Исследование полиморфизма ECO RV гена моноаминоксидаза а МАО А с уровнем тревожности у студентов

Автор: Хафизова Л.М.

Журнал: Форум молодых ученых @forum-nauka

Статья в выпуске: 1 (17), 2018 года.

Бесплатный доступ

Проанализированы показатели тревожности (личностной и ситуативной) у студентов 1-4 курса. Проведен анализ ассоциаций полиморфизма ECO RV гена моноаминоксидаза а с показателями тревожности у студентов 1-5 курса.

Моноаминоксидаза а, дофамин, полиморфизм, генотип, уровень тревожности, ситуативная и личностная тревожность

Короткий адрес: https://sciup.org/140279732

IDR: 140279732

Текст научной статьи Исследование полиморфизма ECO RV гена моноаминоксидаза а МАО А с уровнем тревожности у студентов

Термин «тревожность» используют для обозначения относительно устойчивых индивидуальных различий в склонности индивида испытывать это состояние. Эта особенность напрямую не проявляется в поведении, но ее уровень можно определить исходя из того, как часто и как интенсивно у человека наблюдаются состояния тревоги. Личность с выраженной тревожностью склонна воспринимать окружающий мир как заключающий в себе опасность и угрозу в значительно большей степени, чем личность с низким уровнем тревожности. На данный момент различают два вида тревожности: ситуативную и личностную. Ситуативная тревожность показывает, как человек чувствует себя в настоящий момент времени, а личностную тревожность определяют как свойство личности, которая выражает то, как субъект чувствует себя обычно в повседневной жизни[2].

В 90-х гг. началось бурное изучение молекулярно-генетических основ отдельных свойств темперамента и личности. Относительно недавно было обнаружено, что вариации в генах дофаминергической системы влияют на проявление тревожности [3].

Многие научные исследования по поиску ассоциаций генетических полиморфизмов с личностными характеристиками проводятся на людях, которые страдают различными психическими отклонениями в целях поиска генетической основы болезни, но таких исследований мало для формирования полного представления о наследуемости тревожности. Поэтому актуальным в настоящее время является исследование влияния генов дофаминергической системы и их полиморфных вариантов на уровень тревожности у студентов, у которых не наблюдается явных психических отклонений.

Исходя из выше перечисленного, целью работы является исследование аллельных вариантов гена моноаминоксидаза А, осуществляющего инактивацию дофамина в синапсе, у лиц с различным уровнем тревожности.

Материалы и методы . Материалом исследования послужили образцы ДНК 102 студентов БГПУ им. М. Акмуллы. Все студенты были протестированы для определения показателей ситуативной и личностной тревожности по методике Ч.Д. Спилбергера в адаптации Ю.Л. Ханина[2]. Методика включает по 20 вопросов каждая по каждому показателю тревожности. Результаты диагностики обрабатываются по ключу. Суммируются баллы по каждой шкале. Полученные результаты разделяют на три группы: до 30 баллов - низкий уровень тревожности; 31-44 баллов -умеренный уровень тревожности; 45 и более баллов - высокий уровень тревожности [2]. Выделение ДНК проводилось с путем метода фенольнохлороформной экстракции [4]. Анализ генетических полиморфизмов осуществлен методом полимеразной цепной реакции с последующим ПДРФ-анализом. Статистическую обработку данных проводили с использованием таблиц сопряженности 2х2 (с поправкой Иэйтса).

Результаты и обсуждение.Проведено анкетирование студентов 1-4 курса по методике самооценки уровня тревожности Ч.Д.Спилбергера и Ю.Л.Ханина. Общая выборка была разделена на три группы в зависимости от уровня тревожности: высокий, умеренный и низкий. Был проведен анализ показателей ситуативной и личностной тревожности в зависимости от года обучения. Было установлено, что низкие показатели по обеим шкалам встречаются реже всего у 3 курса (с частотой 6,25%) и 5 курса (12,5%). Процент средних показателей теста по ситуативной и личностной тревожности чаще всего обнаруживается у учащихся 3 курса (с частотой 88,2% и 82,3% соответственно). Высокие показатели по ситуативной тревожности характерны для студентов 5 курса (с частотой 31,25%), по личностной тревожности - 4 и 3 курса (42,8% и 33,3% соответственно) (табл.1).

Таблица 1

Показатели тревожности в зависимости от года обучения

Курс	Личностная тревожность	Ситуативная тревожность
1	40,3	39,1
2	41,1	39
3	40,3	36,25
4	43,3	39,7
5	42,4	42,3

В результате молекулярно-генетического анализа полиморфизма rs1137070 гена МАОА было выявлено два аллеля – *488 , *456 и три генотипа *488/*488 , *488/*456, *456/*456 . Поскольку данный ген расположен на Х-хромосоме, группы мужчин и женщин анализировались отдельно.

Для анализа взаимосвязи данного полиморфизма с показателями тревожности вся выборка была разделена на 3 группы по шкалам СТ и ЛТ по баллам, описанным ранее.

При анализе ситуативной тревожности (СТ) у женщин изучено распределение частот аллелей и генотипов. В выборке с низким уровнем тревожности составило: 45,45% ( МАО А *488) и 54,55% (МАО А *456 ). Установлено следующее распределение частот генотипов: 1) МАО А *488/*488 – 18,18%, 2) МАО А *488/*456 – 54,55%, 3) МАО А *456/*456 –

27,27% (табл. 2). Распределение частот аллелей в выборке с умеренным уровнем тревожности составило: 52,14% ( МАО А *488) и 47,86% (МАО А *456 ). Установлено следующее распределение частот генотипов: 1) МАО А *488/*488 – 34,29%, 2) МАО А *488/*456 – 35,71 %, 3) МАО А *456/*456 – 30,00% (табл. 2). Распределение частот аллелей в выборке с высоким уровнем тревожности составило 47,83% ( МАО А *488) и 52,17% (МАО А *456 ). Установлено следующее распределение частот генотипов: 1) МАО А *488/*488 – 17,39%, 2) МАО А *488/*456 – 60,87 %, 3) МАО А *456/*456 – 21,74% (табл. 2).

Таблица 2

Анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфного локуса rs1137070 гена МАО А в зависимости от уровня СТ у женщин

Группа	Кол-во человек	Аллели		Генотипы
	N	*488	*456	488/488	488/456	456/456
Низкий уровень	11	0,45±0,11	0,55±0,11	0,18±0,12	0,55±0,15	0,27±0,13
Умеренный уровень	70	0,52±0,04	0,48±0,04	0,34±0,06	0,36±0,06	0,30±0,05
Высокий уровень	23	0,48±0,07	0,52±0,07	0,17±0,08	0,61±0,1	0,22±0,09

При анализе ситуативной тревожности (СТ) у мужчин изучено распределение частот аллелей и генотипов. В выборке с низким уровнем тревожности составило: 45,45% ( МАО А *488) и 54,55% (МАО А *456 ). Распределение частот аллелей в выборке с умеренным уровнем тревожности составило: 52,14% ( МАО А *488) и 47,86% (МАО А *456 ). Распределение частот аллелей в выборке с высоким уровнем тревожности составило 47,83% ( МАО А *488) и 52,17% (МАО А *456 ) (табл. 3).

Анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфного локуса rs1137070 гена МАО А в зависимости от уровня СТ у мужчин

Группа	Кол-во человек	Аллели
	N	*488	*456
Низкий уровень	4	1,00±0	0
Умеренный уровень	7	0,71±0,17	0,29±0,17
Высокий уровень	5	0,80±0,18	0,20±0,18

Поскольку выборка мужчин обладала малой численностью (16 студентов) в дальнейшем анализе не учитывалось.

Также был проведен анализ полиморфных вариантов по гену COMT по шкале личностной тревожность (ЛТ). Распределение частот генотипов и аллелей представлено в таблицах 4,5.

Распределение частот аллелей в выборке женщин с низким уровнем личностной тревожности составило 20% МАО А *488 и 8 0 % МАО А *456 соответственно. Установлено следующее распределение частот генотипов: 1) МАО А *488/*488 – 0%, 2) МАО А *488/*456 – 40%, 3) МАО А *456/*456 – 60% (табл. 4). Распределение частот аллелей в выборке с умеренным уровнем тревожности составило: 53,91% ( МАО А *488) и 46,09% (МАО А *456 ). Установлено следующее распределение частот генотипов: 1) МАО А *488/*488 – 32,81%, 2) МАО А *488/*456 – 42,19 %, 3) МАО А *456/*456 – 25,00% (табл. 4). Распределение частот аллелей в выборке с высоким уровнем тревожности составило 47,14% ( МАО А *488) и 52,86% (МАО А *456 ). Установлено следующее распределение частот генотипов: 1) МАО А

*488/*488 - 22,86%, 2) МАО А *488/*456 - 48,57%, 3) МАО А *456/*456 -

28,57% (табл. 4).

Таблица 4

Анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфного локуса rs1137070 гена МАО А в зависимости от уровня ЛТ у женщин

Группа	Кол-во человек	Аллели		Генотипы
	N	*488	*456	488/488	488/456	456/456
Низкий уровень	5	0,20±0,13	0,80±0,13	0	0,40±0,22	0,60±0,22
Умеренный уровень	64	0,54±0,04	0,46±0,04	0,33±0,06	0,42±0,06	0,25±0,05
Высокий уровень	35	0,47±0,06	0,53±0,06	0,23±0,07	0,49±0,08	0,28±0,08

При анализе личностной тревожности (ЛТ) у мужчин изучено распределение частот аллелей и генотипов. В выборке с низким уровнем тревожности составил 100% аллель МАО А *488. Распределение частот аллелей в выборке с умеренным уровнем тревожности составило: 72,73% ( МАО А *488) и 27,27% (МАО А *456 ). Распределение частот аллелей в выборке с высоким уровнем тревожности составило 100% МАО А *488 (табл. 5).

Анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфного локуса rs1137070 гена МАО А в зависимости от уровня ЛТ у мужчин

Группа	Кол-во человек	Аллели
	N	*488	*456
Низкий уровень	4	1,00±0	0
Умеренный уровень	11	0,73±0,13	0,27±0,13
Высокий уровень	1	1,00	0

Поскольку выборка мужчин обладала малой численностью (16 студентов) в дальнейшем анализе не учитывалось.

Было проведено попарное сравнение частот генотипов и аллелей отдельно по шкалам ЛТ и СТ. Данные статистического анализа представлены в таблицах 6-8.

При попарном сравнении частот генотипов и аллелей по полиморфному маркеру rs1137070 гена МАО А между группами с умеренными и высокими показателями ситуативной и личностной тревожности статистически значимое различие не было установлено. Во всех случаях уровень значимости р был выше критической отметки (0,005) (табл.6).

Распределение частот генотипов и аллелей маркераrs1137070 гена МАО А в группах с умеренными и высокими показателями тревожности у женщин

Шкала		Генотипы (частота,%±m)						Аллели (частота,%)
С Т	Состояние	488/ 488	N	488/ 456	N	456/ 456	N	*488	N	*456	N
	умеренны й	0,34±0, 06	24	0,36±0, 06	25	0,30± 0,05	21	0,52±0, 04	73	0,48±0, 04	67
	высокий	0,17±0, 08	4	0,61±0, 1	14	0,22± 0,09	5	0,48±0, 07	22	0,52±0, 07	24
х ²		1,6144		2,2508		0,1105		0,1148
р		0,2047		0,1339		0,7403		0,7355
Л Т	Состояние	488/ 488	N	488/ 456	N	456/ 456	N	*488	N	*456	N
	умеренны й	0,33±0, 06	21	0,42±0, 06	27	0,25± 0,05	16	0,54±0, 04	69	0,46±0, 04	59
	высокий	0,23±0, 07	8	0,49±0, 08	17	0,28± 0,08	10	0,47±0, 06	33	0,53±0, 06	37
х ²		0,6558		0,1601		0,0221		0,5805
р		0,4188		0,6895		0,8839		0,4467

При попарном сравнении частот генотипов и аллелей по полиморфному маркеру rs1137070 гена МАО А между группами с умеренными и низкими показателями ситуативной и личностной тревожности статистически значимое различие не было установлено. Во всех случаях уровень значимости р был выше критической отметки (0,005) (табл.7).

Распределение частот генотипов и аллелей маркера rs1137070 гена

МАО А в группах с умеренными и низкими показателями тревожности у женщин

Шкала		Генотипы (частота,%±m)						Аллели (частота,%)
С Т	Состояние	488/ 488	N	488/ 456	N	456/ 456	N	*488	N	*456	N
	умеренны й	0,34±0, 06	24	0,36±0, 06	25	0,30± 0,05	21	0,52±0, 04	73	0,48±0, 04	67
	низкий	0,18±0, 12	2	0,55±0, 15	6	0,27± 0,13	3	0,45±0, 11	10	0,55±0, 11	12
х ²		0,5133		0,7416		0,0005		0,1258
р		0,4742		0,3900		1,0005		0,7235
Л Т	Состояние	488/ 488	N	488/ 456	N	456/ 456	N	*488	N	*456	N
	умеренны й	0,33±0, 06	21	0,42±0, 06	27	0,25± 0,05	16	0,54±0, 04	69	0,46±0, 04	59
	низкий	0	0	0,40±0, 22	2	0,60± 0,22	3	0,20±0, 13	2	0,80±0, 13	8
х ²		1,0637		0,0005		1,3637		3,0199
р		0,3034		1,0005		0,2438		0,0823

При попарном сравнении частот генотипов и аллелей по полиморфному маркеру rs1137070 гена МАО А между группами с высокими и низкими показателями ситуативной и личностной тревожности статистически значимое различие не было установлено. Во всех случаях уровень значимости р был выше критической отметки (0,005) (табл.8).

Таблица 8

Распределение частот генотипов и аллелей маркераrs1137070 гена МАО А в группах с высокими и низкими показателями тревожности у женщин

Шкала		Генотипы (частота,%±m)						Аллели (частота,%)
С Т	Состояние	488/ 488	N	488/ 456	N	456/ 456	N	*488	N	*456	N
	высокий	0,17±0, 08	4	0,61±0, 1	14	0,22± 0,09	5	0,48±0, 07	22	0,52±0, 07	24
	низкий	0,18±0, 12	2	0,55±0, 15	6	0,27± 0,13	3	0,45±0, 11	10	0,55±0, 11	12
х ²		0,0005		0,0005		0,0005		0,0005
р		1,0005		1,0005		1,0005		1,0005
Л Т	Состояние	488/ 488	N	488/ 456	N	456/ 456	N	*488	N	*456	N
	высокий	0,23±0, 07	8	0,49±0, 08	17	0,28± 0,08	10	0,47±0, 06	33	0,53±0, 06	37
	низкий	0	0	0,40±0, 22	2	0,60± 0,22	3	0,20±0, 13	2	0,80±0, 13	8
х ²		0,3576		0,0005		0,7982		1,6331
р		0,5502		1,0005		0,3725		0,2021

Таким образом, данные показывают, что полиморфный локус маркера rs1137070 гена МАО А не ассоциирован с уровнем тревожности у женщин.

Список литературы Исследование полиморфизма ECO RV гена моноаминоксидаза а МАО А с уровнем тревожности у студентов

Алфимова М.В., Голимбет В.Е., Егорова М.С. Личностные черты, управляющие функции и генетические особенности метаболизма моноаминов // Психология. Журнал Высшей школы экономики.-2009.-№4.-С.24-41.
Барканова О.В. Методики диагностики эмоциональной сферы: психологический практикум [Текст]/ О. В. Барканова [серия: Библиотека актуальной психологии].- Вып.2.-Красноярск:Литерапринт, 2009. - C. 215 - 222.
Куликова М. А. Полиморфизмы генов дофаминергической системы - маркеры проявления тревожности у спортсменов [Текст]: автореф. дис. на соиск. учен. степ. канд. биол. наук. - Москва, 2009. - 25 с.
Сидоров К.Р. Тревожность как психологический феномен // Психология. Вестник Удмуртского университета.-2013.-№2- С.42-52.
Mathew C.C. The isolation of high molecular weight eukaryotic DNA // Methods in molecular Biology N.Y.-1984 Vol. 2. №35-P. 31 -34.
Mill J., Asherson P., Browes C. et al. Expression of the dopamine transporter gene is regulated by the 3′ UTR VNTR: Evidence from brain and lymphocytes using quantitative RT-PCR //American journal of medical genetics. - 2002.-Т. 114. №. 8.-С. 975-979.

Статья научная