Исследование лекарственных препаратов «Валидол» и «Меновазин» методом тонкослойной хроматографии

Ментол является веществом, входящим в состав многих лекарственных препаратов и биологически активных добавок. Используется ментол в производстве некоторых продуктов питания, косметических средств и средств для ухода за полостью рта, входит в состав некоторых марок сигарет. Известно несколько изомеров ментола, из которых наиболее широкое применение находит левоментол, имеющий сильный специфический запах. Брутто-формула ментола C10H20O, название вещества (1К,28,5К)-5-Метил-2-(пропан-2-ил)циклогексанол. Для практического применения это вещество получают выделением из эфирного масла мяты или путем синтеза [1, 2, 3]. Для определения ментола в объектах его содержащих, используются химические и физико-химические методы. Так известным реагентом для проведения качественной реакции на ментол и выявления его на пластинах для тонкослойной хроматографии (ТСХ) является раствор ванилина в серной кислоте [4]. В Государственной фармакопее Российской Федерации XIII и XIV издания для установления подлинности мяты перечной листьев методом ТСХ предписывается использовать элюент состава толуол-этилацетат (95:5) и детектирование зон адсорбции проводить при помощи реактива состава анисовый альдегид-ледяная уксусная кислота-этанол (96%)-серная кислота (0,5:10:85:5). Метод количественного определения ментола спектрофотометрическим методом с применением салицилового альдегида описан в работе [5].

Учитывая широкое использование ментола в фармации, медицине и других отраслях деятельности человека представляет интерес расширение спектра методик его качественного и количественного определения в различных объектах и, прежде всего, в лекарственных препаратах и биологически активных добавках.

Целью настоящего исследования является изучение хроматографического поведения ментола, входящего в состав лекарственных препаратов «Валидол» и «Меновазин», в тонком слое сорбента.

Экспериментальная часть

В качестве объектов исследования были выбраны лекарственные препараты:

• 1)    «Валидол» производителя АО «Производственная фармацевтическая компания Обновление», г. Новосибирск. Согласно инструкции по применению данного лекарственного препарата одна таблетка содержит активное вещество - валидол (левоментола раствор в ментилизовалерате) - 60 мг, а также вспомогательные

вещества – сахарозу 1,157 г и кальция стеарат 0,006 г.

• 2)    «Меновазин» производителя ООО «Тульская фармацевтическая фабрика». Согласно надписи на этикетке флакона данный лекарственный препарат содержит активные вещества: левоментол 2,5 г; прокаина гидрохлорид (новокаина гидрохлорид) 1,0 г; бензокаин 1,0 г; а также вспомогательное вещество этанол (этиловый спирт) 70% до 100 мл.

• 3)    В качестве образца сравнения был использован левоментол производителя Anhui Yinfeng Pharmaceutical (Китай), представляющий собой прозрачные бесцветные кристаллы.

Подготовка объектов исследования проводилась следующим образом:

• 1)    Таблетку препарата «Валидол» растворяли в 10 мл этанола (95%) и полученный раствор фильтровали через бумажный фильтр «синяя лента». В полученном растворе содержание валидола составило 6,0 мг/мл (суммарная массовая концентрация левоментола и ментилизовалерата).

• 2)    Препарат «Меновазин» разводили этиловым спиртом (95%) до содержания ментола в полученном растворе 6,0 мг/мл.

• 3)    Из кристаллического левоментола и этилового спирта (95%) готовили раствор с содержанием левоментола 6,0 мг/мл.

Полученные растворы в количестве по 5 мкл наносились на хроматографические пластины Sorbfil ПТСХ-АФ-В 10х10 см.

Хроматографирование проводилось в следующих подвижных фазах – бензол-этилацетат (95:5); толуол-этилацетат (95:5); гексан-этилацетат (95:5) и гексан-этилацетат (9:1).

Фронт подвижной фазы поднимался на расстояние от линии старта на 5 см, в этом случае получался лучший результат. Также проводились эксперименты с подъемом элюента на 3 см. Однако сокращение продолжительности времени элюирования и, соответственно, сокращение расстояния, пройденного элюентом до 3 см, не позволяет разделить в лекарственном препарате «Меновазин» левоментол и один из ком- понентов данного препарата (не идентифицирован из-за отсутствия образца сравнения).

После окончания хроматографирования осуществлялось детектирование зон адсорбции в УФ лучах (365 и 254 нм) до и после обработки многокомпонентными проявляющими реагентами, которые имели состав, приведенный ниже.

Реагент №1. Анисовый альдегид-ледяная уксусная кислота-этанол (95%)-концентрированная серная кислота (0,5:10:85:5) – по ФС.2.5.0029.15 Государственной фармакопеи Российской Федерации XIII издания.

Реагент №2. Цикламеновый альдегид-ледяная уксусная кислота-этанол (95%) – концентрированная серная кислота (0,5:10:85:5).

Таким образом, проявляющий реагент №1 отличается от проявляющего реагента №2 используемым альдегидом.

Для проявления зон адсорбции хроматографические пластинки окунали в реагенты, удаляли избыток жидкости фильтровальной бумагой и помещали на 2 минуты в термостат (100°С).

Были опробованы два способа обработки пластин. Первый способ заключался в использовании только реагента №1. Второй способ заключался в обработке пластин сначала реагентом №2, а затем, после фиксирования результатов, реагентом №1.

После обработки реагентом №2 зоны адсорбции левоментола и ментилизовалерата имеют светло-оранжевый цвет на розовом фоне. В УФ-лучах при длине волны 254 нм часть хроматографической пластинки, обработанная реагентом, становится желто-оранжевого цвета, а зоны адсорбции левоментола и ментилизовалерата сине-зеленого цвета. Дальнейшая обработка этой же пластинки реагентом №1 приводит к изменению цвета как обработанной реагентом части пластинки, так и зон адсорбции. Результаты применения различных способов детектирования зон адсорбции показаны на рисунке.

Рис. Хроматографические профили лекарственных препаратов «Валидол» (1), «Менова-зин» (2) и образца сравнения - левоментола (3) в системе элюирования гексан-этилацетат (9:1) на пластинках Sorbfil ПТСХ-АФ-В, а) при обработке реагентом №1; б) при последовательной обработке реагентом №2 и №1

Результаты оценки хроматографической подвижности приведены в таблице.

Таблица. Хроматографическая подвижность компонентов лекарственных препаратов «Валидол», «Меновазин» и образца сравнения левоментола на пластинках Sorbfil ПТСХ-АФ-В в системе гексан-этилацетат (9:1).

№	Объект	R f зон адсорбции / цвет
		1	2	4
1	«Валидол»	-	0,37±0,04 / синий, фиолетовый	0,94±0,04 / синий, фиолетовый
2	«Меновазин»	0,1±0,02 / желтый	0,42±0,04 / синий, фиолетовый	-
3	Левоментол	-	0,42±0,04 / синий, фиолетовый	-

Заключение

Исследование показало, что на пластинках Sorbfil ПТСХ-АФ-В из трех проверенных смесей растворителей оптимальным элюентом для качественного определения левоментола в лекарственных препаратах «Валидол» и «Меновазин» является состав гексан-этилацетат (9:1). Хроматографический профиль «Валидола» имеет две зоны адсорбции с Rf=0,37 (левоментол) и Rf= 0,94 (ментилизовалерат). При этом зона адсорбции левоментола, содержащегося в «Валидоле», несколько «отстаёт» от образца сравнения левомен- тола. Предположительно это связано с наличием в экстракте таблетки некоторого количества вспомогательных веществ, влияющих на подвижность левоментола на начальных этапах хроматографирования. Также заметно размывание зон адсорбции ментола и ментилизовалерата. Данные вещества являются легколетучими и после обработки реагентом №1 или №2 пластинка помещается в термостат с высокой температурой, что, предположительно, приводит к быстрому испарению этих веществ до начала реакции окрашивания и размыванию зоны адсорбции.