Изучение антиоксидантного действия адаптогенных добавок для коров в стрессогенных условиях промышленного содержания

ных систем, включающих ферментативные и неферментативные антиоксиданты, блокирующие вредное воздействие активных форм кислорода [1].

Однако, при патологических состояниях наблюдается перегрузка эндогенных антиоксидантных систем, что требует введения в организм животного дополнительных веществ антиоксидантно-адаптогенного действия. Перед учёными и практиками стоит задача поиска и разработки новых эффективных адаптогенных средств для животных. В настоящее время для коррекции метаболических нарушений при стрессах учёные предлагают различные способы. Так, например, гомеопатические препараты предлагают Оробец В.А. и Сапожникова О.Г. О возможности использования в стрессовых условиях фармакологических седативных средств, нейролептиков и транквилизаторов сообщают Клёнова И.Ф. и Ярёменко Н.А. [8]. При использовании этих препаратов стоит учитывать их высокую стоимость, непродолжительное действие, а также способность аккумулироваться в животном организме. Наиболее доступными для животных и человека считаются препараты адаптогенного действия, полученные на основе природного экологичного сырья [4].

Материалы и методы исследований

Задачей наших исследований была разработка адаптогенной добавки для коров молочного комплекса ООО «АПК Юность» Орловская области. Предварительная физиолого-биохимическая оценка, оценка оксидантно-антиоксидантного статуса показали наличие у них окислительного стресса. Нами были предложены и изучены две биологические добавки на основе прополиса и радиолы розовой по отдельности и в двух варианта болюсов. При разработке биологи- ческой добавки в модельной системе перекисного окисления липидов (ПОЛ) in vitro изучали антисво-боднорадикальное действие прополиса и радиолы розовый по отдельности и далее предполагаемые свойства изучали в двух вариантах болюсов:

• 1)    в болюсе на основе прополиса, яблока, моркови.

• 2)    в болюсе на основе прополиса, яблока, моркови, родиолы розовой.

Изучение предлагаемых препаратов проводили по следующей схеме, представленной на рисунке 1.

• •    Изучение литературных источников с целью изыскания средств, обладающих антиоксидантными и адаптогенными свойствами, имеющих богатый химический состав с широким биологическим действием.

• Приготовление липосом.

Окисление липосом в приготовленных суспензиях липосом в контрольной и опытных модельных системах (с добавлением прополиса, родиолы розовой).

• •    Определение антиоксидантной активности прополиса, родиолы розовой в модельных системах ПОЛ по снижению уровня малонового диальдегида.

Приготовление адаптогенно-антиоксидантных болюсов.

Состав:

• • Болюс № 1 — прополис 20 г, яблоко 30 г, морковь 30 г, и ржаная мука 10 г в качестве формообразующей основы;

• •    Болюс № 2 — прополис 20 г, родиола розовая 20 г, яблоко 30 г. морковь 30 г, и ржаная мука 10 г в качестве формообразующей основы.

Проверка физико-химических свойств и биологической активности болюсов в процессе хранения.

Рис. 1 - Этапы создания адаптогенно-антиоксидантных болюсов

Результаты исследований и их обсуждение

Болюс № 1 готовили следующим образом: в ступку помещались 20 г прополиса, предварительно нарезанные яблоки (30 г) и морковь (30 г). Болюс № 2 кроме перечисленных составляющих включал дополнительно 20 г родиолы розовой. Все компоненты измельчали по отдельности, а далее их смешивали с добавлением ржаной муки и дистиллированной воды с последующим перемешиванием до тестообразной консистенции, что является необходимым для формирования болюсов. Чтобы исключить слипание между собой болюсы посыпали ржаной мукой и проводили оборачивание вощеной бумагой.

При изготовлении болюсов использовали свежие ингредиенты, что гарантировало быстрое высвобождение биологически активных веществ для процессов пищеварения. Предлагаемые добавки задавали в течение 35 дней (один болюс в утреннее кормление).

Наличие животных с оксидативным стрессом выявляли, определяя малоновый диальдегид (МДА) в сыворотке крови в качестве его маркера, по методике, основанной на взаимодействии МДА с тиобарбитуро-вой кислотой. Оптическую плотность опытной и контрольной проб измеряли на фотоэлектроколориметре при двух длинах волн: 532 нм и 600 нм, используя кюветы объемом 1,0 см3. Содержание МДА в сыворотке крови рассчитывали по формуле (1):

(Bl-DZ)*uz

с = -----------

МДА E'l’Ul

ММОЛЬ/Л

(1), где:

D1 – показывает оптическую плотность пробы с сывороткой;

D2 – оптическую плотность контрольного раствора;

U2 – итоговый объем смеси, мл;

U1 – объем сыворотки, мл;

l – показатель длины кюветы, см;

Ԑ – коэффициент экстинкции, равный 156 мМ-1·см-1.

Активность антиоксиданта церулоплазмина (ЦП) определяли с помощью экспресс-метода (по Э. В. Тэну).

Результаты проведенных исследований по влиянию болюсов на основе прополиса и родиолы розовой на оксидантно-антиоксидантную систему коров с патологическим состоянием промышленного хронического стресса показали, что применение этих средств нормализует изучаемые показатели. На рисунках 3 и 4 представлена характеристика уровня перекисного окисления липида по значениям МДА до применения и после использования дополнительно к основному рациону предлагаемых болюсов. Из рисунка 2 видно, что уровень МДА в сыворотке крови коров, в кормление которых не использовались предлагаемые болюсы, значительно превышал референтные значения (на 92,50 %), а активность ЦП была ниже (на 8,75 %).

1,6 1,4 1,2

1 0,8 0,6 0,4 0,2

Референтные значения

Рис. 2 - Содержания малонового диальдегида и активность церулоплазмина в крови голштинских коров по сравнению с референтными значениями

Рис. 3 - Характеристика малонового диальдегида в крови голштинских коров, получавших болюсы адаптогенно-антиоксидантного действия

Рис. 4 - Церулоплазмина в крови голштинских коров, получавших болюсы адаптогенно-антиоксидантного действия

При использовании болюсов на основе прополиса (1 группа) и прополиса в комплексе с радиолой розовой (2 группа) в кормлении голштинских коров при промышленном стрессе дополнительно к основному рациону установлена нормализация работы антиоксидантной системы, что проявлялось в снижении уровня МДА на 28,6% и 33,8% в 1-ой и 2-ой группах соответственно; при этом активность церулоплазмина повысилась в первой группе на 9,8% во второй на 10,9%.

Вывод. На основании проведённых исследований предлагаем производству использование биологических добавок в форме болюсов на основе прополиса и прополиса с радиолой розовой с целью коррекции нарушений в оксидантно-антиоксидантной системе и метаболическом статусе в целом.