Исследование экстрактов мяты перечной (Mentha piperita) и душицы обыкновенной (Origanum vulgare) методами гравиметрии и окислительно-восстановительного титрования

Лекарственное растительное сырье и лекарственные препараты, созданные на его основе, находят широкое применение в медицинской практике. Достоинства и недостатки таких средств описаны во многих научных публикациях. К несомненным достоинствам следует отнести возможность их применения в течение длительного времени из-за более мягкого действия на организм и достаточная эффективность в случаях, когда заболевание только начинает развиваться.

Душица обыкновенная и мята перечная относятся к семейству Яснотковые (Lamiaceae), являются ценным лекарственным растительным сырьём (ЛРС) и включены в Государственную Фармакопею. Растения обладают большим количеством биологически активных соединений и способны оказывать успокаивающее, противовирусное, антибактериальное, болеутоляющее действие, усиливают капиллярное кровообращение [1-4].

Для реализации лечебного и терапевтического эффекта применяют лекарственные препараты на основе измельченных листьев мяты и травы душицы (измельчённые листья, кусочки стеблей, соцветий, цветков и семян), а также эфирных масел этих растений. К распространённым формам использования относят настои, настойки, отвары, экстракты.

Особый интерес представляет содержание биологически активных веществ (БАВ) в растениях мяты и душицы, обуславливающих положительное действие на организм человека. К ним относят флавоноиды, фенольные кислоты, дубильные вещества, антоцианы и др. [2, 4-7].

Оценить содержание полезных веществ в растениях семейства яснотковых можно путем определения содержания экстрактивных веществ и сравнения антиокисли-тельной активности БАВ в экстрактах методом окислительно-восстановительного титрования [8]. Поскольку мята перечная и душица обыкновенная относятся к одному семейству, представляет интерес проведение ряда сравнительных исследований.

Целью настоящей работы было изучение и сравнение количества БАВ водных и водно-этанольных экстрактов душицы обыкновенной и мяты перечной.

Материалы и методы исследования, экспериментальная часть.

В качестве объектов исследования выступали препараты, реализуемые в аптечных сетях: «Мяты перечной листья» и «Душицы трава» производства АО «Крас-ногорсклекарства».

Определение количества экстрактивных веществ.

Методика №1 – определение массовой доли экстрактивных веществ в сухом веществе (однократная экстракция по ОФС.1.5.3.0006.15 ГФ XIV издания). По 1 г измельченного растительного сырья помещали в коническую колбу объёмом 250 мл, прибавляли 50 мл экстрагента (воды дистиллированной или этилового спирта 70%), закрывали пробками и взвешивали. Через 1 час колбы нагревали на водяной бане с обратным холодильником в течение 2 часов, потерю в массе восполняли экстрагентом. Содержимое колб фильтровали, пипеткой отбирали по 25,0 мл экстрактов в предварительно взвешенную фарфоровую чашку и выпаривали в сушильном шкафу при температуре 105 ˚С до прекращения изменения массы.

Методика №2 была основана на определении сухого остатка в водных и спиртовых экстрактах в соответствии с ОФС.1.4.1.0018.15 «Настои и отвары» ГФ XIV издания.

Экстракты готовили следующим образом: к 2 г сухого растительного сырья приливали по 20 мл соответствующего растворителя – дистиллированной воды, этилового спирта объёмной концентрации 70% и 95%. Соединяли колбы с обратным холодильником и нагревали на водяной бане 15 минут, затем настаивали в течение 45 минут и фильтровали.

Отбирали по 5 мл полученных экстрактов и помещали в предварительно высушенные до постоянной массы и взвешенные бюксы. Высушивали экстракты в сушильном шкафу до постоянной массы при температуре 105 ˚С.

Определение антиокислительной активности окислительновосстановительным титрованием.

Для определения антиокислительной активности экстрактов использовался метод, изложенный в патенте № 2170930 C1 (Т.В. Максимова, И.Н. Никулина, В.П. Пахомов и др.) [8]. В основе метода лежит титрование раствора перманганата калия экстрактом растительного объекта.

Экстракты готовились также по двум методикам. По методике №1 использовали соотношение массы растительного сырья к объему экстрагента 1:10. Для этого 3 г растительного сырья помещали в колбу объемом 250 мл, приливали 30 мл экстрагента и нагревали на водяной бане с обратным холодильником в течение 15 минут, а затем настаивали 45 минут и фильтровали.

В основу методики №2 приготовления экстрактов положен способ приготовления настоев, рекомендованный производителем растительного сырья и изложенный в соответствующих инструкциях на сайте производителя. Но экстрагирование проводилось не только водой, как рекомендует производитель, но и этиловым спиртом 70%. Сведения о соотношении массы сырья к объему экстрагента изложены в таблице 1.

Таблица 1. Условия приготовления экстрактов согласно инструкциям по применению.

Объект	Масса сырья и объём экстрагента	Соотношение    сырьё- экстрагент	Время настаивания, мин
Душица обыкновенная	6,0 г и 200 мл	1:33	15
Мята перечная	3,0 г и 100 мл	1:33	15

Для приготовления экстрактов по методике №2 в конические колбы помещали по 6,0 г растительного сырья и заливали соответствующим растворителем, доведённым до кипения: водой и этиловым спиртом

70%. Колбы закрывали пробками и настаивали в течение 15 минут, периодически помешивая, затем фильтровали экстракты.

Для определения антиокислительной активности микробюретку заполняли по- лученными экстрактами и проводили титрование раствора, приготовленного из перманганата калия, серной кислоты и воды [5]. Чем меньше объём экстракта был затрачен на титрование, тем выше его ан-тиокислительная активность. Количественной характеристикой, используемой при расчётах, является коэффициент В, представляющий содержание суммы БАВ восстанавливающего характера в пересчёте на кверцетин, мг/мл [5].

Обсуждение полученных результатов

При анализе водных и водно-этанольных экстрактов душицы обыкно- венной и мяты перечной методом гравиметрии было установлено, что количество извлекаемых веществ больше при использовании воды в качестве экстрагента (табл. 2 и 3). Содержание экстрактивных веществ в извлечениях душицы обыкновенной выше, чем в экстрактах мяты перечной. Также использование 70% этилового спирта способствует извлечению большего количества веществ, чем в случае использования 95% этилового спирта (табл. 3).

Таблица 2. Массовая доля экстрактивных веществ мяты перечной и душицы обыкновенной в извлечениях, приготовленных по методике №1 (однократная экстракция по ОФС.1.5.3.0006.15 ГФ XIV издания)

Экстракт	Душица обыкновенная (этанол)	Душица обыкновенная (вода)	Мята перечная (этанол)	Мята перечная (вода)
Количество экстрактивных веществ, %	14,90	19,19	13,08	16,26
Содержание влаги в ЛРС, %	9,89		10,56

Таблица 3. Содержание экстрактивных веществ в извлечениях мяты перечной и душицы обыкновенной, приготовленных по методике №2 (по ОФС.1.4.1.0018.15 «Настои и отвары» ГФ XIV издания).

Объект	Душица обыкновенная			Мята перечная
Экстрагент	Вода	Этанол (70%)	Этанол (95%)	Вода	Этанол (70%)	Этанол (95%)
Количество экстрактивных веществ, %	8,59	7,13	4,29	7,43	5,94	5,11

Результаты определения антиокисли-тельной активности экстрактов мяты перечной и душицы обыкновенной приведены в таблице 4. Извлечения, приготовленные в различных соотношениях сырьё-экстрагент, обладали схожей зависимо- стью: антиокислительная активность водных экстрактов была выше, чем в этанольных. Наибольшие значения коэффициента активности В были выявлены для душицы обыкновенной (табл. 4).

Таблица 4. Определение антиокислительной активности водных и водно-этанольных экстрактов мяты перечной и душицы обыкновенной

		Отношение массы ЛРС к объёму экстрагента
		1:10		6:200
		Объём экстракта, израсходованный на титрование	Величина активности, В, мг/мл	Объём экстракта, израсходованный на титрование	Величина активности, В, мг/мл
Душица обыкновенная	Водный	0,09±0,03	2,78	0,34±0,01	0,74
	Этанольный (70%)	0,16±0,02	1,56	0,46±0,02	0,54
Мята перечная	Водный	0,12±0,01	2,08	0,43±0,02	0,58
	Этанольный (70%)	0,20±0,02	1,25	0,62±0,01	0,40

Заключение

• 1.    Были проанализированы водные и водно-этанольные экстракты душицы обыкновенной и мяты перечной с целью определения количества экстрактивных веществ. Выявлено, что содержание экс-

• трактивных веществ выше в экстрактах душицы обыкновенной.

• 2.    В результате определения содержания экстрактивных веществ с использованием различных растворителей установле-

• трагента способствует извлечению большего количества веществ из исследуемого сырья. Применение этилового спирта 70% обеспечивает лучшее извлечение, чем 95%.

• 3.    Определено, что антиокислительная

активность водных экстрактов душицы обыкновенной и мяты перечной выше, чем этанольных. Экстракты душицы обыкновенной обладают большей суммой веществ восстанавливающего характера.

но, что применение воды в качестве экс-