внешнесредовой экспозиции стронцием/К.Г. Горшкова, О.А. Бубнова, Е.Д. Маерова, О.В. Долгих//Санитарный врач. -2014. -№ 3. -С. 72-74.
- Особенности генетического полиморфизма у женщин с угрозой невынашивания в условиях хронической аэрогенной экспозиции фенолами/О.В. Долгих, А.В. Кривцов, О.А. Бубнова, В.Б. Алексеев//Анализ риска здоровью. -2013. -№ 4. -С. 77-81.
- Патогенетические закономерности каскадного механизма развития хронических гастродуоденальных заболеваний у детей, обусловленных потреблением питьевой воды ненадлежащего качества по содержанию продуктов гиперхлорирования и марганца/О.Ю. Устинова, К.П. Лужецкий, О.А. Маклакова, М.А. Землянова, О.В. Долгих, Т.С. Уланова//Анализ риска здоровью. -2014. -№ 3. -С. 61-70.
- Approaches to the evaluation of chemical-induced immunotoxicity/K. Krzystyniak //Environ Health Perspect. -1995. -Vol. 103, suppl. 9. -P. 17-22.
- Effects of resveratrol on human immune cell function/R. Falchetti //Life Sci. -2001. -Vol. 70, № 1. -Р. 81-96.
- Immunotoxicilogy: suppressive and stimulatory effects of drugs and environmental chemicals on the immune system/E. Gleichmann //Arch. Toxicology. -1989. -№ 63. -P. 257-273.
- Influence of air pollution on humoral immune response/R. Stiller-Winkler //J. Clin. Epidemiol. -1996. -Vol. 49 (5). -P. 527-534.
- Xenobiotic-metabolizing enzymes in human respiratory nasal mucosa/P.G. Gervasi, V. Longo, F. Naldi, G. Panattoni, F. Ursino//Biochem Pharmacol. -1991. -Vol. 41. -P. 177-184.
- Zaitseva N.V., Dianova D.G., Dolgykh O.V. Effects of cellular immunity in conditions of surplus supply of strontium with consumed water//European journal of natural history. -2014. -№ 1. -С. 7-8.