Изменение сократительной активности изолированного отрезка тощей кишки кролика под влиянием токсина Т-2

Гладкая мышца кишечника – возбудимая ткань, тонко реагирующая на действие химических и физиологически активных веществ. К таким веществам относят и экзотоксин Т-2. Известно, что токсин Т-2 продуцируется в процессе жизнедеятельности плесневых грибов рода Fusarium. В организм человека и животных микотоксин попадает с пищей и кормом, вызывая геморрагический гастроэнтерит (2). Под влиянием токсина Т-2 нарушаются процессы ассимиляции и диссимиляции (5), изменяется активность ферментов (4). Поэтому представлялось целесообразным выяснить реакцию гладких мышц тощей кишки не действие токсина Т-2.

Материалы и методы. Эксперименты выполняли на изолированных отрезках тощей кишки трех половозрелых кроликов (6-8 мес.) живой массой 4-5 кг. При исследовании использовали стандартную установку для регистрации мышечных сокращений препарата отрезка тощей кишки (3). Препарат изолированного кишечника помещали в термостатируемую ванночку, содержащую 50 мл раствора Тироде, температуру которого поддерживали на уровне 37ºС, рН в пределах 7,2-7,4. Оксигенацию инкубационного раствора проводили пузырьками воздуха. В ванночку с биологическим объектом микотоксин вводили в концентрации 5∙10-6 и 2∙10-5 г/мл. Спонтанную моторику кишечника регистрировали по методике, описанной Р.Блатнером и соавт. (1983). Регистрацию кимограмм проводили до (фон) и после введения испытуемых веществ в ванночку с биологическим объектом.

Результаты исследований. Показателями реакции гладких мышц на действие токсина Т-2 служила степень изменения величин тонуса, частоты и амплитуды сокращений отрезка кишечника. Введение в раствор Тироде, омывающий препарат, токсина Т-2 в концентрации 5∙10^-6 г/мл (табл.1) сопровождалось тоническим напряжением мышцы и выражалось в повышении ее тонуса через 1 мин действия препарата на 2,5±1,57; через 2 мин - на 3,2±1,36; через 3 мин – на 7,0±1,63 и через 4 мин – на 7,7±1,99 мм.

Амплитуда сокращений кишечника, наоборот, уменьшалась: через 1 мин – на 8,3; 2 мин – на 11,3; 3 мин – на 21,9 (Р<0,05); 4 мин – на 17%, частота мышечных сокращений отрезка тощей кишки снижалась: через 1 мин на 4,6; 2 мин – на 2,3; 3 мин – на 4.6%, но эти изменения носили недостоверный характер. На 4-ой минуте опыта отмечено восстановление этого показателя до исходной величины. Отмывание биологического объекта свежим раствором Тироде приводило вначале к расслаблению гладких мышц кишечника и снижению их тонуса: через 1 мин опыта до 6,7±2,31; 5 мин – до 4,5±2,73. Затем, к 10 мин исследования отмечалось повышение величины этого показателя до 14,2 ±3,15 и к 20 мин – вновь его снижение. Однако к этому времени наблюдения величина этого показателя оставалась выше исходных фоновых величин на 8,5±2,02 мм. Одновременно наблюдалось возрастание амплитуда сокращений кишечника через 20 мин на 15,9% относительно исходных фоновых величин, снижение частоты сокращений через 1 мин – на 5,7 и 10 мин – на 2,3%, а через 20 мин опыта она не только полностью восстановилась, но и превысила уровень фона на 3,5%. Анализ результатов исследований реакции гладких мышц на действие токсина Т-2 показал, что моторная деятельность кишечника половозрелых кроликов существенно изменялась под действием этого токсина. Отмывание в течении 20 мин частично нормализовало моторную деятельность биологического объекта.

Для оценки зависимости реакции биологического объекта от силы действия раздражителя, провели опыты по изучению изменений моторной деятельности кишечника под влиянием токсина Т-2 в более высокой концентрации (табл.2).

Создание в инкубационном растворе токсина Т-2 в концентрации 2х105 г/мл приводило к ослаблению напряжения гладких мышц, что выражалось в снижении их тонуса через 1 мин на 1,2±0,139: 2 мин – на 1,5±0,174: 3 мин – на 2,2±0,209; 4 мин – на 2,3±0,244 мм. Учащение спонтанных мышечных сокращений под действием токсина Т-2 в данной концентрации происходило непоследовательно и колебалось от 4,8 до 8,4%. Амплитуда мышечных сокращений снижалась через 1 мин опыта на 61,6 (Р<0,05), 3 мин - на 61,1 (Р<0,05) и 4 мин – на 58,6% (Р<0,05).

• 1.    Реакция гладких мышц тощей кишки половозрелых кроликов на действие токсина Т-2 в концентрации 5∙10^-6 г/мл (п=15)

  Параметры	Стат. показ	До введения Т-2	После введения Т-2, через мин				После отмывания, через мин
  			1	2	3	4	1	5	10	20
  Амплитуда, мм	М ±м	26,50 ±1, 28	24,30 ±1,20	23,50 ±1,26	20,70* ±1,05	22,00 ±1,19	21,70* ±1,11	25,90 ±1,23	22,80 ±1,05	30,70 ±1,34
  Частота, мин	М ±м	8,70 ±0,21	8,30 ±0,21	8,50 ±0,21	9,30 ±0,21	8,70 ±0,21	8,20 ±0,42	8,70 ±0,21	8,50 ±0,21	9,00 ±0,18
  Тонус, мм	М ±м		+2,50 ±1,57	+3,20 ±1,36	+7,00 ±1,68	+7,70 ±1,99	+6,70 ±2,31	+4,50 2±,73	+14,20 ±3,15	+8,50 ±2,62

• 2.    Реакция гладких мышц тощей кишки половозрелых кроликов на действие токсина Т-2 в концентрации 2∙10^-5 г/мл (п=15)

  Параметры	Стат показ.	До введения Т-2	После введения Т-2, через мин					После отмывания, через мин
  			1	2	3	4	5	1	10-15	20
  Амплитуда, мм	М ±м	19,8 ±0,31	12,20* ±0,45	11,80* ±0,38	12,10* ±0,55	11,60* ±0,69	11,70* ±0,62	21,30 ±0,76	25,30* ±0,62	30,00* ±0,97
  Частота, мин	М ±м	8,30 ±,16	8,70 ±0,16	9,00* ±0,13	8,70 ±0,17	8,80 ±0,18	8,70 ±0,16	9,00* ±0,13	10,00* ±0,17	9,60* ±0,19
  Тонус, мм	М ±м		-1,20 ±0,14	-1,50 ±0,17	-2,20 ±0,21	-2,30 ±0,24	-2,3 ±0,30	-2,5 ±0,24	-4,7 ±0,28	-5,3 ±0,28

* - Р < 0,05 в сравнении с контрольными величинами. Примечание: различия считали достоверными (Р<0,05)

Отмывание изолированного отрезка тощей кишки новым раствором Тироде вызывало дальнейшее расслабление гладких мышц, снижение тонуса составило через 1 мин на 2,5±0,244; 10…15 мин – на 4,7±0,278 и 20 мин – на 5,3±0,278 мм ниже исходного уровня. Спонтанная активность при отмывании возрастала через 10…15 мин на 20,5 (Р<0,05) и 20 мин – на 15,7% (Р<0,05) относительно фоновых показателей. Амплитуда спонтанных мышечных сокращений увеличивалась через 1 мин – на 82,1 (Р<0,05); 10…15 мин – на 116,2 (Р<0,05); 20 мин – на 156,4% (Р<0,005) и оставалась выше исходных показателей через 1 мин – на 7,6; 10…15 мин – на 27,8 (Р<0,05); 20 мин – на 51,5% (Р<0,05).

Обсуждение. Сократительная деятельность гладкомышечных тканей кишечника половозрелых кроликов изменялась под действием токсина Т-2. Характер и степень изменения тонического напряжения, частоты и силы спонтанных мышечных сокращений изолированного отрезка тощей кишки зависели от концентрации микотоксина. Тоническое напряжение гладких мышц кишечника при действии низкой концентрации микотоксина возрастало, высокой – ослабевало. Нарастание тонического напряжения под влиянием токсина в концентрации 5∙10-6 г/мл сопровождалось снижением частоты и амплитуды ритмических сокращений биологического объекта. Отмывание отрезка кишечника раствором Тироде приводило в первые минуты к снижению его тонуса частоты и амплитуды моторики с последующим резким ростом этих показателей. В дальнейшем, тоническое напряжение несколько ослабилось, но амплитуда и частота сокращений продолжали расти. Повышение концентрации микотоксина до 2∙10-5 г/мл вызывало расслабление кишечника, снижение тонуса и амплитуды сокращений с одновременным нарастанием частоты. Отмывание биологического объекта раствором Тироде приводило к дальнейшему расслаблению гладких мышц, еще большему снижению тонуса отрезка кишки, повышению частоты и амплитуды его спонтанной активности. Изменения частоты и амплитуды сокращений кишечника носили волнообразный характер.

Выводы. 1. Реакция гладких мышц кишечника на действие Т-2 токсина выражалась в изменении тонического напряжения, частоты и амплитуды сокращений. Характер этих изменений зависел от концентрации микотоксина. 2. Моторная деятельность биологического объекта после устранение действия токсина Т-2 частично нормализовалась, но полного восстановления тонуса и амплитуды сокращений не происходило.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Блатнером P., Классен Х., Денерт Х., Деринг Х. Эксперименты на изолированных препаратах гладких мышц. М.: Мир, 1983. – 206 с.; 2. Пилипенко М.Е., Бырка Б.С., Котик А.Н., Труфанова Б.А. Гистологические изменения в органах гусят при экспериментальном Т-2 токсикозе // Научно-техн. Бюллетень. – 1986. – 320с. – С.47-49; 3. Эндрю

Б.Л.. Экспериментальная физиология. М.: Мир, 1974. – 350с.; 4. Hayes M.A., Schiefer H.B. Comparative toxicity of dietary T-2 toxin in rat and mice. // J.Appl. Toxicol. – 1982. - 2. – 4. – P. 207-212; 5. Weaver G.A. The failure of purified T-2 micotoxin to produce hemorrhaging in dairy cattle. // Can. Vet. J. – 1980. – 21. – 7. – P 210-213.

ИЗМЕНЕНИЕ СОКРАТИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ИЗОЛИРОВАННОГО ОТРЕЗКА ТОЩЕЙ КИШКИ КРОЛИКА ПОД ВЛИЯНИЕМ ТОКСИНА Т-2

Гарипов Т.В. , Уразаева Л.А.

Резюме

Установлено, что моторная деятельность кишечника половозрелых кроликов существенно изменялась под действием токсина Т-2. Характер и степень изменения тонуса, частоты и амплитуды спонтанных мышечных сокращений изолированного отрезка тощей кишки кролика зависели от концентрации яда. Устранение действия токсина Т-2 посредством отмывания в течение 20 мин частично нормализовало моторную деятельность биологического объекта. Однако полного восстановления тонуса и амплитуды сокращений не происходило.

THE REACTION OF RABBIT’S JEJERUM SMOOTH MUSCLES TO THE ACTION OF

TOXIN T-2

Garipov T.V., Urazaeva L.A.