Иммуногенетическая характеристика доноров гемопоэтических стволовых клеток северо-западного региона России

Для проведения трансплантаций гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК) необходим источник этих клеток, которым, как правило, являются доноры-родственники больного или добровольные доноры с заранее определенными генетическими характеристиками (HLA-фенотипом), объединенные в донорский регистр. Безусловно, лучшим донором гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) является идентичный сиблинг, однако только для 10–20 % больных, нуждающихся в проведении ТГСК, удается подобрать гистосовместимого родственного донора, поэтому постоянное расширение и модернизация регистра добровольных доноров ГСК с установленным HLA-фенотипом является актуальной задачей. Предпочтительным контингентом для расширения регистра являются доноры крови или плазмы: эти люди психологически готовы к донорству, не имеют противопоказаний для дачи гемо- поэтических клеток, и очень важно, что у учреждений службы крови с ними налажена надежная связь.

Цель исследования. Изучение особенностей распределения генов главного комплекса гистосовместимости у доноров гемопоэтических стволовых клеток Северо-западного региона России, включенных в состав регистра в 2014– 2015 годах.

Материал и методы. Проведен анализ результатов иммуногенетического обследования 1573 потенциальных доноров ГСК, включенных в состав регистра в 2014–2015 годах. Среди них мужчин — 864 (54,9 %), женщин — 709 (45,1 %). Донорами ГСК являлись доноры крови г. Санкт-Петербурга (90 %), обследование которых проводилось в рамках выполнения государственного задания, или потенциальные родственные доноры больных онкогематологическими заболе- ваниями из числа жителей Санкт-Петербурга, проходивших лечение в гематологической клинике РосНИИГТ ФМБА России (10 %). У всех потенциальных доноров получено информированное согласие на проведение иммуноге-нетического обследования и внесения личных данных в регистр. Все потенциальные доноры ГСК являлись жителями Северо-западного региона России. Иммуногенетическое обследование (HLA-типирование) проводилось в соответствии с международными стандартами Европейской федерации иммуногенетики (EFI) с использованием молекулярно-генетических методов типи-рования. Геномную ДНК выделяли из ядросодержащих клеток периферической крови с использованием набора реагентов DNA BOX 500 (Protrans). Конечная концентрация выделенной ДНК составляла 25–35 нг/мкл. Нормативный диапазон соотношения оптических плотностей — 1,6–1,8. Определение групп аллелей НLА-генов локусов A, B, DRB1 осуществлялось с помощью полимеразной цепной реакции с сиквенс-спец-ифичными праймерами (PCR-SSP) производства “Protrans” (Германия) или с помощью полимеразной цепной реакции с олигонуклеотидными сиквенс-специфичными пробами (PCR-SSOP) производства BAG HEALTH CARE (Германия). Статистическую обработку результатов выполняли с помощью методов популяционной генетики с использованием программ: Microsatellite Tools for Excel.

Результаты. Установлено, что у потенциальных доноров ГСК Северо-западного региона России самыми частыми группами аллелей локуса

HLA-А являются A*02 (51,7 %), A*03 (27,2 %), A*01 (21,6 %) A*24 (19,7 %), менее распространены — A*11 (10,3 %), A*25(9,4 %), A*26 (8,98 %). Наиболее редкими группами аллелей были А*66 (1,2 %), А*69 (0,2 %), А*36 (0,07 %). Группы аллелей A*34, A*43, A*74, A*80, в когорте обследованных доноров не выявлены. В локусе HLA-В чаще всего определялись следующие группы аллелей: В*07 (25,5 %), В*35 (20,6 %), В*44 (18,3 %), В*18 (13,5 %), несколько реже выявлялись В*08 (12,2 %), В*15 (12,1 %), В*13 (11,83 %). %). Наиболее редкими группами аллелей были В*53, В*54, В*59, В*67, частота которых составила по 0,1 %. Группы аллелей В*73, В*78, В*81, В*82, В*83 не выявлены. В локусе HLA-DRB1 выявлены все из возможных 13 групп аллелей; наиболее часто встречающимися были DRB1*15 (27,9 %), DRB1*07 (25,3 %), DRB1*13 (24,6 %), DRB1*01 (23,3 %), реже всего определялись DRB1*10 (1,76 %) и DRB1*14 (3,11 %). Полученные результаты иммуногенетического обследования свидетельствуют о выраженном генетическом разнообразии доноров ГСК в Северо-западном регионе России.

Выводы. Выявленные иммуногенетические особенности когорты доноров ГСК, состоящей более чем из полутора тысяч индивидуумов, позволят прогнозировать вероятность нахождения донора для конкретного больного. Информация о возможности обнаружения полностью совместимого донора даст возможность гематологам обоснованно выбирать тактику лечения, или рассматривать вариант трансплантации от частично совместимого донора.