Иммуногенетические параметры у детей с разными клиническими формами атопического дерматита

Атопический дерматит является самым распространённым хроническим воспалительным заболеванием кожи и самым ранним проявлением аллергии в детском возрасте [6-8]. В развитии атопического дерматита главная роль принадлежит эндогенным факторам – наследственной предрасположенности, атопии, гиперреактивности кожи [1, 4]. Реализации наследственной предрасположенности к атопическому дерматиту способствуют воздействия разных факторов внешней среды. Генетическая предрасположенность к формированию атопического дерматита подтверждается наличием ассоциативной связи заболевания с антигенами главного комплекса гистосовместимости [2-5, 9]. Однако идентификация антигенов главного комплекса гистосовместимости (антигены HLA-комплекса) у детей с атопическим дерматитом проводилась, как правило, без учёта клинических форм заболевания, которые отличаются друг от друга рядом морфологических и клинических признаков.

Цель работы: изучить особенности распределения антигенов HLA-комплекса у детей с разными клиническими формами атопического дерматита.

Материал и методы исследования. Под наблюдением находилось 128 детей в возрасте от 8 месяцев до 15 лет, страдающих атопическим дерматитом. Наблюдаемые пациенты были подразделены на 3 группы в зависимости от клинической формы заболевания в соответствии с критериями, представленными в Научно-практической

программе «Атопический дерматит у детей: диагностика, лечение и профилактика» (Москва, 2000). Первую группу (n=76) составили больные с младенческой формой атопического дерматита (возраст пациентов от 8 месяцев до 3 лет), вторую группу (n=32) – больные с детской формой атопического дерматита (возраст пациентов 5-10 лет), третью группу (n=20) – больные с подростковой формой атопического дерматита (возраст пациентов 12-15 лет). У наблюдаемых детей был диагностирован распространённый среднетяжёлый или тяжёлый атопический дерматит (АД).

Серологическое исследование по антигенам HLA I класса выполняли у больных атопическим дерматитом в стандартном микролимфоцитоток-сическом тесте (Terasaki P. с соавт., 1970) с помощью гистотипирующих панелей HLA-A и HLA-B (ЗАО «Гисанс», г. Санкт-Петербург), которые позволяют идентифицировать 19 антигенов А-локуса и 38 антигенов В-локуса. Лимфоциты для постановки микролимфоцитотоксической пробы выделяли из гепаринизированной крови методом градиентного центрифугирования с применением раствора фиколл-верографина; пробу выполняли в микропланшетах Терасаки. Молекулярное типи-рование HLA-генов DRB1 и DQB1 (антигены HLA II класса) проводили у больных атопическим дерматитом методом полимеразной цепной реакции (Алекссев Л.П. с соавт., 1997; «Поиск неродственного донора для трансплантации гемопоэтических стволовых клеток». Пособие для врачей. М., 2002) с набором сиквенс-специ-фических праймеров (НПФ «ДНК-Технология», г. Москва), который позволяет выявлять 14 аллелей гена DRB1 и 12 аллелей гена DQB1. ДНК выделяли из моно-нуклеаров крови путём трёхкратной обработки лизирующим буфером и цетрифугированием; выделенную ДНК амплифицировали в полимеразной цепной реакции. Расчёт иммуногенетических параметров у больных атопическим дерматитом осуществляли с помощью формул, принятых в популяционной генетике. При этом определяли частоту встречаемости HLA-антигенов, критерий согласия ( χ ²), коэффициент достоверности различий

Стьюдента (р), критерий относительного риска (RR), этиологическую фракцию (EF), характеризующую силу положительной HLA-ассоциации, и превентивную фракцию (PF), характеризующую силу отрицательной HLA-ассоциации. Математическую обработку результатов типирования HLA-антигенов у больных атопическим дерматитом выполняли в персональном компьютере с использованием специальной программы, составленной сотрудниками лаборатории иммуногематологии Кировского НИИ гематологии и переливания крови на основании соответствующих формул. Контрольную группу составили 153 практически здоровых ребёнка.

Полученные результаты. Данные, полученные при идентификации антигенов HLA-комплекса у общей группы детей с атопическим дерматитом и у пациентов с младенческой, детской и подростковой формами заболевания, представлены в табл. 1. Исследования показали, что у общей группы детей с атопическим дерматитом констатировалось повышение частоты встречаемоcти HLA-антигенов I класса А1 и В17, а также повышение частоты встречаемости HLA-антигена II класса DRB1*04. Представительство в тканях указанных антигенов главного комплекса гистосовместимости ассоциировалось с повышением относительного риска развития атопического дерматита у детей в 2,2-2,8 раза (RR=2,2-2,8). В то же время представительство в тканях пациентов HLA-антигена II класса DQB1*07 ассоциировалось с определённой резистентностью к развитию атопического дерматита (RR = 0,2).

Таблица 1. Результаты идентификации HLA-антигенов у больныхатопическим дерматитом

При анализе распределения антигенов HLA-комплекса у больных младенческой, детской и подростковой формами атопического дерматита были получены неоднозначные результаты. У детей с младенческой формой атопического дерматита (табл. 1) была выявлена высокая частота встречаемости HLA-антигенов I класса А1, В17, В18 и HLA-антигена II класса DRB1*04. Представительство в тканях указанных антигенов главного ком- плекса гистосовместимости ассоциировалось с повышением относительного риска развития младенческой формы заболевания в 2,5-4,3 раза (RR=2,5-4,3).

У больных детской формой атопического дерматита (табл. 1) регистрировалась высокая частота встречаемости HLA-антигена I класса В15, а также высокая частота встречаемости HLA-антигенов II класса DRB1*13 и DQB1*0602-8, представительство которых в тканях ассоциировалось с повышением относительного риска развития этой формы заболевания в 3,1-4,6 раза (RR=3,1-4,6). Представительство в тканях HLA-антигенов II класса DRB1*07, DRB1*11 и DRB1*0303 ассоциировалось у пациентов с детской формой атопического дерматита с определённой резистентностью к развитию указанной формы заболевания (RR = 0,2-0,3).

У больных подростковой формой атопического дерматита кон-статировалась высокая частота встречаемости HLA-антигенов I класса В15, В16, В17 и высокая частота встречаемости HLA-антигенов II класса DRB1*13, DQB1*0602-8, что ассоциировалось с повышением относительного риска развития указанной формы заболевания в 3,1-5,3 раза (RR=3,1-5,3). В то же время представительство в тканях HLA-антигена I класса В12 и HLA-антигенов II класса DRB1*11, DQB1*303 ассоциировалось с определённой устойчивостью к развитию подростковой формы атопического дерматита (RR = 0,1-0,3).

Выводы:

• 1.    У детей, страдающих атопическим дерматитом, отмечается ассоциативная связь заболевания с иммуногенетическими параметрами, при этом у больных младенческой, детской и подростковой формами атопического дерматита регистрируется ассоциативная связь с разными антигенами главного комплекса гистосовместмости.

• 2.    В качестве иммуногенетического маркера младенческой формы атопического дерматита может служить представительство в тканях HLA-антигенов А1, В17, В18 и DRB1*04, иммуногене-тического маркера детской формы атопического дерматита – представительство в тканях HLA-антигенов В15, DRB1*13 и DQB1*0602-8, иммуно-

• генетического маркера подростковой формы атопического дерматита – представительство в тканях HLA-антигенов В15,  В16,  В17,  DRB1*13 и

  DQB1*0602-8.