Использование генов, кодирующих белки LTR, P24, GP51, POL в качестве ДНК-маркеров для индикации возбудителя лейкоза крупного рогатого скота в ПЦР-РВ
Автор: Сафина Р.Ф.
Статья в выпуске: 2 т.242, 2020 года.
Бесплатный доступ
Целью представленной работы было повышение чувствительности и специфичности метода ПЦР для диагностики лейкоза крупного рогатого скота. Для осуществления данной цели были разработаны и синтезированы комбинации праймеров и зондов, специфичные к генам ВЛ КРС, кодирующим капсидный белок p24, гликопротеин gp51, длинный концевой повтор LTR, структурный белок pol. Проведен анализ эффективности прохождения ПЦР при использовании разработанных комбинаций олигонуклеотидных затравок для ПЦР-РВ. В результате исследования установлено, что все разработанные комбинации праймеров и зондов позволяют с помощью метода ПЦР-РВ идентифицировать провирусную ДНК ВЛ КРС в образцах крови. Наиболее эффективными оказались праймеры и зонд к участку LTR генома вируса лейкоза КРС, при их использовании ПЦР стартует раньше по сравнению с другими использованными комбинациями олигонуклеотидов (p24, gp51, pol), что значительно повышает чувствительность метода. Данное исследование служит одним из этапов создания наиболее эффективной экспресс тест-системы для точного обнаружения возбудителя лейкоза в скотоводческих хозяйствах России.
Полимеразная цепная реакция (пцр), энзоотический лейкоз
Короткий адрес: https://sciup.org/142224219
IDR: 142224219 | DOI: 10.31588/2413-4201-1883-242-2-153-158
Список литературы Использование генов, кодирующих белки LTR, P24, GP51, POL в качестве ДНК-маркеров для индикации возбудителя лейкоза крупного рогатого скота в ПЦР-РВ
- Авилов, В.М. Проблемы оздоровления крупного рогатого скота от лейкоза / В.М. Авилов, В.М. Нахмансон // Ветеринария. - Казань - 1995. - № 11. - С. 3-6.
- Галиуллин, А.К. Ветеринарно-санитарные мероприятия в стационарно неблагополучном сибиреязвенном пункте /А.К. Галиуллин // Ветеринарный врач. - Казань. -2006. - № 2. - С.18-19.
- Гулюкин, М.И. Обзор эпизоотической ситуации по лейкозу крупного рогатого скота / И.М. Гулюкин, Г.А. Симонян, Н.А. Ажиркова // Ветеринарная жизнь. - 2005. - № 6. - С. 38.
- Крикун, В.А. Эффективность серологического метода диагностики при проведении оздоровительных мероприятий в неблагополучных хозяйствах по лейкозу крупного рогатого скота / В.А. Крикун, В.П. Шишков, Б.З. Иткин [и др.] // Иммунология и иммунотерапия лейкозов человека и животных: Тез. докл. Всесоюзн. конф. - Ташкент. - 1984. - C. 155.
- Сюрин, В.Н. Вирусные болезни животных / В.Н. Сюрин, А.Я. Самуйленко, Б.В. Соловьев Б.В. [и др.]. - М., 1998. - 928 с.
- Фаизов, Т.Х. Геноидентификация B.anthracis и почвенных сапрофитов методом ПЦР/ Т.Х. Фаизов, А.К. Галиуллин, А.М. Алимов // Ветеринария. - Казань. - 1995. - № 5 - С. 8-12.
- Burny, A. Bovine leukemia: facts and hypothesis derived from the study of an infectious cancer / Burny A., Cleuter Y., Kettmann R. [et al.] // Cancer Surv. - 1987. - № 6. - P.139-159.
- Kettmann, R. Leukemogenesis by bovine leukemia virus: proviral DNA integration and lack of RNA expression of viral long terminal repeat and 3′ proximate cellular sequences / Kettmann R., Deschamps J., Cleuter Y. [et al.] // Proc Natl Acad Sci USA. - 1982. - № 79. - P. 2465-2469.
- DOI: 10.1073/pnas.79.8.2465
- Mammerickx, M. Genomic integration of bovine leukemia provirus: comparison of persistent lymphocytosis with lymph node tumor from of enzootic/ Mammerickx M., Meunier-Rotival M., Bernardi G. [et al.] // Proc Natl Acad Sci USA. - 1980. - № 77. - P. 2577-2581.
- DOI: 10.1073/pnas.77.5.2577
- Pierard, V. DNA cytosine methylation in the Bovine Leukemia Virus promoter is associated with latency in a lymphoma-derived B-cell line / Pierard V., Guiguen A., Colin L. [et al.] // The Journal of Biology Chemistry. - 2010. - V. 285. - P. 1434-1449. ( ).
- DOI: 10.1074/jbc.M110.107607
- Merimi, M. Complete suppression of viral gene expression is associated with the onset and progression of lymphoid malignancy: observations in Bovine Leukemia Virus-infected sheep / Merimi M., Klener P., Szynal M. [et al.] // Retrovirology. - 2007. - № 4. - P. 51. ( ).
- DOI: 10.1186/1742-4690-4-51
- Lagarias, D.M. Transcriptional activation of bovine leukemia virus in blood cells from experimentally infected, asymptomatic sheep with latent infections / D.M. Lagarias, K. Radke // Journal of Virology. - 1989. - № 63. - P. 2099-2107.
- Radke, K. Transcription of bovine leukemia virus in peripheral blood cells obtained during early infection in vivo / K. Radke, T. Sigala, D. Grossman // Microb Pathog. - 1992. - V. 12. - P. 319-331. (.
- DOI: 10.1016/0882-4010(92)90095-6)
- Gaudray G., Gachon F., Basbous J. The complementary strand of the human T-Cell leukemia virus type 1 RNA genome encodes a bZIP transcription factor that down-regulates viral transcription / G. Gaudray, F. Gachon, J. Basbous [et al.] // The Journal of Virology. - 2002. - V. 76. - P. 12813-12822. ( ).
- DOI: 10.1128/JVI.76.24.12813-12822.2002
- Sagata, N. Comparison of the entire genomes of bovine leukemia virus and human T-cell leukemia virus and characterization of their unidentified open reading frames/ N. Sagata, T. Yasunaga, K. Ohishi [et al.] // European Molecular Biology Organization Journal. - 1984. - V. 3. - P. 3231-3237.
