Изучение фагочувствительности патогенных изолятов культур микроорганизмов к пассированным бактериофагам

Проблема использования фагов для профилактики и терапии бактериальных инфекции, как в медицине, так и в ветеринарии, была предметом изучения многих исследователей [3, 6, 5, 2] .

В настоящее время в медицинской практике широко применяют при лечении и профилактике различных инфекционных заболеваний человека: дизентерия, паратиф, стафилококковых и стрептококковых поражений, а также холеры, анаэробных и других инфекций [4].

В ветеринарии наиболее широко фаги начали применяться при различных заболеваниях птиц, телят и свиней. Так, К.Н.Шерстобоев [7] сообщает об эффективном лечебно-профилактическом действии бактериофага при геморрагической септицемии крупного рогатого скота, паратифозном аборте лошадей, паратифе свиней, телят и при дизентерии поросят.

Бактериофаги были успешно применены также для профилактики и лечения анаэробной энтеротоксемии телят [5] и пушных зверей [2] . Причем, фаготерапия оказала лучший эффект, чем курс антибиотикотерапии на 20-21%.

Однако, в доступный нам литературе, мы не нашли данных о применении бактериофагов при различных патологических процессах в репродуктивных органах самок сельскохозяйственных животных, особенно при инфицировании гениталиев различными условнопатогенными бактериями, вызывающими воспалительные процессы в последних.

Определение диапазона литического действия вышеуказанных бактериофагов проводили по общепринятой методике [1].

Как видно из таблицы 1 из 53-х изолятов культур стафилококков, выделенных из половых органов больных коров, диапазон литического действия стафилококкого бактериофага НПЛ «ВАК-ФАГ» составил 14

культур или 26,41%, полифага НПО «Иммунопрепараты» -18 (33,96%) и стафилококкого бактериофага НПО «Бактериофаг» -22 (41,51%) культур.

1. Чувствительность выделенных из содержимого матки патогенных культур микроорганизмов к различным бактериофагам

Наименова ние культуры	Количес тво изучае мых культур	ДЕЙСТВИЕ ФАГОВ РАЗЛИЧНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ
		Бактериофаги НПЛ «ВАК-ФАГ» г. Ульяновск		Полифаг НПО «Иммунопре параты» г. Уфа		Стаф. фаг НПО «Бактериофаг» г. Тбилиси		ФАГ смешанный
		кол-во	%	кол-во	%	кол-во	%	кол-во	%
Staph. aureus	53	14	26,41	18	33,96	22	41,51	31	58,49
E. coli	54	18	33,33	27	50,0	-	-	37	68,52
Pr. vulgaris	43	14	32,56	22	51,16	-	-	26	60,46
Str. haemolyt.	44	26	59,09	-	-	-	-	-	-
Past. multocida	13	8	61,54	-	-	-	-	-	-

Примечание: “ – “ – отсутствие фаговых препаратов.

Чувствительность выделенных 54-х изолятов культур Е.coli к бактериофагам НПЛ «ВАК-ФАГ» составила 18(33,33%) и полифагу НПО «Иммунопрепараты» 27 или 50% культур.

Диапазон литического действия протейных фагов НПЛ «ВАК-ФАГ» и полифаг НПО «Иммунопрепараты» составил 32,36 и 51,16% соответственно.

Из 44-х культур Str. hemalyticus к гомологичному бактериофагу (НПЛ «ВАК-ФАГ») проявило чувствительность 26 (59,09%), пастереллезный фаг, изготовленный в лаборатории «ВАК-ФАГ», из 13-ти выделенных культур пастерелл лизировали 8 или 61,54%.

Анализируя вышеуказанных данных, можно отметить, что спектр литического действия изученных серийных бактериофагов несколько отличался.

Исходя из этого, для получения бактериофагов широкого спектра литического действия, мы отобрали бактериофаги, лизировавшие наибольшее количество различных штаммов патогенных изолятов культур микроорганизмов выделенных из половых органов больных коров.

У сконструированных нами комбинированных специфических фагов, также был определен диапазон литического действия. Как видно из таблицы 1, сконструированные нами комбинированные фаги обладали более широким диапазоном литического действия, чем входящие в их состав серийные фаги в отдельности.

При изготовлении стафилококкового бактериофага широкого спектра действия были смешаны в равной пропорции полифаг НПО

«Иммунопрепараты» и стафилококковый фаг НПО «Бактериофаг». Для изготовления коли, протейных фагов использовали специфические бактериофаги НПЛ «ВАК-ВАГ» и полифаг НПО «Иммунопрепараты».

Так, комбинированный стафилококковый фаг из 53-х исследованных изолятов культур стафилококков лизировал 31 (58,49%). Диапазон литического действия смешанного коли-фага составил 68,52% т.е. из 54-х патогенных изолятов культур E. coli фагом лизировалось 37. Комбинированный протейный фаг из 43-х гомологичных культур лизировал 26 (60,46%).

Для дальнейшего повышения активности специфических бактериофагов были сделаны шестикратные, последовательные пассажи на гомологических культурах возбудителей, которые не проявили к ним чувствительность. Данные о диапазоне литического действия бактериофагов после пассажей приведены в таблице 2.

2 . Диапазон литического действия бактериофагов после шестикратного пассажа

Бактериофаги	Количество изучаемых культур	Из них проявили чувствительность
		количество	%
1 .Комбинированный стафилококковый
а) исходный	53	31	58,49
б) пассрованный	53	38	71,70
2.Комбинированный коли-фаг
а) исходный	54	37	68,52
б) пассированный	54	40	74,07
З.Комбинированный протейный
а) исходный	43	26	60,46
б) пассированный	43	30	69,76
4.Стрептококковый
а) исходный	44	26	59,09
б) пассированный	44	28	63,64
5.Пастереллезный
а) исходный	13	8	61,54
б) пассированный	13	10	76,92

Из таблицы видно, что пассированием бактериофагов удалось расширить диапазон их литического действия. Так, диапазон литического действия пассированного стафилококкового бактериофага составил 71,70%, что на 13,21% превышал диапазон исходного комбинированного фага. Пассирование коли-фага повысило диапазон его литического действия, по сравнению с исходным, на 5,55%. Пассированным комбинированным протейным фагом лизировалось 69,76% изолятов культур протея, в то время как до пассажа этот показатель составлял 60,46%. Шестикратный пассаж стафилококкового и пастереллезного бактериофагов на гомологичных культурах расширил диапазон их литического действия, соответственно, до 63,63 и 76,92%.

Таким образом, нами были сконструированы бактериофаги, обладающие широким спектром литического действия, что послужило основанием для их использования в лечебно-профилактических целях при патологиях репродуктивных органов у коров.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Андросов Ф.З., Беляев И.Я. и др. Справочник ветеринарного лаборант.- М: Колос, 1981.-С.589. 2. Богданов И.И.

Эпизоотология, фагодиагностика, фаготерапия и фагопрофилактика энтеротоксемии пушных зверей (песцов и норок): Автореф. Дисс. … канд. вет.наук .-Казань, 1998 .-19с. 3. Ганюшкин В.Я. Бактериофаги сальмонелл и их применение в ветеринарии.-Ульяновск, 1988.-84с. 4. Гургенидзе Г.В., Ткешелашвили Л.К. и др. Бактериофаготерапия инфекционноаллергических форм ринита. -В кн.: Актуальные вопросы бактериологии и прикладной иммунологии / Матер. Всесоюзного симпозиума. - Тбилиси, 1984.-С.195-197.  5. Казимир А.Н. Эпизоотология, фаготерапия и фагопрофилактика анаэробной энтеротоксемии телят: Автореф. Дисс. … канд. вет. наук.- Казань, 1997 .-21 с. 6. Хайруллин И.Н.Фагодиагностика, фаготерапия и специфическая профилактика анаэробной энтеротоксемии свиней: Дисс. … д-ра вет. наук.- Казань, 1991 .- 243с. 7. Шерстобоев К.Н. О коли-гертнеровском бактериофаге бактериофаге .- В кН .: Бактериофагия в ветеринарной практике /Тр. ВАСХНИЛ.ОГИЗ. Сельхозгиз, 1957.- С.37-54.

ИЗУЧЕНИЕ ФАГОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ПАТОГЕННЫХ ИЗОЛЯТОВ КУЛЬТУР МИКРООРГАНИЗМОВ К ПАССИРОВАННЫМ БАКТЕРИОФАГАМ

Багманов М.А., Юсупова Г.Р.

Рюземе

Путем шестикратного пассажа известных бактериофагов на изолятов культур микроорганизмов выделенных из половых органов больных коров были сконструированы бактериофаги, обладающие широким спектром литического действия.

PHAGOSENSITIVITY OF MICROORGANISMS PATHOGENIC CULTURE ISOLATES TO PASSED BACTERIOPHAGES STUDY

Bagmanov M.A., Yusupova G.R.