Изменение иммунного статуса у больных диффузным токсическим зобом в динамике лечения тиреостатиками

Автор: Савченко А.А., Мацынина В.П., Кадричева С.Г., Догадин С.А.

Журнал: Сибирский журнал клинической и экспериментальной медицины @cardiotomsk

Рубрика: Клинические исследования

Статья в выпуске: 3-1 т.23, 2008 года.

Бесплатный доступ

Целью исследования явилось изучение состояния иммунного статуса у женщин с ДТЗ в динамике лечения тиреостатиками. Обследованы женщины с верифицированным при гормональном исследовании диагнозом диффузного токсического зоба до начала лечения тиреотоксикоза и в динамике через 1 и 3 месяца на фоне лечения тиреостатиками. Лечение проводилось тиреостатическим препаратом тиамазолом. Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали методом непрямой иммунофлуоресценции. Концентрацию иммуноглобулинов исследовали методом радиальной иммунодиффузии. Установлено, что у больных ДТЗ до начала лечения иммунный статус характеризуется повышением содержания цитотоксических Т-лимфоцитов и В-клеток. Причем, В-лимфоциты в периферическую кровь выходят со сниженной функциональной ак- тивностью. В течение 3-месячного периода лечения тиреостатиками наблюдается волнообразное изменение величин показателей иммунного статуса, характеризующих клеточное и гуморальное звено им- мунной системы. При этом нормализации состояния аутоиммунореактивности не наблюдается.

Еще

Иммунный статус, аутоиммунитет, лимфоциты, иммуноглобулины

Короткий адрес: https://sciup.org/14918873

IDR: 14918873

Текст научной статьи Изменение иммунного статуса у больных диффузным токсическим зобом в динамике лечения тиреостатиками

Диффузный токсический зоб (ДТЗ) является одним из наиболее часто встречающихся аутоиммунных заболеваний. Болеют преимущественно женщины (в 5 раз чаще мужчин) молодого возраста, пик заболеваемости приходится на возраст между 25 и 40 годами [1, 2]. В 70-х годах стало ясным, что Т-лимфоциты играют центральную роль в развитии ДТЗ. Доказано, что при ДТЗ у больных выявляются Т-лимфоциты (главным образом, CD4+-клетки), сенсибилизированные к тиреоцитам или отдельным тиреоидным антигенам [3, 4]. Однако как ведет себя иммунная система на фоне терапевтического лечения при данном аутоиммунном заболевании, до сих пор не установлено. Целью исследования явилось изучение состояния иммунного статуса у женщин с ДТЗ в динамике лечения тиреостатиками.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Обследовано 35 больных с верифицированным при гормональном исследовании диагнозом диффузного токсического зоба до начала лечения тиреотоксикоза и в динамике через 1 и 3 месяца на фоне лечения тиреостатиками. Все исследуемые – женщины в возрасте от 18 до 60 лет. Все исследования проводились в 1-ю фазу менструального цикла. Лечение проводилось тиреостатическим препаратом тиамазолом («Тиро-зол», Никомед) по общепринятым схемам «блокируй» со стартовой дозы 30 мг/сут с постепенным снижением до поддерживающей под контролем данных объективного и гормонально-лабораторного статусов. В качестве группы сравнения обследованы 110 практически здоровых женщин без отягощенного анамнеза по заболеваниям щитовидной железы, сопоставимых по возрасту.

Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции с использованием моноклональных антител к CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, HLA-DR (ТОО «Сорбент», г. Москва). Для дополнительной характеристики Т-клеточного звена иммунной системы вычисляли иммунорегуляторный индекс и индекс активации Т-лимфоцитов. Определение иммуноглобулинов А, М и G проводили методом радиальной иммунодиффузии в геле по Манчини [5]. Концентрацию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) определяли по общепринятой методике [6]. Состояние гуморального иммунитета характеризовали также уровнем относительного синтеза Ig A (Ig A/CD72+), Ig M (Ig М/CD72+) и Ig G (Ig G/CD72+) [7].

Описание выборки производили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и С75). Статистическую значимость различий между показателями независимых выборок оценивали по непараметрическому критерию Манна-Уитни. Различия между исследуемыми показателями больных в динамике лечения (зависимые выборки) определяли по U-критерию Вилкоксона. Статистический анализ осуществляли в пакете прикладных программ Statistica 6.0 (StatSoft Inc., 2001).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

При исследовании состояния Т-клеточного иммунитета у женщин с ДТЗ до начала лечения установлено повышение процентного содержания лимфоцитов в периферической крови и абсолютного количества CD8+-клеток (табл. 1). Через 3 месяца после начала лечения обнаружено повышение относительно контрольных величин относительного и абсолютного количества CD4+-лимфоцитов при сохранении увеличенного процентного уровня общих лимфоци- тов. На этом периоде лечения абсолютный уровень CD8+-клеток соответствует контрольному диапазону. Через 6 месяцев после начала лечения установлено повышение абсолютного содержания CD3+- и CD8+-лимфоцитов.

При исследовании фенотипического состава лимфоцитов крови у больных ДТЗ обнаружено, что у них до начала лечения выявляется увеличение относительного и абсолютного содержания CD19+- и HLA-DR+-лимфоцитов при снижении величины лейко-В-клеточного соотношения относительно контрольных значений (табл. 2). Через 3 месяца после начала лечения у больных обнаружено снижение процентного количества HLA-DR+-клеток относительно значений, выявленных у больных до начала лечения. Через 6 месяцев после начала лечения вновь установлено повышение абсолютного содержания CD19+-лимфоцитов и относительного и абсолютного количества HLA-DR+-клеток.

При изучении состояния гуморального иммунитета у больных ДТЗ установлено, что до начала лечения у них снижается величина уровней относительного синтеза Ig A и Ig M и повышается концентрация ЦИК в сыворотке крови (табл. 3). Через 3 месяца после начала лечения у больных ДТЗ при сохранении повышенного содержания ЦИК выявляется повышение концентрации Ig G. В то же время через 6 месяцев после начала лечения концентрация Ig G достигает максимальных значений (уровень статистически значимо выше, чем у лиц контрольной группы и больных до начала лечения), вновь снижается уровень относитель-

Таблица 1

Состояние Т-клеточного иммунитета у больных ДТЗ в динамике лечения (Ме, С 25 75 )

Показатели

Контроль, n=98 1

Больные ДТЗ

До начала лечения, n=35 2

Через 1 месяц, n=33 3

Через 3 месяца, n=25

4

Ме

С2575

Ме

С2575

Ме

С2575

Ме

С2575

Лейкоциты, (109/л)

5,80

4,80-7,00

5,50

4,50-6,80

5,50

4,70-7,30

5,80

5,00-6,80

Лимфоциты, (%)

37,0

31,0-41,0

41,0

34,0-49,0

40,0

34,0-49,0

38,0

35,0-47,0

P 1 =0,008

P1=0,041

Лимфоциты, (109/л)

2,16

1,76-2,64

2,46

1,85-2,94

2,25

1,89-2,95

2,54

1,95-2,97

CD3+, (%)

67,0

59,0-72,0

66,0

63,0-69,0

68,0

65,0-72,0

67,0

65,0-69,0

CD3 + , (109/л)

1,43

1,11-1,65

1,64

1,22-1,91

1,67

1,31-2,10

1,78

1,31-2,02

P 1 =0,025

CD4+, (%)

38,0

34,0-40,0

38,0

34,0-41,0

40,0

36,0-43,0

38,0

31,0-44,0

P 1 =0,049

CD4 + , (109/л)

0,82

0,61-1,00

0,88

0,73-1,11

0,93

0,76-1,24

0,94

0,74-1,13

P 1 <0,05

CD8+, (%)

30,0

21,0-33,0

28,0

25,0-33,0

30,0

26,0-32,0

30,0

25,0-33,0

CD8 + , (109/л)

0,60

0,42-0,78

0,66

0,49-0,94

0,67

0,53-0,82

0,70

0,57-0,88

P 1 =0,038

P 1 =0,023

Примечание: Р1 – статистически значимые различия с показателями контрольной группы.

Таблица 2

Фенотипический состав лимфоцитов крови и величины коэффициентов, характеризующих состояние иммунной системы, у больных ДТЗ в динамике лечения (Ме, С25-С75)

Показатели

Контроль, n=98 1

Больные ДТЗ

До начала лечения, n=35 2

Через 1 месяц, n=33 3

Через 3 месяца, n=25 4

Ме

С 25 75

Ме

С 25 75

Ме

С 25 75

Ме

С 25 75

CD16+, (%)

16,5

12,0-22,0

19,0

16,0-23,0

16,0

13,0-23,0

16,0

14,0-20,0

CD16+, (109/л)

0,38

0,27-0,51

0,47

0,29-0,59

0,38

0,26-0,51

0,38

0,29-0,62

CD19+, (%)

12,0

9,0-15,0

14,0

11,0-17,0

14,0

9,5-15,5

13,5

11,0-15,0

P1=0,048

CD19+, (109/л)

0,25

0,18-0,34

0,33

0,20-0,43

0,34

0,19-0,43

0,35

0,24-0,45

P1=0,032

P1=0,033

HLA-DR+, (%)

18,0

14,0-21,0

21,0

18,0-25,0

19,0

14,0-24,0

20,5

17,0-23,0

P1=0,041

P2=0,042

P1=0,042

HLA-DR+, (109/л)

0,37

0,29-0,46

0,51

0,40-0,67

0,42

0,31-0,63

0,50

0,45-0,67

P1=0,007

P1=0,009

Лейкоциты/CD3+

3,99

3,37-5,03

3,84

3,18-4,54

3,51

3,02-4,63

3,81

3,06-4,40

Лейкоциты/CD19+

22,41

16,81-28,83

17,42

13,61-23,04

19,55

14,60-25,98

19,50

14,32-25,33

P1=0,023

HLA-DR+/CD19+

1,42

1,17-1,80

1,47

1,32-1,88

1,50

1,25-2,00

1,48

1,23-2,00

CD4+/CD8+

1,33

1,15-1,67

1,37

1,06-1,52

1,32

1,13-1,62

1,36

0,96-1,64

Примечание: Р1 – статистически значимые различия с показателями контрольной группы; Р2 – статистически значимые различия с показателями больных ДТЗ до начала лечения.

Таблица 3

Состояние гуморального иммунитета крови у больных ДТЗ в динамике лечения (Ме, С 2 5-С 7 5)

Показатели

Контроль, n=98 1

Больные ДТЗ

До начала лечения, n=35 2

Через 1 месяц, n=33 3

Через 3 месяца, n=25 4

Ме

С 25 75

Ме

С 25 75

Ме

С 25 75

Ме

С 25 75

Ig A, (г/л)

1,46

1,04-2,36

1,61

0,97-2,89

2,05

1,19-2,73

1,81

1,12-2,89

Ig M, (г/л)

1,46

0,99-1,58

1,15

0,87-1,75

1,35

1,02-1,75

1,21

0,83-1,89

Ig G, (г/л)

5,79

4,94-8,60

6,90

5,56-10,60

8,50

6,00-12,20

10,55

7,05-12,65

P1=0,012

P1=0,008 P2=0,030

Ig A/CD19+, (нг/клетку)

6,91

4,98-12,23

5,16

3,47-8,08

7,33

3,49-10,01

5,93

4,25-9,56

P1=0,045

P3=0,047

Ig M/CD19+, (нг/клетку)

5,45

4,03-8,09

4,44

2,17-7,28

4,92

3,18-8,04

3,62

2,50-6,54

P1=0,034

P1=0,032

Ig G/CD19+, (нг/клетку)

28,44

19,70-44,52

20,37

14,63-41,46

29,43

18,85-42,57

27,22

18,31-57,30

ЦИК, (о.е.)

5,00

3,00-6,00

6,00

5,00-9,00

6,00

5,00-9,00

5,00

3,00-9,00

P1=0,047

P1=0,048

Примечание: Р1 – статистически значимые различия с показателями контрольной группы; Р2 – -//- больных ДТЗ до начала лечения; P3 – -//- больных ДТЗ через 3 месяца после начала лечения.

ного синтеза Ig M и по сравнению с 3-месячным периодом снижается величина относительного синтеза Ig A.

Состояние иммунного статуса у больных ДТЗ до начала лечения характеризуется повышенным содержанием общих лимфоцитов в периферической крови, цитотоксических Т-лимфоцитов, В- и HLA-DR+-клеток, что со стороны гуморального звена определяется снижением уровней относительного синтеза Ig A и Ig M и увеличением концентрации ЦИК в сыворотке. Необходимо отметить, что HLA-DR-ре-цептор экспрессируется на всех В-лимфоцитах и на активированных Т-клетках [8, 9]. Так как величина индекса активации Т-лимфоцитов у больных ДТЗ не отличалась от контрольных значений, можно заключить, что повышенное содержание HLA-DR+-клеток связано с увеличением количества В-лимфоцитов. Через 1 месяц лечения тиреостатиками у больных ДТЗ при сохранении повышенного содержания общих лимфоцитов и HLA-DR+-клеток количество цитотоксических Т-лимфоцитов снижается до диапазона норма, а уровень Т-хелперов увеличивается. Состояние гуморального иммунитета на этот период характеризуется увеличенной концентрацией Ig G и ЦИК. Через 3 месяца лечения тиреостатиками у больных выявляется увеличение содержания Т-лимфоцитов в периферической крови (за счет фракции цитотоксических Т-лимфоцитов), а также сохраняется увеличенный уровень В- и HLA-DR+-клеток. Изменения в гуморальном звене иммунитета определяются увеличением концентрации Ig G и снижением уровней относительного синтеза Ig A и Ig M.

Необходимо отметить, что при исследовании содержания аутоантител к тиреоидной пероксидазе (АТ к ТПО) в сыворотке крови установлено, что в динамике лечения концентрация аутоантител статистически значимо не изменялась. Так, если до начала лечения содержание АТ к ТПО соответствовало Ме=79,0 Ед (при интерквартальном разбросе 17,0-286,0), то через 1 месяц – Me=78,0 Ед (15,0-306,0), а через 3 месяца – Ме=40,0 Ед (5,0-219,0). В норме – Ме=1,0 Ед (при интерквартальном разбросе 0,0-3,0).

Таким образом, у больных ДТЗ до начала лечения иммунный статус характеризуется повышением содержания цитотоксических Т-лимфоцитов и В-кле-ток. Причем В-лимфоциты в периферическую кровь выходят со сниженной функциональной активностью. В течение 3-месячного периода лечения тиреостати-ками наблюдается волнообразное изменение величин показателей иммунного статуса, характеризующих состояние клеточного и гуморального звена иммунной системы. При этом нормализации состояния аутоиммунореактивности не наблюдается.

Список литературы Изменение иммунного статуса у больных диффузным токсическим зобом в динамике лечения тиреостатиками

  • Фадеев В.В. Болезнь Грейвса//Русский медицинский журнал. -2002. -Т. 10, № 27. -С. 1262-1265.
  • Rapoport B., McLachlan S.M. Thyroid autoimmunity//J. Clin. Invest. -2001. -Vol. 108, № 9. -Р. 1253-1259.
  • Marazuela M. Lymphocyte traffic and homing in autoimmune thyroid disorders//European Journal of Endocrinology. -1999. -Vol. 140. -P. 287-290.
  • Volpe R. Immunological aspects of thyroid disease//Triange. -1984. -Vol. 23, № 3/4. -P. 95-109.
  • Mancini G., Carbonaro A.O., Haremans J.F. Immunochemical quantitation of antigens by single radial diffusion//Immunochemistry -1965. -Vol. 2. -№ 3. -P. 235-255.
  • Haskova V., Kaslik J., Riha J., Rovensky J. Simple method of circulating immune complex detection in human sera by polyethylene glycol precipitation//J. Immunol. -1978. -Vol. 154. -P. 399-406.
  • Земсков А.М., Земсков В.М. Дополнительные методы оценки иммунного статуса//Клиническая лабораторная диагностика. -1994. -№ 3. -С. 34-35.
  • Bisset L.R., Lung T.L., Kaelin M. Reference values for peripheral blood lymphocyte phenotypes applicable to the healthy adult population in Switzerland//Eur. J. Haematol. -2004. -Vol. 72, № 3. -P. 203-212.
  • Nakamura H., Idiris A., Kato Y., Kato H. An increase in the percentage of HLA-DR-positive peripheral leukocytes predicts a poor prognosis in patients with squamous cell carcinoma of the lung//Oncol. Rep. -2004. -Vol. 11, № 3. -P. 673-676.
Еще
Статья научная