Исследование реакции клеточной культуры на изменение температуры методом динамической спекл-интерферометрии

Автор: Михайлова Юлия Александровна, Владимиров Александр Петрович, Бахарев Алексей Анатольевич, Сергеев Александр Григорьевич, Новоселова И.А., Якин Д.И.

Журнал: Российский журнал биомеханики @journal-biomech

Статья в выпуске: 1 (75) т.21, 2017 года.

Бесплатный доступ

В настоящее время биоспеклы успешно применяются для изучения процессов, происходящих на поверхности и внутри различных биологических объектов: фруктов, овощей, зерен, кожи и сетчатки глаза пациента. Ранее были разработаны методика и установка для определения метаболической активности клеточных культур Vero, Л-41 и ЛЭЧ методом динамической спекл-интерферометрии. Параметрами, характеризующими активность клеток, являлись усредненное по времени цифровое значение интенсивности излучения в пикселе телекамеры и коэффициент корреляции двух спекловых изображений η. Получены хорошо воспроизводимые результаты при исследовании клеточных культур, зараженных вирусом простого герпеса первого типа. В данной статье рассмотрена оптическая методика, позволяющая по коэффициенту корреляции фрагмента спекловых изображений определять среднеквадратическое отклонение разности оптических путей волн σ u в малой области отдельной клетки либо в группе клеток. Объектом исследования являлась клеточная культура Л-41 в виде монослоя клеток на стеклянной подложке, помещенной в кювету с питательной средой. Кювету освещали излучением от лазерного модуля через матовый рассеиватель, спекловое изображение клеток формировали с оптическим увеличением, равным 11. Величину σ u использовали в качестве параметра, характеризующего активность физико-химических процессов в клетках. Показано, что в процессе увеличения температуры Т от 26 до 37 °C в течение часа имеют место значительные флуктуации величины σ u в пространстве и во времени. При стабилизации температуры в течение 30 минут флуктуации практически прекращаются, а при изменении температуры на десятые доли градуcов наблюдается хорошая корреляция между σ u и Т.

Еще

Спеклы, интерферометрия, клетка, линия л-41, температура, метаболизм, неразрушающий контроль

Короткий адрес: https://sciup.org/146216228

IDR: 146216228   |   DOI: 10.15593/RZhBiomeh/2017.1.06

Список литературы Исследование реакции клеточной культуры на изменение температуры методом динамической спекл-интерферометрии

  • Беднов А.А., Ульянов С.С., Тучин В.В., Брилль Г.Е., Захарова Е.И. Исследование динамики лимфотока методами спекл-интерферометрии//Известия вузов. Прикладная нелинейная динамика. -1996. -Т. 4, № 6. -C. 45-54.
  • Вест Ч. Голографическая интерферометрия: пер. с англ. -М.: Мир, 1982. -504 с.
  • Владимиров А.П., Лисин А.Л., Микушин В.И., Кохан М.М., Куклин И.А., Кононенко Е.В. Применение техники счета числа мерцаний спеклов для изучения биологической активности кожи//Письма в журнал технической физики. -2000. -Т. 26. -С. 20-24.
  • Владимиров А.П. Динамическая спекл-интерферометрия микроскопических процессов, протекающих в тонких биологических объектах//Известия вузов. Радиофизика. -2014. -T. 57, № 8-9. -С. 632-545.
  • Владимиров А.П., Малыгин А.С., Михайлова Ю.А., Бородин Е.М., Бахарев А.А., Порываева А.П. Сравнение метаболической активности разных клеточных культур по динамике спеклов//Известия вузов. Радиофизика. -2014. -T. 57, № 8-9. -С. 654-659.
  • Владимиров А.П., Малыгин А.С., Михайлова Ю.А., Бахарев А.А., Порываева А.П. Устройство оценки в режиме реального времени метаболической активности клеточных культур с вирусом герпеса//Медицинская техника. -2014. -№ 4. -С. 8-10.
  • Гудмен Дж. Статистическая оптика: пер. с англ. -М.: Мир, 1988. -528 с.
  • Зимняков Д.А., Рябухо В.П., Тучин В.В., Ульянов С.С. Лазерные спекл-корреляционные диагностические технологии для машиностроения и медицины//Проблемы машиностроения и надежности машин. -1999. -№ 1. -С. 117-126.
  • Малыгин А.С., Бебенина Н.В., Владимиров А.П., Микитась К.Н., Бахарев А.А. Спекл-интерферометрическая установка для изучения биологической активности клеток//Приборы и техника эксперимента. -2012. -№ 3. -C. 124-127.
  • Тучин В.В. Оптическая биомедицинская диагностика. -М.: Физматлит, 2007. -Т. 1. -560 с.
  • Тычинский В.П. Когерентная фазовая микроскопия внутриклеточных процессов//Успехи физических наук. -2001. -T. 171. -C. 649-662.
  • Франсон М. Оптика спеклов/пер. с англ. под ред. Ю.И. Островского. -М.: Мир, 1980. -171 с.
  • Briers J.D., Webster S. Laser speckle contrast analysis (LASCA): a nonscanning, full-field technique for monitoring capillary blood flow//Journal of Biomedical Optics. -1996. -Vol. 1, № 2. -P. 174-179.
  • Briers J.D. Laser speckle contrast imaging for measuring blood flow//Optica Applicata. -2007. -Vol. XXXVII, № 1-2. -P. 139-152.
  • Cardoso R.R., Costa A.G., Nobre C.M.B., Braga Jr. R.A. Frequency signature of water activity by biospeckle laser//Optics Communications. -2011. -Vol. 284, № 8. -P. 2131-2136.
  • Choi W., Fang-Yen C., Badizadegan K., Oh S., Lue N., Dasari R.R., Feld M.S. Tomographic phase microscopy//Nature Methods. -2007. -Vol. 4, № 9. -P. 717-719.
  • Fercher A.F., Briers J.D. Flow visualization by means of single-exposure speckle photography//Optics Communications. -1981. -Vol. 37, № 5. -P. 326-330.
  • Niemz M.H. Laser-Tissue Interactions: Fundamentals and Applications. -Springer, 1996.
  • Oulamara A., Tribillon G., Duvernoy J. Biological activity measurement on botanical specimen surfaces using a temporal decorrelation effect of laser speckle//Journal of Modern Optics. -1989. -Vol. 36, № 2. -P. 165-179.
  • Rabal H.J., Braga Jr. R.A. Dynamic Laser Speckle and Applications. -New York: CRC Press, 2008.
Еще
Статья научная