Иммунологическая реактивность и состояние желудочно-кишечного тракта у коренных жителей Ненецкого автономного округа

Меньшикова Елена Александровна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории регуляторных механизмов иммунитета.

Цель исследования: изучить взаимосвязь реактивных процессов в слизистой толстого кишечника и общих иммунных реакций жителей Заполярья.

Материалы и методы исследования. В работе использованы материалы иммунологического и микробиологического обследования 68 здоровых лиц, проживающих в г. Архангельске и 111 человек Заполярья. Для характеристики иммунной системы изучали содержание в крови фенотипов лимфоцитов, характеризующих процессы активизации, дифференцировки, антителообразования и апоптоза иммунокомпетентных клеток. Содержание фенотипов лимфоцитов и субпопуляций клеток определяли иммунопероксидазной реакцией и методом проточной цитометрии c помощью аппарата Epics XL фирмы Beckman Coulter (США), используя многопараметрический анализ клеток. Определяли также концентрации сывороточных IgM, IgА, IgG, IgE и цитокинов IL-6, TNF-a, IL-10. Цитокиновый профиль определяли иммуноферментным анализом (ИФА) реактивами BioSourse Europe S.A. (США), иммуноглобулины — также в ИФА реактивами Seramun Diag-nostica GmbH (Германия) и Accu Bind (США). Этим же методом определяли содержание гастрина-17, пепсиногена I в крови с использованием набора Biochit GastroPanel (США). Иммунофер-ментный анализ оценивали с помощью фотометра

«Multiskan MS» фирмы «Labsystems» (Финляндия) при длине волны 405 нм. Изучали также микрофлору толстого кишечника, цитограмму, фагоцитоз, содержание в sIgA и сорбционную способность эпителия отделяемого слизистой кишечника. Полученные результаты обработаны с помощью пакета программ «Statistica 6.0». Данные представлены в виде средних величин и ошибок средней (M±m), достоверность различий между группами определяли по критерию t Стьюдента и с использованием непараметрических тестов. Статистическая достоверность присваивалась при р<0,05. Корреляционный анализ параметров сделан с учетом коэффициента Спирмена (r).

Результаты исследования и их обсуждение. У жителей Заполярья количество лейкоцитов в крови достоверно выше, чем у жителей г. Архангельска (соответственно 6,71±0,19 х 10⁹ и 4,89±0,15 х 10⁹ кл/л; р<0,05), преимущественно за счет содержания лимфоцитов (2,38±0,07 х 10⁹ и 1,02±0,09 х 10⁹ кл/л; р<0,05), а также эозинофилов (0,34±0,03 х 10⁹ и 0,19±0,02 х 10⁹ кл/л; р<0,01) и моноцитов (0,55±0,04 х 10⁹ и 0,40±0,03 х 10⁹ кл/л; р<0,05). Частота повышенных концентраций моноцитов у жителей Заполярья составляет 18,65±0,28%, а эозинофилов — 38,16±0,27%. Антигенпрезентирующие клетки (моноциты) инициируют механизм развития воспаления, стимулируя общие процессы лимфопролиферации с повышением содержания в крови CD10+ (0,65±0,04 х 10⁹ против 0,47±0,03 х 10⁹ кл/л; р<0,05). Частота повышенных концентраций клеток с маркером CD10+ составляет 43,24±0,33%. Активность апоптоза (CD95+) лимфоцитов повышается в соответствии с уровнем лимфопролиферации (с 0,59±0,03 х 10⁹ до 0,48±0,03 х 10⁹ кл/л). На фоне более высоких концентраций лимфоцитов у жителей НАО отмечены повышенные уровни содержания цитотоксических клеток фенотипа CD3+/CD8+ (0,55±0,03 х 10⁹ и 0,42±0,03 х 10⁹ кл/л; р<0,05); повышенные уровни которых регистрировали у 39,55±0,37%. На фоне увеличения активности клеточно-обусловленной цитотоксичности у жителей НАО выявлен дефицит Т-хелперов (CD3+/CD4+) в 74,43±0,49%; при среднем содержании их 0,47±0,02 х 10⁹ кл/л.

Очень резкие различия установлены относительно содержания в крови сывороточных иммуноглобулинов: концентрации IgM были в среднем выше в 2,4 раза (1519,70±88,11 против 634,83±6,74 мкг/мл; р<0,01), и IgE- в 1,7 раза (118,07±25,34 и 68,18±6,55 ME/мл; р<0,01). Высокому уровню содержания реагинов соответствует более высокая концентрация клеток с маркером CD23 (0,70±0,02 х 10⁹ против 0,41±0,03 х 10⁹ кл/л; р<0,05). Частота повышенных концентраций CD23+ отмечена в 88,69±0,62% случаев. Наблюдаются также более значительные уровни содержания натуральных киллеров CD3+/CD16+56+ (0,51±0,03 и 0,38±0,03 х 10⁹ кл/л; р<0,05). Концентрации и провоспалитель-ных цитокинов соответствовали физиологическим уровням: ФНО-а (8,51±0,80 пг/мл), IL-6 (10,51±1,41 пг/мл).

Для жителей НАО характерны более высокие концентрации сывороточных IgА (4065,35±203,3 против 785±4,91 мкг/мл); в 49,44±0,75% выявлено увеличение сывороточного IgА относительно физиологического содержания. Наряду с этим отмечено значительное снижение концентраций sIgA в отделяемом слизистой кишечника (0,56±0,06 против 1,10±0,02 г/л; р<0,05). Низкий уровень секреторного IgA может допустить проникновение антигена к плазматическим клеткам подслизистого слоя, которые продуцируют IgE [1].

Местные иммунные реакции в отделяемом слизистых кишечника у жителей Заполярья и г. Архангельска отличаются низким уровнем фагоцитарной активности (45,68±1,06 и 42,85±0,94%), а также снижением сорбционной способности эпителия (59,12±5,53 и 43,39±4,77 бактерий на клетку). У жителей Заполярья установлены более высокие концентрации циркулирующих иммунных комплексов (3,54±0,09 против 2,78±0,05 г/л; р<0,05); уровни ЦИК возрастают при условии избыточности антигена, т.е. при недостаточной утилизации микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности, на фоне дефицита sIg A (0,56±0,06 г/л; r=-0.62; р=0,03). Цитологическая структура клеток отделяемого слизистой кишечника у жителей НАО характеризуется повышением содержания нейтрофильных лейкоцитов и плазматических клеток (р<0,01-0,001). Так содержание нейтрофилов выше в 1,8 раза (18,44±1,08 и 10,50±1,88%), относительный уровень плазматических клеток — соответственно в 1,6 раза (18,03±0,13 и 11,04±0,83%).

Содержание облигатной микрофлоры (Lacto —, Bifidbacterea, и E. coli) у жителей Заполярья на 2-4 порядка ниже; дефицит E.coli наблюдается практически у всех обследуемых лиц; дефицит молочнокислых бактерий регистрируется в 85,29±1,36% случаев; недостаточность содержания бактерий семейства Bifidobacterea наблюдается в 76,54±1,06%. На фоне недостаточности содержания указанных микроорганизмов регистрируется резкое (в 100 раз) повышение концентраций гноеродных кокков и бацилл. Однако основной причиной резко выраженных иммунологических реакций и местных, и общих у ненцев являются паразитарное инфицирование, которое установлено в 47,05%.

Выводы: реактивные изменения иммунной системы у коренных жителей Заполярья обуславливаются не только экстремальными климатическими условиями жизни, но и антигенным воздействием инфекционного характера, преимущественно паразитарного происхождения. Активизация клеточно-опосредованной и антителозависимой реагиновой цитотоксичности обуславливает пролиферацию лимфоцитов, моноцитов и эозинофилов. Дефицит Т-хелперов, распространенный среди жителей Заполярья, не взаимосвязан с патологией ЖКТ и инфицированием и, вероятнее всего, формируется под влиянием неблагоприятных климатических условий.