Интенсивность процессов перекисного окисления липидов при иммобилизационном стрессе

Стресс сопровождается изменением процессов свободно-радикального окисления (СРО) в плазме. В работе исследовалась интенсивность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) при кратковременном иммобилизаци-онном стрессе. Выявлено, что данный вид стресса приводит к снижению интенсивности процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в плазме крови за счет повышения активности ферментов «аварийной защиты» антиокисли-тельной системы (АОС) - супероксиддисмутазы и каталазы. Следовательно, начальный этап протекания иммобилизационного стресса сопровождается не активацией, а, наоборот, ингибированием процессов СРО в плазме.

Любая стрессорная реакция организма сопровождается кратковременным подъемом уровня активных форм кислорода (АФК) и развитием окислительного стресса, что является результатом развертывания адаптационного процесса [4, 8]. Катехоламины, опосредованно через их влияние на метаболизм арахидоновой кислоты, усиливают генерацию О₂~, что способствует неконтролируемому росту АФК. Основной мишенью АФК является клеточная мембрана, так как они легче всего реагируют с ненасыщенными жирными кислотами мембранных фосфолипидов и аккумулированными жирными кислотами, т.е. инициируют процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ) [5]. По данным литературы сложилось мнение, что все виды стресса сопровождаются однонаправленными изменениями активности процессов свободнорадикального окисления (СРО). Также нет данных о характере развития этих процессов в плазме в начальные сроки стрессорного воздействия. Все вышеизложенное и определило цель нашей работы: изучить интенсивность ПОЛ в плазме при кратковременном иммобилизационном стрессе.

Материалы и методы исследования. Исследование проводилось на 29 белых беспородных крысах. В исследовании использовалась модель иммобилизационного стресса продолжительностью 5 минут [4]. Продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ) определяли спектрофотометрическим методом в изопропанольной фракции по методу [3].

Определяли относительное содержание продуктов ПОЛ: общих продуктов при длине волны 220 нм; диеновых конъюгатов (ДК) при длине волны 233 нм; карбонильных (ТК) при длине волны 278 нм; флюоресцирующих (оснований Шиффа — ШО) при длине волны 400 нм. Уровень малонового диальдегида (МДА) определяли в цветной реакции с тиобарбитуровой кислотой [7].

Общую антиокислительную активность (АОА) оценивали по степени подавления липопе-роксидации in vitro в присутствии суспензии мем бран эритроцитов [10]. Активность супероксиддисмутазы (СОД) оценивали в реакции восстановления нитросинего тетразолия [12]. Активность каталазы определяли в цветной реакции с молибдатом аммония [8]. Активность глюта-тионредуктазы оценивали по способности окислять НАДИ при длине волны 340 нм [1]. Активность церулоплазмина (ЦП) определяли по методу Тэна Э.В. (1981).

Результаты исследования и их обсуждение. Иммобилизационный стресс приводит к изменению содержания продуктов ПОЛ в плазме у крыс: концентрация первичных продуктов ПОЛ по сравнению с контролем увеличилась (р < 0,01); однако концентрация промежуточных, конечных продуктов ПОЛ и МДА - уменьшилась (р < 0,001; р < 0,01 и р < 0,05 соответственно) (табл. 1).

Изменения в системе ПОЛ, в силу своей взаимосвязи, не могут проходить без изменений активности АОС. В результате воздействия иммобилизации было выявлено повышение активности СОД и глютатионредуктазы (р < 0,01 соответственно) и еще более значительное - каталазы (р < 0,001). Активность ЦП и общая антиокислитель-ная активность осталась неизменной (табл. 2).

Таким образом, в результате действия кратковременного острого иммобилизационного стресса выявлено снижение интенсивности процессов ПОЛ. Повышение содержания первичных продуктов ПОЛ компенсируется снижением промежуточных и конечных продуктов, что, видимо, является результатом повышенной активности первых «аварийных» ферментов АОС - СОД каталазы, а также и глютатионредуктазы. Вспышка активности АОС в ответ на интенсификацию процессов свободно-радикального окисления за счет истощения ресурсов антиоксидантных ферментных систем достаточно быстро сменяется обратным процессом, что и регистрируется большинством исследователей. Поэтому в литературе описывается, в основном, повышение интенсивности процессов ПОЛ в ответ на действие стрессорного фактора [5].

Сурина-Марышева Е.Ф.

Интенсивность процессов перекисного окисления липидов при иммобилизационном стрессе

Таблица 1

Содержание продуктов ПОЛ в плазме у крыс при иммобилизационном стрессе

Таблица 2

Показатели АОС и ее ферментов в плазме у крыс при иммобилизационном стрессе

Результаты нашего эксперимента согласуются с данными Девяткиной Т.А. и др. (2000), полученными не в плазме, а в сыворотке крови. Таким образом, динамика протекания острого стресса характеризуется чередованием периодов повышения интенсивности процессов ПОЛ с периодами их снижения. Кратковременный, 5-минутный иммобилизационный стресс вызывает не активацию, а наоборот, ингибирование процессов ПОЛ.