Испытание иммунологической эффективности серий вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, изготовленных с использованием биомасс, полученных на различных питательных средах
Автор: Нургалиева А.Р.
Статья в выпуске: 1 т.221, 2015 года.
Бесплатный доступ
Проведено испытание иммунологической эффективности серий вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, изготовленных с использованием биомасс, полученных на различных питательных средах. Вакцина, изготовленная с использованием биомассы бактерий Moraxella bovis, полученной при глубинном культивировании в питательной среде на основе ФГМПЭМ не уступает по эффективности вакцине, полученной из биомассы моракселл, выращенной на плотной питательной среде.
Вакцина, инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота
Короткий адрес: https://sciup.org/14288462
IDR: 14288462
Текст научной статьи Испытание иммунологической эффективности серий вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, изготовленных с использованием биомасс, полученных на различных питательных средах
Массовое поражение глаз крупного рогатого скота наносит огромный экономический ущерб развитию животноводства, вызывая значительные потери как в молочной, так и в мясной промышленности вследствие снижения удоев, уменьшения прироста массы тела животных, высокой стоимости лечения заболевания (1,2). Для борьбы с этой инфекцией широкое применение получила «Ассоциированная вакцина против ИКК крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1 инактивированная гидроокисьалюминиевая», разработанная в ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» (ТУ 9384-00500492374-2007).
При существующей технологии изготовления биопрепарата культивирование вакцинного штамма бактерий Moraxella bovis проводится поверхностным методом на плотной питательной среде. Однако выращивание микроорганизмов на плотных средах по сравнению с культивированием в жидкой среде имеет определенные недостатки. В настоящее время для выращивания микроорганизмов наиболее часто применяется глубинное выращивание в жидких питательных средах с использованием биореакторов. В предыдущих исследованиях провели сравнительную оценку антигенной активности вакцин, изготовленных на плотной и жидкой питательных средах в лабораторных условиях [3].
Целью дальнейшей работы явилось изучение иммунологической эффективности серий вакцин, изготовленных с использованием биомасс, полученных на различных питательных средах.
Материал и методы. Работа выполнялась в лаборатории по изучению болезней молодняка ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ».
Технология изготовления ассоциированных инактивированных вакцин включает получение и инактивацию биомассы с максимально возможным сохранением антигенных и иммуногенных свойств отобранных штаммов[4]. Для изготовления вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота использовали запатентованный штамм «Г97-ВНИВИ» бактерий Moraxella bovis (Патент РФ на изобретение №2415353 с приоритетом от 15.09.1998г) и штамм бактерий Moraxella bovis – «ШЗ-01».
Для изучения эффективности вакцины в производственных условиях изготовили серии «Ассоциированной вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов и герпесвируса типа I», используя биомассу бактерий, полученную на плотной и жидкой питательных средах. Жидкую питательную среду для культивирования бактерий Moraxella bovis глубинно-суспензионным способом готовили согласно разработанной рецептуре питательной среды с использованием в качестве основы ферментативного гидролизата маточно-плацентарно-эмбриональной массы коров (ФГМПЭМ)[5,6].
Первоначально изучение иммуногенной активности изготовленных серий вакцин проводили на белых мышах. В опыте были сформированы 3 группы мышей: две опытные и одна контрольная. Мышей I группы иммунизировали вакциной, изготовленной из биомассы бактерий, полученной на плотной питательной среде, II группы – вакциной, изготовленной из бакмассы, полученной в питательной среде на основе ФГМПЭМ. Третья группа животных служила контролем. Двукратную подкожную вакцинацию белых мышей проводили в дозе 0,5 см3 с интервалом 14 суток. Заражение лабораторных животных осуществляли внутрибрюшинно живыми культурами бактерий Moraxella bovis (через 14 дней после каждой вакцинации) в дозе 500 млн. м.к. на одно животное.
Эффективность применения препарата в хозяйстве определяли на основании показателей заболеваемости до и после применения вакцины, а также по уровню специфических антител в сыворотке крови вакцинированных животных через 7 и 14 суток после первой и второй вакцинаций. С этой целью в хозяйстве были отобраны 3 группы телят по 60 голов в каждой. Все телята были одной породы, клинически здоровые. Животные находились в одном помещении при одинаковых условиях содержания и кормления. Животных первой группы иммунизировали ассоциированной вакциной против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, изготовленной из биомассы бактерий Moraxella bovis, полученной на плотной питательной среде; животных второй группы иммунизировали вакциной, изготовленной на основе биомассы бактерий Moraxella bovis, полученной в жидкой питательной среде. Третья группа животных служила контролем. В обеих сериях вакцины концентрация бактерий Moraxella bovis составляла 10 млрд. м.к. в 1 см3. От животных через 7, 14 суток после первой иммунизации и в те же сроки после второй иммунизации отбирали кровь для определения титров специфических антител к бактериям Moraxella bovis и герпесвирусу типа I. Определение титров антител к антигенам Moraxella bovis в пробах сыворотки проводили в лаборатории, используя «Набор препаратов для выявления антител к бактериям Moraxella bovis методом иммуноферментного анализа» согласно инструкции по его применению, к герпесвирусу типа I в реакции нейтрализации.
Результаты исследований.
Результаты исследований приведены в таблице 1.
Результаты исследования свидетельствуют о том, что вакцинированные мыши обеих групп оказались устойчивыми к контрольному заражению. Защитный эффект вакцины, изготовленной различными способами не различался и составил 80%.
Положительные результаты изучения иммунологической активности серий вакцины против ИКК на лабораторных животных явились основанием для испытания и на крупном рогатом скоте
Таблица 1 - Иммунологическая активность вакцин на белых мышах
Группа мышей |
Результаты заражения на 14 сутки после первой вакцинации |
Результаты заражения на 14 сутки после второй вакцинации |
Заражено, гол. |
Пало, гол. |
Смертность, % |
Заражено, гол. |
Пало, гол. |
Смертность, % |
|
I группа |
20 |
4 |
20 |
10 |
2 |
20 |
II группа |
20 |
4 |
20 |
10 |
2 |
20 |
контрольная |
10 |
8 |
80 |
10 |
8 |
80 |
Изучение иммуногенной активности серий ассоциированной вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота проводили в ООО «Среднее Девятово» Лаишевского района РТ, стационарно неблагополучном по инфекционному кератоконъюнктивиту крупного рогатого скота. Анализ эпизоотической ситуации по ИКК КРС показал, что в ООО «Среднеедевятово» заболеваемость телят варьировала в пределах 25-30% из общего поголовья.
Результаты исследований сывороток
Анализ полученных результатов исследований позволяет констатировать, что изготовленные серии вакцины обладают достаточно высокой антигенной активностью: титры специфических антител через 2 недели после второй вакцинации в сыворотке крови животных составляли в ИФА к бактериям Moraxella bovis в I группе животных – 13,02±0,23 log 2 , во II группе – 13,12 ±0,14 log 2 ; в РН к герпесвирусу типа I в I группе животных – 7,80±0,31 log 2 , во II группе – 7,70±0,32 log 2 .
крови вакцинированных телят представлены в таблице 2.
Таблица 2– Уровень специфических антител в сыворотке крови вакцинированных телят к антигенам бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа I (М±m, n=10)
Сроки исследования |
Титры антител к Moraxella bovis в ИФА,log 2 log 2 |
Титры антител к герпесвирусу в РН, log 2 |
||
I группа животных |
II группа животных |
I группа животных |
II группа животных |
|
Через 7 суток после первой вакцинации |
7,42±0,46 |
8,02±0,39 |
2,70±0,16 |
2,50±0,22 |
Через 14 суток после первой вакцинации |
10,52±0,38 |
11,02±0,52 |
3,60±0,23 |
3,70±0,27 |
Через 7 суток после второй вакцинации |
10,62±0,42 |
12,62±0,35 |
7,10±0,33 |
7,30±0,27 |
Через 14 суток после второй вакцинации |
13,02±0,23 |
13,12±0,14 |
7,80±0,31 |
7,70±0,32 |
Клинико-эпизоотологическим исследованием вакцинированных животных установлено, что телята обеих вакцинированных групп оказались устойчивыми к естественному заражению возбудителем ИКК крупного рогатого скота. В то же время в контрольной (не вакцинированной) группе заболело 8 телят.
Следовательно, обе серии вакцины (полученные как на плотной питательной среде, так и в жидкой) надежно защищают телят от заражения возбудителем ИКК в условиях стационарного неблагополучия по данной инфекции хозяйства. В обеих группах вакцинированных телят больных инфекционным кератоконъюнктивитом в ходе эксперимента не выявлено, тогда как в контрольной не вакцинированной группе заболели 13,3% телят.
Заключение. Обобщенный анализ клинических, эпизоотологических и серологических исследований показал, что вакцина, изготовленная с использованием биомассы бактерий Moraxella bovis полученной при глубинном культивировании в питательной среде на основе ФГМПЭМ не уступает по эффективности вакцине, полученной из биомассы моракселл, выращенной на плотной питательной среде.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Гаффаров, Х.З. Инфекционный кератоконнъюнктивит крупного рогатого скота в регионе Среднего Поволжья и Предуралья / Х.З. Гаффаров, Л.В. Валебная, Г.Н. Спиридонов // Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях: материалы Междунар. науч.- практ. конференции. – Воронеж, 2002. – С. 188-191. 2 Иванов, A.B. Этиология и патогенез инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота / А.В. Иванов, Х.З. Гаффаров, Г.Н. Спиридонов с соавт. // Ветеринарный врач. – Казань. – 2005. - №4. - С. 22-27. 3. Нургалиева А.Р. Оценка антигенной активности вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, изготовленной с использованием различных питательных сред / А.Р. Нургалиева, Н.В. Саттарова // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. – Казань, 2011. – Т.206. – С.165-169. 4. Нургалиев Ф.М. Разработка технологии изготовления ассоциированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней / Нургалиев Ф.М., Гаффаров Х.З., Госманов Р.Г.// Ученые записки КГАВМ. – Казань, 2006. –Т.183. – С.171-176. 5. Нургалиева А.Р. Оптимизация состава питательной среды для культивирования бактерий Moraxella bovis / А.Р. Нургалиева // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. – Казань, 2010. –Т.200. – С.123-125. 6. Нургалиева А.Р. Получение биомассы бактерий Moraxella bovis в жидкой питательной среде / А.Р Нургалиева, Г.Н. Спиридонов, Х.Н. Макаев, Л.В. Валебная // Ветеринария и кормление. – 2010. - №6. – С.54.
ИСПЫТАНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ СЕРИЙ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО КЕРАТОКОНЪЮНКТИВИТА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА, ИЗГОТОВЛЕННЫХ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БИОМАСС, ПОЛУЧЕННЫХ НА РАЗЛИЧНЫХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕДАХ
Нургалиева А.Р.
Резюме
Проведено испытание иммунологической эффективности серий вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, изготовленных с использованием биомасс, полученных на различных питательных средах. Вакцина, изготовленная с использованием биомассы бактерий Moraxella bovis , полученной при глубинном культивировании в питательной среде на основе ФГМПЭМ не уступает по эффективности вакцине, полученной из биомассы моракселл, выращенной на плотной питательной среде.
A TEST SERIES OF IMMUNOLOGICAL EFFECTIVENESS OF VACCINES AGAINST INFECTIOUS BOVINE KERATOCONJUNCTIVITIS PRODUCED USING BIOMASS FROM VARIOUS NUTRIENT MEDIA
Nurgalieva A.R.
Список литературы Испытание иммунологической эффективности серий вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, изготовленных с использованием биомасс, полученных на различных питательных средах
- Гаффаров, Х.З. Инфекционный кератоконнъюнктивит крупного рогатого скота в регионе Среднего Поволжья и Предуралья/Х.З. Гаффаров, Л.В. Валебная, Г.Н. Спиридонов//Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях: материалы Междунар. науч.-практ. конференции. -Воронеж, 2002. -С. 188-191
- Иванов, A.B. Этиология и патогенез инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота/А.В. Иванов, Х.З. Гаффаров, Г.Н. Спиридонов с соавт.//Ветеринарный врач. -Казань. -2005. -№4. -С. 22-27.
- Нургалиева А.Р. Оценка антигенной активности вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, изготовленной с использованием различных питательных сред/А.Р. Нургалиева, Н.В. Саттарова//Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. -Казань, 2011. -Т.206. -С.165-169.
- Нургалиев Ф.М. Разработка технологии изготовления ассоциированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней/Нургалиев Ф.М., Гаффаров Х.З., Госманов Р.Г.//Ученые записки КГАВМ. -Казань, 2006. -Т.183. -С.171-176.
- Нургалиева А.Р. Оптимизация состава питательной среды для культивирования бактерий Moraxella bovis/А.Р. Нургалиева//Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. -Казань, 2010. -Т.200. -С.123-125.
- Нургалиева А.Р. Получение биомассы бактерий Moraxella bovis в жидкой питательной среде/А.Р. Нургалиева, Г.Н. Спиридонов, Х.Н. Макаев, Л.В. Валебная//Ветеринария и кормление. -2010. -№6. -С.54.