Изучение антиоксидантной активности агарициновой кислоты

заболеваниях, сердечно-сосудистой патологии, токсических поражениях печени и т.д., позволяет заметно уменьшить интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) и другие последствия деструктивного действия свободных радикалов, а также снизить выраженность того или иного патологического процесса .

Одним из перспективных путей при разработке новых лекарственных средств является поиск новых биологически активных соединений среди природных объектов. Базидиоми-цетовые грибы являются источником получения ряда высокоэффективных соединений с противоопухолевой активностью, антибиотиков, антисклеротических препаратов. Уникальным объектом исследования по своему химическому составу является лиственничная губка, или трутовик лекарственный (Fomitopsis officinalis (Will.) Bond.et Singer, сем. Polypo-raceae). Плодовое тело гриба, паразитирующего на лиственнице, реже пихте накапливает до 10% по отношению к массе сырья агарициновой кислоты, до 80% смолистых веществ кислотного характера, эбурикоевую кислоту, полисахариды и другие биологически активные соединения. По данным зарубежных авторов, агарициновая кислота (C 19 H 36 OH(COOH) 3 ) проявляет противоопухолевое действие [1].

Цель настоящего исследования: изучение антиоксидантной активности (АОА) выделенной из плодового тела трутовика лекарственного агарициновой кислоты.

Материалы и методика . Для изучения антиоксидантной активности использовали образец агарициновой кислоты, выделенный из плодового тела трутовика лекарственного, собранного на лиственнице в Алтайском крае

• [4 ]. Кислота мало растворима в воде, растворима в спирте, диметилсульфоксиде.

Антиоксидантное действие агарициновой кислоты было изучено in vitro на модели Fe²⁺-индуцированного ПОЛ в липосомальной системе, полученной на основе фосфатидилхо-лина. Липосомы получали из яичного фосфа-тидилхолина при концентрации липидов 40 мг/мл [6]. Эффективность антиоксидантного действия оценивали по степени ингибирования интенсивности ПОЛ липосом в опытных образцах по отношению к контрольным. Интенсивность ПОЛ липосом измеряли по накоплению тиобарбитуровой кислоты (ТБК)-активных продуктов за 15 мин инкубации. Реакцию проводили на водяной бане при 37°С. В опытные образцы вносили соответствующие исследуемые фракции. В контрольные пробы добавляли только растворитель (спирт 60% или масло подсолнечное очищенное дезодорированное). Интенсивность поглощения ТБК-активных продуктов измеряли на спектрофотометре СФ-2000 при длине волны 532±2 нм [2]. Рассчитывали процент торможения ПОЛ по отношению к контрольной пробе. В качестве критерия для оценки антиоксидантной активности исследуемого соединения рассчитывали значение коэффициента I 50 , который показывает концентрацию вещества в среде инкубации, вызывающую снижение интенсивности ПОЛ на 50%.

Результаты и обсуждение. В табл. 1 представлены данные о влиянии раствора агарициновой кислоты в диметилсульфоксиде (ДМСО) и спирте этиловом 95% на накопление ТБК-активных продуктов (в %) в соответствующих концентрациях. Концентрация агарициновой кислоты в спирте этиловом 95%, при которой продукция свободных радикалов была подавлена в наибольшей степени, составила 5,0∙10-4%, а при растворении агарициновой кислоты в ДМСО, концентрация, при которой была практически полностью остановлена выработка свободных радикалов составила 6,25∙10-4% (снижена на 87%). Таким образом, исследуемое соединение обладает способностью ингибировать образование ТБК-активных продуктов в используемой системе, что свидетельствует о наличии у него антиоксидантной активности. Для сравнения снижения накопления перекисных соединений в опыте с агарициновой кислотой был исследован кверцетин. Данные представлены в табл. 2.

Таблица 1. Влияние агарициновой кислоты на интенсивность Fe²⁺-индуцированного ПОЛ в суспензии липосом из яичного лецитина

Таблица 2. Влияние кверцетина на интенсивность Fe²⁺-индуцированного ПОЛ в суспензии липосом из яичного лецитина

Как следует из табл. 2, кверцетин практически полностью подавляет накопление по-дуктов пероксидации в концентрации 1,52∙10^-2 (торможение на 98,7%). Для сравнения эффективности антиоксидантного действия были построены графики зависимости процента снижения интенсивности ПОЛ от разведения в среде инкубации и рассчитаны коэффициенты I 50 , значения которых приведены в табл. 3.

Таблица 3. Значения коэффициента I 50 исследуемых фракций в системе Fe²⁺-индуцированного ПОЛ липосом

Выводы: результаты исследований позволили установить наличие АОА агарициновой кислоты. Наибольшая антиоксидантная активность в системе липосом на модели Fe²⁺-индуцированного ПОЛ, выявлена у агарициновой кислоты в ДМСО, по сравнению со спиртовым раствором. Установленное снижение накопления перекисных соединений изучаемой кислоты было исследовано в сравнении с кверцетином.