Изменение иммунного статуса у больных диффузным токсическим зобом в динамике лечения тиреостатиками
Автор: Савченко А.А., Мацынина В.П., Кадричева С.Г., Догадин С.А.
Журнал: Сибирский журнал клинической и экспериментальной медицины @cardiotomsk
Рубрика: Клинические исследования
Статья в выпуске: 3-1 т.23, 2008 года.
Бесплатный доступ
Целью исследования явилось изучение состояния иммунного статуса у женщин с ДТЗ в динамике лечения тиреостатиками. Обследованы женщины с верифицированным при гормональном исследовании диагнозом диффузного токсического зоба до начала лечения тиреотоксикоза и в динамике через 1 и 3 месяца на фоне лечения тиреостатиками. Лечение проводилось тиреостатическим препаратом тиамазолом. Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали методом непрямой иммунофлуоресценции. Концентрацию иммуноглобулинов исследовали методом радиальной иммунодиффузии. Установлено, что у больных ДТЗ до начала лечения иммунный статус характеризуется повышением содержания цитотоксических Т-лимфоцитов и В-клеток. Причем, В-лимфоциты в периферическую кровь выходят со сниженной функциональной ак- тивностью. В течение 3-месячного периода лечения тиреостатиками наблюдается волнообразное изменение величин показателей иммунного статуса, характеризующих клеточное и гуморальное звено им- мунной системы. При этом нормализации состояния аутоиммунореактивности не наблюдается.
Иммунный статус, аутоиммунитет, лимфоциты, иммуноглобулины
Короткий адрес: https://sciup.org/14918873
IDR: 14918873
Текст научной статьи Изменение иммунного статуса у больных диффузным токсическим зобом в динамике лечения тиреостатиками
Диффузный токсический зоб (ДТЗ) является одним из наиболее часто встречающихся аутоиммунных заболеваний. Болеют преимущественно женщины (в 5 раз чаще мужчин) молодого возраста, пик заболеваемости приходится на возраст между 25 и 40 годами [1, 2]. В 70-х годах стало ясным, что Т-лимфоциты играют центральную роль в развитии ДТЗ. Доказано, что при ДТЗ у больных выявляются Т-лимфоциты (главным образом, CD4+-клетки), сенсибилизированные к тиреоцитам или отдельным тиреоидным антигенам [3, 4]. Однако как ведет себя иммунная система на фоне терапевтического лечения при данном аутоиммунном заболевании, до сих пор не установлено. Целью исследования явилось изучение состояния иммунного статуса у женщин с ДТЗ в динамике лечения тиреостатиками.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Обследовано 35 больных с верифицированным при гормональном исследовании диагнозом диффузного токсического зоба до начала лечения тиреотоксикоза и в динамике через 1 и 3 месяца на фоне лечения тиреостатиками. Все исследуемые – женщины в возрасте от 18 до 60 лет. Все исследования проводились в 1-ю фазу менструального цикла. Лечение проводилось тиреостатическим препаратом тиамазолом («Тиро-зол», Никомед) по общепринятым схемам «блокируй» со стартовой дозы 30 мг/сут с постепенным снижением до поддерживающей под контролем данных объективного и гормонально-лабораторного статусов. В качестве группы сравнения обследованы 110 практически здоровых женщин без отягощенного анамнеза по заболеваниям щитовидной железы, сопоставимых по возрасту.
Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции с использованием моноклональных антител к CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, HLA-DR (ТОО «Сорбент», г. Москва). Для дополнительной характеристики Т-клеточного звена иммунной системы вычисляли иммунорегуляторный индекс и индекс активации Т-лимфоцитов. Определение иммуноглобулинов А, М и G проводили методом радиальной иммунодиффузии в геле по Манчини [5]. Концентрацию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) определяли по общепринятой методике [6]. Состояние гуморального иммунитета характеризовали также уровнем относительного синтеза Ig A (Ig A/CD72+), Ig M (Ig М/CD72+) и Ig G (Ig G/CD72+) [7].
Описание выборки производили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и С75). Статистическую значимость различий между показателями независимых выборок оценивали по непараметрическому критерию Манна-Уитни. Различия между исследуемыми показателями больных в динамике лечения (зависимые выборки) определяли по U-критерию Вилкоксона. Статистический анализ осуществляли в пакете прикладных программ Statistica 6.0 (StatSoft Inc., 2001).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
При исследовании состояния Т-клеточного иммунитета у женщин с ДТЗ до начала лечения установлено повышение процентного содержания лимфоцитов в периферической крови и абсолютного количества CD8+-клеток (табл. 1). Через 3 месяца после начала лечения обнаружено повышение относительно контрольных величин относительного и абсолютного количества CD4+-лимфоцитов при сохранении увеличенного процентного уровня общих лимфоци- тов. На этом периоде лечения абсолютный уровень CD8+-клеток соответствует контрольному диапазону. Через 6 месяцев после начала лечения установлено повышение абсолютного содержания CD3+- и CD8+-лимфоцитов.
При исследовании фенотипического состава лимфоцитов крови у больных ДТЗ обнаружено, что у них до начала лечения выявляется увеличение относительного и абсолютного содержания CD19+- и HLA-DR+-лимфоцитов при снижении величины лейко-В-клеточного соотношения относительно контрольных значений (табл. 2). Через 3 месяца после начала лечения у больных обнаружено снижение процентного количества HLA-DR+-клеток относительно значений, выявленных у больных до начала лечения. Через 6 месяцев после начала лечения вновь установлено повышение абсолютного содержания CD19+-лимфоцитов и относительного и абсолютного количества HLA-DR+-клеток.
При изучении состояния гуморального иммунитета у больных ДТЗ установлено, что до начала лечения у них снижается величина уровней относительного синтеза Ig A и Ig M и повышается концентрация ЦИК в сыворотке крови (табл. 3). Через 3 месяца после начала лечения у больных ДТЗ при сохранении повышенного содержания ЦИК выявляется повышение концентрации Ig G. В то же время через 6 месяцев после начала лечения концентрация Ig G достигает максимальных значений (уровень статистически значимо выше, чем у лиц контрольной группы и больных до начала лечения), вновь снижается уровень относитель-
Таблица 1
Состояние Т-клеточного иммунитета у больных ДТЗ в динамике лечения (Ме, С 25 -С 75 )
Показатели |
Контроль, n=98 1 |
Больные ДТЗ |
||||||
До начала лечения, n=35 2 |
Через 1 месяц, n=33 3 |
Через 3 месяца, n=25 4 |
||||||
Ме |
С25-С75 |
Ме |
С25-С75 |
Ме |
С25-С75 |
Ме |
С25-С75 |
|
Лейкоциты, (109/л) |
5,80 |
4,80-7,00 |
5,50 |
4,50-6,80 |
5,50 |
4,70-7,30 |
5,80 |
5,00-6,80 |
Лимфоциты, (%) |
37,0 |
31,0-41,0 |
41,0 |
34,0-49,0 |
40,0 |
34,0-49,0 |
38,0 |
35,0-47,0 |
P 1 =0,008 |
P1=0,041 |
|||||||
Лимфоциты, (109/л) |
2,16 |
1,76-2,64 |
2,46 |
1,85-2,94 |
2,25 |
1,89-2,95 |
2,54 |
1,95-2,97 |
CD3+, (%) |
67,0 |
59,0-72,0 |
66,0 |
63,0-69,0 |
68,0 |
65,0-72,0 |
67,0 |
65,0-69,0 |
CD3 + , (109/л) |
1,43 |
1,11-1,65 |
1,64 |
1,22-1,91 |
1,67 |
1,31-2,10 |
1,78 |
1,31-2,02 |
P 1 =0,025 |
||||||||
CD4+, (%) |
38,0 |
34,0-40,0 |
38,0 |
34,0-41,0 |
40,0 |
36,0-43,0 |
38,0 |
31,0-44,0 |
P 1 =0,049 |
||||||||
CD4 + , (109/л) |
0,82 |
0,61-1,00 |
0,88 |
0,73-1,11 |
0,93 |
0,76-1,24 |
0,94 |
0,74-1,13 |
P 1 <0,05 |
||||||||
CD8+, (%) |
30,0 |
21,0-33,0 |
28,0 |
25,0-33,0 |
30,0 |
26,0-32,0 |
30,0 |
25,0-33,0 |
CD8 + , (109/л) |
0,60 |
0,42-0,78 |
0,66 |
0,49-0,94 |
0,67 |
0,53-0,82 |
0,70 |
0,57-0,88 |
P 1 =0,038 |
P 1 =0,023 |
Примечание: Р1 – статистически значимые различия с показателями контрольной группы.
Таблица 2
Фенотипический состав лимфоцитов крови и величины коэффициентов, характеризующих состояние иммунной системы, у больных ДТЗ в динамике лечения (Ме, С25-С75)
Показатели |
Контроль, n=98 1 |
Больные ДТЗ |
||||||
До начала лечения, n=35 2 |
Через 1 месяц, n=33 3 |
Через 3 месяца, n=25 4 |
||||||
Ме |
С 25 -С 75 |
Ме |
С 25 -С 75 |
Ме |
С 25 -С 75 |
Ме |
С 25 -С 75 |
|
CD16+, (%) |
16,5 |
12,0-22,0 |
19,0 |
16,0-23,0 |
16,0 |
13,0-23,0 |
16,0 |
14,0-20,0 |
CD16+, (109/л) |
0,38 |
0,27-0,51 |
0,47 |
0,29-0,59 |
0,38 |
0,26-0,51 |
0,38 |
0,29-0,62 |
CD19+, (%) |
12,0 |
9,0-15,0 |
14,0 |
11,0-17,0 |
14,0 |
9,5-15,5 |
13,5 |
11,0-15,0 |
P1=0,048 |
||||||||
CD19+, (109/л) |
0,25 |
0,18-0,34 |
0,33 |
0,20-0,43 |
0,34 |
0,19-0,43 |
0,35 |
0,24-0,45 |
P1=0,032 |
P1=0,033 |
|||||||
HLA-DR+, (%) |
18,0 |
14,0-21,0 |
21,0 |
18,0-25,0 |
19,0 |
14,0-24,0 |
20,5 |
17,0-23,0 |
P1=0,041 |
P2=0,042 |
P1=0,042 |
||||||
HLA-DR+, (109/л) |
0,37 |
0,29-0,46 |
0,51 |
0,40-0,67 |
0,42 |
0,31-0,63 |
0,50 |
0,45-0,67 |
P1=0,007 |
P1=0,009 |
|||||||
Лейкоциты/CD3+ |
3,99 |
3,37-5,03 |
3,84 |
3,18-4,54 |
3,51 |
3,02-4,63 |
3,81 |
3,06-4,40 |
Лейкоциты/CD19+ |
22,41 |
16,81-28,83 |
17,42 |
13,61-23,04 |
19,55 |
14,60-25,98 |
19,50 |
14,32-25,33 |
P1=0,023 |
||||||||
HLA-DR+/CD19+ |
1,42 |
1,17-1,80 |
1,47 |
1,32-1,88 |
1,50 |
1,25-2,00 |
1,48 |
1,23-2,00 |
CD4+/CD8+ |
1,33 |
1,15-1,67 |
1,37 |
1,06-1,52 |
1,32 |
1,13-1,62 |
1,36 |
0,96-1,64 |
Примечание: Р1 – статистически значимые различия с показателями контрольной группы; Р2 – статистически значимые различия с показателями больных ДТЗ до начала лечения.
Таблица 3
Состояние гуморального иммунитета крови у больных ДТЗ в динамике лечения (Ме, С 2 5-С 7 5)
Показатели |
Контроль, n=98 1 |
Больные ДТЗ |
||||||
До начала лечения, n=35 2 |
Через 1 месяц, n=33 3 |
Через 3 месяца, n=25 4 |
||||||
Ме |
С 25 -С 75 |
Ме |
С 25 -С 75 |
Ме |
С 25 -С 75 |
Ме |
С 25 -С 75 |
|
Ig A, (г/л) |
1,46 |
1,04-2,36 |
1,61 |
0,97-2,89 |
2,05 |
1,19-2,73 |
1,81 |
1,12-2,89 |
Ig M, (г/л) |
1,46 |
0,99-1,58 |
1,15 |
0,87-1,75 |
1,35 |
1,02-1,75 |
1,21 |
0,83-1,89 |
Ig G, (г/л) |
5,79 |
4,94-8,60 |
6,90 |
5,56-10,60 |
8,50 |
6,00-12,20 |
10,55 |
7,05-12,65 |
P1=0,012 |
P1=0,008 P2=0,030 |
|||||||
Ig A/CD19+, (нг/клетку) |
6,91 |
4,98-12,23 |
5,16 |
3,47-8,08 |
7,33 |
3,49-10,01 |
5,93 |
4,25-9,56 |
P1=0,045 |
P3=0,047 |
|||||||
Ig M/CD19+, (нг/клетку) |
5,45 |
4,03-8,09 |
4,44 |
2,17-7,28 |
4,92 |
3,18-8,04 |
3,62 |
2,50-6,54 |
P1=0,034 |
P1=0,032 |
|||||||
Ig G/CD19+, (нг/клетку) |
28,44 |
19,70-44,52 |
20,37 |
14,63-41,46 |
29,43 |
18,85-42,57 |
27,22 |
18,31-57,30 |
ЦИК, (о.е.) |
5,00 |
3,00-6,00 |
6,00 |
5,00-9,00 |
6,00 |
5,00-9,00 |
5,00 |
3,00-9,00 |
P1=0,047 |
P1=0,048 |
Примечание: Р1 – статистически значимые различия с показателями контрольной группы; Р2 – -//- больных ДТЗ до начала лечения; P3 – -//- больных ДТЗ через 3 месяца после начала лечения.
ного синтеза Ig M и по сравнению с 3-месячным периодом снижается величина относительного синтеза Ig A.
Состояние иммунного статуса у больных ДТЗ до начала лечения характеризуется повышенным содержанием общих лимфоцитов в периферической крови, цитотоксических Т-лимфоцитов, В- и HLA-DR+-клеток, что со стороны гуморального звена определяется снижением уровней относительного синтеза Ig A и Ig M и увеличением концентрации ЦИК в сыворотке. Необходимо отметить, что HLA-DR-ре-цептор экспрессируется на всех В-лимфоцитах и на активированных Т-клетках [8, 9]. Так как величина индекса активации Т-лимфоцитов у больных ДТЗ не отличалась от контрольных значений, можно заключить, что повышенное содержание HLA-DR+-клеток связано с увеличением количества В-лимфоцитов. Через 1 месяц лечения тиреостатиками у больных ДТЗ при сохранении повышенного содержания общих лимфоцитов и HLA-DR+-клеток количество цитотоксических Т-лимфоцитов снижается до диапазона норма, а уровень Т-хелперов увеличивается. Состояние гуморального иммунитета на этот период характеризуется увеличенной концентрацией Ig G и ЦИК. Через 3 месяца лечения тиреостатиками у больных выявляется увеличение содержания Т-лимфоцитов в периферической крови (за счет фракции цитотоксических Т-лимфоцитов), а также сохраняется увеличенный уровень В- и HLA-DR+-клеток. Изменения в гуморальном звене иммунитета определяются увеличением концентрации Ig G и снижением уровней относительного синтеза Ig A и Ig M.
Необходимо отметить, что при исследовании содержания аутоантител к тиреоидной пероксидазе (АТ к ТПО) в сыворотке крови установлено, что в динамике лечения концентрация аутоантител статистически значимо не изменялась. Так, если до начала лечения содержание АТ к ТПО соответствовало Ме=79,0 Ед (при интерквартальном разбросе 17,0-286,0), то через 1 месяц – Me=78,0 Ед (15,0-306,0), а через 3 месяца – Ме=40,0 Ед (5,0-219,0). В норме – Ме=1,0 Ед (при интерквартальном разбросе 0,0-3,0).
Таким образом, у больных ДТЗ до начала лечения иммунный статус характеризуется повышением содержания цитотоксических Т-лимфоцитов и В-кле-ток. Причем В-лимфоциты в периферическую кровь выходят со сниженной функциональной активностью. В течение 3-месячного периода лечения тиреостати-ками наблюдается волнообразное изменение величин показателей иммунного статуса, характеризующих состояние клеточного и гуморального звена иммунной системы. При этом нормализации состояния аутоиммунореактивности не наблюдается.
Список литературы Изменение иммунного статуса у больных диффузным токсическим зобом в динамике лечения тиреостатиками
- Фадеев В.В. Болезнь Грейвса//Русский медицинский журнал. -2002. -Т. 10, № 27. -С. 1262-1265.
- Rapoport B., McLachlan S.M. Thyroid autoimmunity//J. Clin. Invest. -2001. -Vol. 108, № 9. -Р. 1253-1259.
- Marazuela M. Lymphocyte traffic and homing in autoimmune thyroid disorders//European Journal of Endocrinology. -1999. -Vol. 140. -P. 287-290.
- Volpe R. Immunological aspects of thyroid disease//Triange. -1984. -Vol. 23, № 3/4. -P. 95-109.
- Mancini G., Carbonaro A.O., Haremans J.F. Immunochemical quantitation of antigens by single radial diffusion//Immunochemistry -1965. -Vol. 2. -№ 3. -P. 235-255.
- Haskova V., Kaslik J., Riha J., Rovensky J. Simple method of circulating immune complex detection in human sera by polyethylene glycol precipitation//J. Immunol. -1978. -Vol. 154. -P. 399-406.
- Земсков А.М., Земсков В.М. Дополнительные методы оценки иммунного статуса//Клиническая лабораторная диагностика. -1994. -№ 3. -С. 34-35.
- Bisset L.R., Lung T.L., Kaelin M. Reference values for peripheral blood lymphocyte phenotypes applicable to the healthy adult population in Switzerland//Eur. J. Haematol. -2004. -Vol. 72, № 3. -P. 203-212.
- Nakamura H., Idiris A., Kato Y., Kato H. An increase in the percentage of HLA-DR-positive peripheral leukocytes predicts a poor prognosis in patients with squamous cell carcinoma of the lung//Oncol. Rep. -2004. -Vol. 11, № 3. -P. 673-676.