Изменения популяционного спектра лимфоцитов у молодых пациентов с сезонным аллергическим ринитом после специфической иммунотерапии

В настоящее время, согласно данным ВОЗ и результатам исследований различных авторов в европейских странах, аллергией страдает от 10 до 30 % населения [1]. Сезонный аллергический ринит (САР) в общей структуре аллергических заболеваний занимает одно из первых мест [2]. Одним из основных методов лечения САР является специфическая иммунотерапия (СИТ), основанная на введении причинно значимых аллергенов пациентам в возрастающих дозах.

Целью данного исследования является сравнение данных популяционного и субпопуляционного спектра лимфоцитов, процессов активации и апоптоза у молодых пациентов с САР до и после специфической иммунотерапии.

Материалы и методы. В исследование включено 64 пациента. Критериями включения были: верифицированный диагноз САР; отсутствие ранее проводимой СИТ; возраст от 18 до 24 лет. Средний возраст обследуемых - 20,3 лет. По данным российских и зарубежных авторов, этот возрастной период является пиком заболеваемости САР [3].

Проводилось комплексное обследование, включающее сбор анамнеза, оценку объективного статуса, общие анализы крови и мочи, риноцито-граммы, оценку ФВД и постановку аллергических кожных проб.

Для лечения были использованы водносолевые экстракты пыльцевых аллергенов отечественного производства (ФГУП «Микроген», г. Ставрополь) и аллергены для перорального использования («Sevapharma», Чехия).

В соответствии с целью и задачами исследования у пациентов изучались показатели популяционного и субпопуляционного спектра лимфоцитов с использованием непрямого метода иммунофлюоресценции с применением моноклональных антител серии ICO производства НИИ «Препарат» Н. Новгород. Процессы акти вации лимфоцитов оценивали с помощью маркеров CD25, CD71, HLA-DR, CD95, морфологические признаки апоптоза лимфоцитов в окраске ядерным красителем Hoechst 33342 (Boehringer Mannheim). Оценку иммунологических показателей проводили в периоде ремиссии, в периоде обострения до начала СИТ, далее в фазе сезонного обострения по окончанию первого и второго полного курса лечения аллергенами. Все участники исследования дали информированное письменное согласие на проведение полного объема диагностического обследования, полного курса СИТ.

Полученные данные обрабатывались с применением пакета прикладных программ STATISTICA for Windows версия 6.0 фирмы StatSoft Inc. (США). Различия считали статистически значимыми при уровне р < 0,05.

Результаты исследования. Исследуемые иммунологические показатели у больных с САР в периоды ремиссии и обострения (до СИТ) представлены в табл. 1.

Из табл. 1 следует, что в обострение заболевания по сравнению с ремиссией до начала лечения у молодых пациентов достоверно увеличивается абсолютное количество лимфоцитов и CD3+, CD4+ популяций Т-лимфоцитов, CD22+ клеток. Одновременно происходит рост числа клеток с маркерами позитивной активации (CD25+, CD71+, HLA-DR). Изучение процессов негативной активации лимфоцитов выявило рост абсолютного числа лимфоцитов, экспрессирующих рецепторы готовности к апоптозу (CD95+), при отсутствии увеличения числа клеток с морфологическими признаками апоптоза. Подобные изменения соответствуют существующим представлениям, что в основе патогенеза данной иммунопатологии лежат гипе-рергические процессы, сопровождающиеся усилением процессов активации и лимфопролиферации.

Проблемы здравоохранения

Уже после первого курса СИТ клинически у пациентов отмечено существенное уменьшение симптомов сезонного обострения заболевания, на этом фоне изменения иммунологических параметров при сопоставлении данных ремиссии и сезонного обострения были минимальными.

Исследуемые иммунологические показатели у больных с САР в периоды ремиссии и после 1 курса СИТ представлены в табл. 2.

Как видно из табл. 2, после первого курса СИТ в период сезонного обострения по сравнению с ремиссией заболевания общее число лимфоцитов остается без изменения, но достоверно увеличивается абсолютное количество CD3+, CD 16+ популяций Т-лимфоцитов, при отсутствии изменения количества CD4+, CD8+ и CD22+ клеток. Отмечается рост числа клеток с маркерами позитивной (CD25+, CD71+, HLA-DR) и негативной активации (CD95+), при отсутствии увеличения числа клеток с апоптотической фрагментацией ядра.

Таблица 1

Показатели популяционного и субпопуляционного спектра лимфоцитов, клеток с маркерами активации и апоптоза у молодых пациентов с САР в период ремиссии и обострения до СИТ

Показатель	Ремиссия				Обострение до СИТ				Р
	п	Me	Q25	Q75	п	Me	Q25	Q75
Лимф.х107/л	41	148	121	176	20	202,5	170,92	244,13	0,01
СПЗ+х107/л	41	0,9	0,8	1	20	1,20	1,02	1,32	0,01
СП4+х107л	41	0,5	0,5	0,6	20	0,71	0,56	0,75	0,04
СП8+х107/л	41	0,3	0,3	0,4	20	0,43	0,38	0,49	0,07
CD4\CD8	41	1,6	1,5	1,7	20	1,6	1,5	1,6	0,67
СП16+х107/л	41	0,2	0,2	0,3	20	0,34	0,31	0,38	0,39
СП22+х107/л	41	0,3	0,2	0,4	20	0,43	0,41	0.48	0,01
СО25+хЮ7/л	41	0,2	0,1	0,2	20	0,30	0,29	0,32	0,01
СП71+х107л	41	0,1	0,1	0,2	20	0,28	0,23	0,34	0,02
СП95+х107/л	41	0,1	0,1	0,2	20	0,18	0,17	0,20	0,02
НЬА-ПКх107/л	41	0,3	0,2	0,3	20	0,43	0,37	0,43	0,01
Апоптозх109/л	41	0	0	0,1	20	0,06	0,05	0,09	0,34

Таблица 2

Показатели популяционного и субпопуляционного спектра лимфоцитов, клеток с маркерами активации и апоптоза у молодых пациентов с САР в период ремиссии и обострения после 1 курса СИТ

Показатель	Ремиссия				Обострение после 1 курса СИТ				Р
Лимф.х107/л	41	148	121	176	40	158,3	137,5	171,58	0,35
СПЗ+х107/л	41	0,9	0,8	1	40	0,97	0,87	1,10	0,029
СП4+х107л	41	0,5	0,5	0,6	40	0,55	0,49	0,61	0,38
СП8+х107л	41	0,3	0,3	0,4	40	0,36	0,31	0,40	0,16
CD4\CD8	41	1,6	1,5	1,7	41	1,5	1,5	1,6	0,053
СО16+хЮ7/л	41	0,2	0,2	0,3	40	0,28	0,22	0,34	0,004
СО22+хЮ7/л	41	0.3	0,2	0,4	40	0,35	0,29	0,40	0,109
СП25+х107/л	41	0,2	0,1	0,2	40	0,21	0,18	0,27	0,00009
СО71+хЮ7л	41	0,1	0,1	0,2	40	0,22	0,18	0,25	0,000003
СП95+х107/л	41	0,1	0,1	0,2	40	0,17	0,14	0.2	0,000036
НЬА-ПКх107/л	41	0,3	0,2	0,3	40	0,35	0.29	0,40	0,000443
Апоптозх109/л	41	0	0	0,1	39	0,05	0,02	0,08	0,272

Белкина И.Н., Теплова С.Н.

Изменения популяционного спектра лимфоцитов у молодых пациентов с сезонным аллергическим ринитом...

В результате проведения 1 и 2 курса СИТ у молодых людей с САР клинически был получен хороший эффект у 77 % пациентов, что проявлялось уменьшением выраженности симптомов при обострении.

Исследуемые иммунологические показатели у больных с САР в периоды ремиссии и обострения после 2 курсов СИТ представлены в табл. 3.

Как видно из табл. 3, в обострение заболевания после двух курсов СИТ по сравнению с ремиссией, достоверно увеличивается абсолютное количество CD3+, CD4+, CD8+ популяций Т-лимфоцитов, CD 16+ и CD22+ клеток. Происходит рост клеток с маркерами позитивной активации (CD25+, CD71+, HLA-DR) и негативной активации нием активной реакции иммунной системы на причинно значимый аллерген. Хорошо известно, что десенсибилизирующий эффект СИТ является следствием активного ответа Т-регуляторных клеток, результатом переключения синтеза IgE на продукцию иммуноглобулинов вторичного иммунного ответа, следствием изменения характера Т хелпер-1 / Т хелпер-2 поляризации, что приводит к росту численности разных популяций лимфоцитов, к их активации. Установлено, что в период обострения аллергического ринита после проведенных курсов лечения количество лимфоцитов с морфологическими признаками апоптоза не меняется. В целом полученные данные дополняют существующие литературные данные о том, что спе-

Таблица3

Показатели популяционного и субпопуляционного спектра лимфоцитов, клеток с маркерами активации и апоптоза у молодых пациентов с САР в период ремиссии и обострения после двух курсов СИТ

Показатель Ремиссия Обострение после 2 курсов СИТ Р п Me Q25 Q75 п Me Q25 Q75 лимф.х107/л 41 148 121 176 21 185 149,1 218,4 0,038 СОЗ+хЮ7/л 41 0,9 0,8 1 21 1,06 0,95 1,3 0,006 СП4+х107/л 41 0,5 0,5 0,6 21 0,64 0,55 0,74 0,049 СП8+х107/л 41 0,3 0,3 0,4 21 0,4 0,33 0,5 0,026 CD4\CD8 41 1,6 1,5 1,7 21 1,6 1,5 1,6 0,285 СП16+х107/л 41 0,2 0,2 0,3 21 0,33 0,26 0,37 0,007 СП22+х107/л 41 0,3 0,2 0.4 21 0,42 0,35 0,48 0,0054 СО25+хЮ7/л 41 0,2 0,1 0,2 21 0,25 0,2 0.27 0,009 СО71+хЮ7/л 41 0,1 0,1 0,2 21 0,24 0,21 0,3 0,005 СО95+хЮ7/л 41 0,1 0,1 0,2 21 0,17 0,14 0,22 0,007 HLA-DRx107/h 41 0,3 0,2 0,3 21 0,35 0.27 0,41 0,04 апоптозх109/л 41 0 0 0,1 20 0,05 0,0375 0,073 0,09 лимфоцитов(СО95+), при отсутствии увеличения числа клеток с признаками апоптоза. Иными словами, на фоне клинического улучшения течения фазы сезонного обострения САР выявляются достоверные и выраженные изменения со стороны популяционного спектра иммуноцитов и процессов активации этих клеток.

Обсуждение полученных результатов. Анализ популяционного спектра лимфоцитов у пациентов при обострении после проведенной СИТ свидетельствует, что оптимизация клинического состояния больных в период сезонной экзацерба-ции заболевания сопровождается признаками выраженной возмущенное™ иммунного гомеостаза, несмотря на проведение двух курсов лечения. Подобные изменения являются ожидаемыми, т.к. торможение воспалительной аллергической реакции у пациентов после СИТ связано с формирова- цифическая гипосенсибилизация является активным процессом, а не результатом гибели или отсутствия ответа со стороны лимфоцитов.

Выводы:

• 1.    Для периода обострения сезонного аллергического ринита у молодых пациентов до начала аллерген специфической иммунотерапии характерна гиперергическая реакция иммунной системы, проявляющаяся увеличением абсолютного количества лимфоцитов и их CD3+, CD4+ популяций, ростом числа клеток с маркерами позитивной (CD25+, CD71+, HLA-DR) и негативной (CD95+) активации, при отсутствии увеличения числа клеток с морфологическими признаками апоптоза.

• 2.    На фоне положительного эффекта СИТ у 77 % пациентов в период сезонного обострении САР даже после проведения двух курсов СИТ не

Проблемы здравоохранения

происходит приближения популяционного и субпопуляционного спектра лимфоцитов, числа клеток, несущих маркеры активации к уровню ремиссии, что отражает активный характер формирующейся под влиянием лечения толерантности к причинно значимым аллергенам.