Характеристика структуры печени животных и ее изменения под влиянием ферментного препарата

«GIMIZIM».

Для раскрытия и управления жизненными процессами в организме животных с целью повышения их продуктивности важным условием является изучение строения печени в онтогенезе и эксперименте. Этот орган является многофункциональным и влияет на многие процессы, происходящие в организме (3). В настоящее время активно разрабатываются вопросы повышения продуктивности животных, в частности, за счет модификации рационов кормления животных и применения добавок многокомпонентных ферментных препаратов, обладающих способностью регулировать функциональную активность организма (2,4).

Целью исследований являлось изучение морфофункционального состояния печени свиней после введения в основной рацион полиферментного препарата «ГИМИЗИМ».

Материалы и методы исследований . Научно-хозяйственный опыт был проведен на боровках в учхозе ФГОУ ВПО КГАВМ, гистологические исследования в лаборатории кафедры патанатомии и гистологии ФГОУ ВПО КГАВМ. По принципу аналогов с учетом клинико-физиологического состояния, породы, возраста, пола и живой массы были сформированы две группы боровков крупной белой породы в возрасте 60 суток – интактная, получавшая лишь основной рацион, и подопытная, которой дополнительно к основному рациону вводили полиферментный препарат «ГИМИЗИМ» из расчета 1 г на кг корма, содержащего 30% неошелушенного ячменя и 20% ржи. Перед скармливанием препарат растворяли в 10 л теплой воды (40°С) из расчета 1 кг «ГИМИЗИМ» на 1000 кг подлежащего обработке зернофуража. Предварительно растворенный препарат вносили в емкость с водой и постепенно засыпали зернофураж при интенсивном перемешивании, после чего корм в течение 1-2 часов выдерживали согласно наставлению по применению. Продолжительность научнохозяйственного опыта составляла 120 суток. В конце опыта по 10 животных из каждой группы были подвергнуты убою с целью изучения морфологических показателей печени.

Исследования проводили на фоне сбалансированного кормления по основным показателям в соответствии с нормами и рационами (1) с применением гистологических, морфометрических и математических методов. Для гистологического исследования кусочки печени отбирали сразу после убоя, фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина и в спирт-формоле (9:1). Уплотнение материала, заливку в парафин и изготовление срезов проводили по общепринятой методике. Срезы толщиной 4-7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, азуром II и эозином. Морфометрические исследования структур печени проводили при помощи окуляр-микрометра МОВ-1-1,5х в 10 участках препарата. Измеряли наибольший (D 1 ) и наименьший (d 2 ) диаметры гепатоцитов, а также диаметр их ядра. По итогам дифференциации клеток вычисляли процентное соотношение активно функционирующих гепатоцитов с одним, с двумя ядрами, делящихся и апоптозных клеток, определяли величину соотношения митотического индекса (МИ) и индекса апоптоза (ИА). Полученный цифровой материал на достоверность различия сравниваемых показателей (Р < 0,05) обрабатывали методом вариационной статистики с использованием программных пакетов статистического анализа Microsoft Excel-2003 «Statistica for Windows».

Результаты исследований и их обсуждение. У интактных боровков рисунок дольчатого строения печени был хорошо выражен. Междольковая соединительная ткань у некоторых животных характеризовалась расширением толщины прослоек и отечностью. В отдельных участках, чаще периваскулярно, обнаруживались лимфоидно-макрофагальные инфильтраты. В этих участках среза печени площадь, занимаемая этим образованием имела значительные размеры. В просвете междольковой артерии триады печени наблюдали незначительное скопление форменных элементов крови или в большинстве случаев ее просвет был запустевшим. Стенка артерии характеризовалась утолщением вследствие плазматического пропитывания. В просвете междольковой вены у большинства животных отмечалось застойное полнокровие, а в стенке сосуда наблюдалось плазматическое пропитывание. В ряде триад в междольковой вене отмечали также случаи слабого кровенаполнения. В поддольковой вене у отдельных боровков в просвете сосуда выявляли организацию и канализацию тромбов. Стенка междолькового желчного выводного протока была образована однослойным эпителием, а в просвете отмечался секрет с примесью слущенных клеток. Дольки печени имели неправильную полигональную форму и отличались варьирующими размерами. В центролобулярных участках долек направление печеночных балок было сохранено, а на периферии отмечалось нарушение балочной структуры, где гепатоциты залегали компактными группами, а балки переплетались между собой. Синусоиды, особенно в центролобулярных участках, были расширенными и содержали форменные элементы крови. Центральная вена в дольках была кровенаполненной. В некоторых дольках вены были расширены и полнокровны. Нарушение гемоциркуляции в центролобулярной области долек, затрагивающее центральную вену и прилегающие участки синусоидов, сопровождалось кровоизлияниями и некрозом гепатоцитов. Гепатоциты имели одно, реже два округлых ядра. Диаметр D1 составлял 17,82±0,41 мкм, d2 – 14,62±0,39 мкм. Большинство гепатоцитов являлись одноядерными клетками. Диаметр ядра в таких клетках равнялся 7,95±0,13 мкм. Количество двуядерных гепатоцитов в дольках составляло 3,83±0,47%. Выявляемые в таких клетках ядра отличались несколько меньшими размерами, чем таковые в одноядерных гепатоцитах. Как одноядерные, так и двуядерные гепатоциты имели ядра, гетерохроматин в которых располагался маргинально. Плотные, интенсивно окрашивающиеся ядрышки в количестве 1-2 чаще всего находились вблизи кариолеммы. Цитоплазма имела светлую окраску и содержала мелкую зернистость, что снижало прозрачность цитоплазмы, во многих же гепатоцитах эта часть клетки характеризовалась набуханием. Среди гепатоцитов выявляли как делящиеся, так и апоптозные клетки, а их соотношение (МИ/ИА) составляло 0,61±0,08. Так, функционирующих гепатоцитов с одним ядром выявлялось 77,68 ±1,40%, с двумя ядрами – 3,83±0,47, делящихся – 6,83±0,83, апоптозных – 11,66 ± 1,17%. Таким образом, большинство гепатоцитов в дольках печени были представлены одноядерными клетками, а количество двуядерных гепатоцитов было в 20 раз меньшим. Количество апоптозных гепатоцитов превышало численность делящихся клеток, что свидетельствует о превалировании дегенеративного процесса в паренхиме органа.

Печень у боровков подопытной группы также имела выраженное дольчатое строение. Дольки характеризовались разнообразной формой и более крупными размерами, чем у интактных животных. Видимых изменений в стенке артерий и вен триады не наблюдали, в просвете междольковой вены отмечали наличие умеренного количества форменных элементов крови. В отличие от интактных животных в междольковой соединительной ткани подопытных боровков лимфоидно-макрофагальные инфильтраты не выявлялись, так же как и не наблюдали мы в этих участках органа ее отечности. Радиальное направление балок было хорошо выражено как в центре, так и на периферии долек. Синусоиды имели незначительные просветы, а их расширения визуально не выявлялись. Просветы синусоидов были свободны от форменных элементов крови, лишь в отдельных участках долек наблюдались немногочисленные клетки. Центральная вена в дольках была умеренно кровенаполнена, а в ее просвете содержалось незначительное скопление форменных элементов крови. Среди гепатоцитов выявляли как одноядерные, так и двуядерные клетки. В большинстве гепатоцитов цитоплазма имела однородный вид, границы клеток визуально определялись. Гепатоциты в дольках печени были более крупными, чем у интактных боровков. Диаметр D₁ составлял 19,92±0,45, а d 2 – 15,25±0,28 мкм. Ядро в клетках имело округлую форму, а его диаметр составлял 8,27 ±0,13 мкм. Плотные, базофильно окрашивающиеся ядрышки чаще располагались не эксцентрично вблизи кариолеммы, как в ядрах гепатоцитов интактных животных, а в центральной области ядра. В гепатоцитах, имеющих два ядра, каждое из них имело меньший диаметр, чем в одноядерных гепатоцитах. Одноядерные гепатоциты в процентном отношении значительно преобладали (80,33±1,33%), как и у интактных боровков (77,67±1,40%). Двуядерные гепатоциты составляли лишь 6,50± 0,42%, но их численность, при сравнении с таковой в дольках печени интактных боровков, характеризовалась возрастанием более чем в 1.5 раза. Количество одноядерных гепатоцитов более чем в 12 раз превышало численность двуядерных. Количество делящихся и апоптозных гепатоцитов соответственно составляло 6,16± 0,94 и 7,01± 0,63% (Р< 0,01). Отношение МИ/ИА (0,86±0,08) характеризовало более выраженный морфофункциональный статус гепатоцитов в дольках печени подопытных боровков. При этом изменения интенсивности митотического процесса гепатоцитов в печени подопытных боровков, при сравнении с таковым у интактных животных, статистически достоверным не являлось (Р> 0,05). Количество апоптозных гепатоцитов у подопытных животных, по сравнению с интактными, было значительно меньшим, а именно, более чем в 1,5 раза (Р < 0,01).

Заключение. Таким образом, у подопытных боровков под влиянием полиферментного препарата «ГИМИЗИМ» в печени увеличиваются размеры долек, они становятся более крупными, чем у интактных боровков, происходит уменьшение ширины междольковых прослоек, прежде всего, за счет нормализации строения их соединительной ткани. Наиболее существенные изменения у подопытных боровков связаны с улучшением кровотока, так как у интактных животных отмечаются значительные изменения в системе притока, циркуляции в дольках и оттока крови из них. Выявляемое утолщение стенок сосудов вследствие их плазматического пропитывания, застойное полнокровие междольковых и центральных вен, расширение синусоидов в дольках, формирование и утолщение базальной мембраны в синусоидах вызывает нарушение гемоциркуляции в дольках, особенно в центролобулярных участках, что приводит к кровоизлияниям и некрозу гепатоцитов. Наиболее значимые изменения в системе оттока крови из долек печени у интактных боровков связаны с образованием тромбов в просвете поддольковых вен. Эти сосудистые нарушения, отмеченные у интактных боровков, в результате применения препарата «ГИМИЗИМ» удается профилактировать, а процесс циркуляции крови нормализовать. Нарушение циркуляции крови у интактных свиней способствует развитию зернистой дистрофии гепатоцитов, признаки которой в клетках проявляются в виде изменения прозрачности и набухания цитоплазмы, наличия зернистости.

ЛИТЕРАТУРА. 1. Калашников А.П. Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных: справ. пособие/ под ред. А.П. Калашникова, В.И. Фисинина, В.В. Щеглова и др. – М., 2003. – 200 с. 2. Кузнецов С.Г. Ферментные препараты в кормлении свиней/ С.Г. Кузнецов, В.Д. Омельченко, А.С. Кузнецов//Зоотехния, 2000. – №10. – 282 с. 4. 3. Уша Б.В. Ветеринарная гепатология/ Б.В. Уша. – М.: Колос, 1979. – 263 с. 4. Энговатов В. Новый фермент для молодняка свиней/ В. Энговатов, Р. Балобаев, В. Гейнель// Свиноводство, 2006. – №2. – С.17-19.

ХАРАКТЕРИСТИКА СТРУКТУРЫ ПЕЧЕНИ ЖИВОТНЫХ И ЕЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПОД ВЛИЯНИЕМ ФЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА

Хамитова З.И., Усенко В.И., Муллахметова Р.Р.

Резюме

Введение в основной рацион молодняка свиней ферментного препарата «ГИМИЗИМ» оказывает положительное влияние на печень животных и профилактирует развитие патологического процесса, связанного с нарушением гемодинамики органа, проявляющимся застойным полнокровием вен, плазматическим пропитыванием стенок сосудов и расширением в дольках синусоидов, что приводит к кровоизлияниям, зернистой дистрофии и некрозу гепатоцитов, способствует развитию периваскулярных лимфоидно-макрофагальных инфильтратов.

CHARACTERISTICS OF ANIMALS LIVER STRUCTURE AND ITS CHANGES UNDER THE INFLUENCE OF THE ENZYME PREPARATION

Hamitova Z.I., Usenko V.I., Mullakhmetova R.R.