Исследование влияния летрозола на некоторые показатели гормонально-метаболического статуса при экспериментальном раке молочной железы

Одним из основных механизмов развития гормонозависимых опухолей является процесс образования эстрогенов из андрогенов in situ. Эту реакцию катализирует фермент ароматаза, гиперэкспрессия которой наблюдается при предопухолевых и злокачественных изменениях в тканях молочной железы, эндометрия. Ингибиторы ароматазы могут, подобно антиэстро-генам, тормозить интенсивность клеточного размножения, а также угнетать образование генотоксичных метаболитов эстрогенов в ткани молочной железы. Исследования последних лет доказали возможность и целесообразность применения препаратов данной группы в качестве средств первой и второй линии гормонотерапии рака молочной железы (РМЖ). В последнее время стала весьма актуальной идея использования данной группы препаратов не только для лечения, но и профилактики злокачественных образований молочной железы [2, 5, 6].

Цель работы – изучение влияния ингибитора ароматазы летрозола на возникновение индуцированных опухолей молочной железы у крыс и оценка изменений гормонального статуса и липидного спектра крови как возможных механизмов антиканцерогенного действия препарата.

Материал и методы

Эксперимент проведен на 45 крысах-самках линии Вистар массой 100–120 г, полученных из вивария Пятигорской государственной фарма- цевтической академии. Животные содержались на стандартной лабораторной диете и получали воду без ограничения. В качестве канцерогенного агента использовано вещество N-метил-N-нитрозомочевина (MНM), синтезированное из С-метиламина гидрохлорида в НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова М3 РФ. Опухоли молочной железы индуцировали по описанной методике путем подкожных инъекций MНM в область молочной железы у основания левой передней лапки в дозе 2,5 мг на крысу в 0,2 мл воды для инъекций 1 раз в нед в течение 5 нед [1]. Эта модель по гистогенезу и морфологическим изменениям очень близка к раку молочной железы у человека [7].

Было сформировано две группы животных. Крысам первой группы (контроль, n=25) вводили только канцероген, животные опытной группы (n=20) получали наряду с канцерогеном летрозол по 5мг/кг массы тела 3 раза в нед. Основанием для выбора дозы исследуемого препарата явились данные литературы [8]. Концентрацию гормонов в сыворотке крови определяли радиоиммунным методом, используя реагенты коммерческих наборов: для эстрадиола – «Orion Diagnostica» (Финляндия), для фолликулостимулирующего и лютеинизирующего гормонов (ФСГ и ЛГ) – «Immunotech» (Чехия). Уровень общего холестерина, холестерина липопротеидов высокой плотности (ЛПВП) и триглицеридов в сыворотке крови определяли ферментативным методом с помощью наборов реагентов «Вектор-Бест» (Россия).

Продолжительность опыта составила 224 сут. Животных, доживших до окончания эксперимента, забивали парами эфира. Всех павших и забитых животных подвергали аутопсии. Проводили гистологическое исследование опухолей молочной железы по стандартной методике. Оценивали частоту возникновения опухолей, длительность латентного периода их развития от момента введения канцерогена до выявления опухолевого узелка, а также продолжительность жизни животных-опухоленосителей в опытной и контрольной группах. Полученные данные обрабатывали методом вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента и критерия χ2.

Результаты и обсуждение

Показатели массы тела в опытной и контрольной группах животных практически не отличались на протяжении всего срока опыта. Ко времени появления первой опухоли показатели выживаемости в контрольной и подопытной группах были одинаковы и составили 96 % и 95 % соответственно. Пятикратное подкожное введение МНМ индуцировало у крыс развитие опухолей молочной железы, общая частота которых в контрольной группе животных составила 91,6 % (таблица) при средней длительности латентного периода развития опухолей 128,7 ± 7,4 сут. При введении летрозола частота новообразований снизилась с 91,6 % до 36,8 % (p<0,05), а длительность латентного периода увеличилась на 37,7 ± 6,6 сут, составляя 166 ± 14 сут, что значимо отличается от контроля (p<0,05). Средняя продолжительность жизни животных с опухолями в опытной группе была существенно выше, чем в контрольной, – 56 ± 12,04 и 30,8 ± 2,4 сут соответственно (p<0,05).

Вследствие того, что в этиопатогенезе гор-монзависимого рака молочной железы ведущая роль принадлежит эстрогенам, в лечении и профилактике РМЖ большое значение могут иметь антигормональные эффекты (c учетом угнетения локального эстрогенообразования) ингибиторов ароматазы. Наряду с эстрогенами определенная роль в развитии заболевания придается гипоталамическим изменениям и, в частности, изменению уровней ФСГ и ЛГ.

Анализ влияния летрозола на уровень эстрадиола показал, что препарат достоверно снижал его содержание на 48,5 % по сравнению с контролем. Средний уровень эстрадиола у животных опытной группы был равен 34,7 ± 8,4 нмоль/л, у животных контрольной группы – 71,5 ± 14,7 нмоль/л (р< 0,05). В группе крыс, получавшей летрозол, были несколько изменены уровни гонадотропных гормонов гипофиза относительно интактной и контрольной групп, однако статистически значимых различий выявлено не было.

Учитывая высокую частоту обменных нарушений при РМЖ и отсутствие однозначных оценок влияния препаратов данной группы на липидный спектр [3, 4], нами изучено влияние летрозола на уровень триглицеридов, общего

А.Р. ЧОЧИЕВА

Таблица

Влияние летрозола на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс N-нитрозо- N-метилмочевиной

Примечание: * – различия статистически значимы по сравнению с группой контроля (p<0,05).

холестерина и холестерина ЛПВП. Применение летрозола не оказывало значимого влияния на содержание общего холестерина, средний уровень которого был практически одинаков с контролем (1,9 ± 0,4 и 2,15 ± 0,31 ммоль/л соответственно). При этом отмечено некоторое повышение уровня холестерина ЛПВП – 1,1±0,1 ммоль/л в опытной группе против 0,85±0,05 ммоль/л в контрольной группе (р<0,05). В группе крыс, получавших летрозол, был снижен средний уровень триглицеридов (0,7 ± 0,18 ммоль/л) по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе – 1,36 ± 0,21 ммоль/л (р<0,05).

Таким образом, в условиях проведенного эксперимента летрозол оказывал антиканцерогенное действие, которое проявлялось в статистически значимом снижении частоты возникновения опухолей молочной железы и увеличении среднего латентного периода их появления. Основную роль в антиканцерогенном действии летрозола, скорее всего, играет снижение уровня эстрадиола. Определенное значение может иметь изменение показателей липидного обмена, выражавшееся в тенденции к снижению общего холестерина при одновременном повышении уровня холестерина ЛПВП и достоверном снижении среднего уровня триглицеридов. Представленные результаты наряду с данными литературы свидетельствуют о целесообразности дальнейшего изучения противобластомных свойств летрозола с целью обоснования его использования в качестве средства химиопрофилактики рака молочной железы.