Изучение гепатопротекторных свойств биофлавоноидного комплекса лиственницы

Поражения печени различной этиологии занимают значительное место в общей структуре заболеваний и являются достаточно широко распространенной патологией.

Для профилактики и лечения различных заболеваний печени все шире используются антиоксиданты. Они замедляют или полностью ингибируют процессы свободнорадикального окисления, действуют на стадии образования свободных радикалов, их связывания и разрушения, а также утилизации продуктов окисления, из которых образуются новые радикалы. Особое внимание уделяется антиоксидантам природного происхождения [5].

Перспективным источником биологически активных соединений с антиоксидантными и антирадикальными свойствами считается применение биофлавоноидов, обладающих малой токсичностью, широтой терапевтического действия, а также возможностью длительного применения без риска возникновения побочных реакций. Опубликованы многочисленные данные по гепатозащитному действию флавоноидов [4].

Цель исследования - на модели острого токсического гепатита белых крыс изучить гепатопротекторные свойства биофлавоноидного комплекса лиственницы и сравнить его действие с ларивитолом.

Нами, совместно с учёными-химиками ЗАО «Петрохим», был изучен побочный продукт, получаемый при производстве дигидроквертицина, который получил название биофлавоноидный комплекс лиственницы. В состав препарата входят олигомер дигидрокверцетина, терпеновые углеводороды, эфиры смоляных кислот, фитостерины, биофлавоноиды (дигидрокемпферол, кемпферол, кверцетин, изорамнетин, листвинидин, спиробиофлавоноиды).

Ларивитол представляет собой сыпучую порошкообразную массу, содержит в своём составе биофлавоноидный комплекс лиственницы (20 мг/г), витамин А (500 МЕ/г), витамин Дз (250 МЕ/г), витамин Е (0,2 мг/г) и сорбент аэросил. Препарат также выпускает ЗАО «Петрохим» (Белгород).

Материал и методы исследования. Изучение гепатопротекторных свойств препаратов проводили на белых беспородных крысах обоего пола массой 180-200 г [1]. При этом по принципу аналогов было создано 4 группы животных - одна контрольная и три опытных - по 12 крыс в каждой. Условия содержания и кормления были одинаковы для всех групп животных.

Первая группа служила контролем (интактные крысы). Острый токсический гепатит у крыс второй, третьей и четвёртой опытных групп вызывали внутрибрюшинным введением четырёххлористого углерода (ССl4) на вазелиновом масле из расчёта 0,4 мл на 100 г массы тела в течение трех суток однократно. Третьей опытной группе сразу после окончания введения четыреххлористого углерода в течение 14 суток применяли биофлавоноидный комплекс лиственницы из расчёта 1 г/кг массы тела, и четвёртой опытной группе в течение такого же периода времени применяли ларивитол из расчёта 0,5 г/кг массы тела. Все манипуляции (взвешивание, введение препаратов, декапитация) осуществляли с 900 до 1200 ч с целью исключения суточных влияний на метаболизм.

Для оценки эффективности действия препаратов проводили клинический осмотр животных, измерение массы и контроль некоторых биохимических показателей сыворотки крови (аланинаминотрансфераза, аспартатаминотрансфераза, креатинин, общий билирубин, щелочная фосфатаза, общий белок и т.д.). Биохимические исследования выполняли по стандартным методикам с использованием биохимического анализатора.

1. Динамика массы крыс

Масса крыс	Контрольная группа	Опытные группы
	Интактные	ССl 4	Биофлавноидный комплекс лиственницы + ССl 4	Ларивитол + ССl 4
До опыта	190,9±4,2	187,6±6,1	191,4±3,7	185,2±3,9
Через 14 суток	194,3±4,6	154,2±3,7	188,3±4,1	169,3±2,7
Через 21сутки	199,7±5,1	161,3±4,4	196,5±3,6	173,3±3,1

Действие ларивитола на организм крыс было менее выражено, и масса животных изменялась в меньшей степени за весь период проведения эксперимента. Данные таблицы 1 показывают, что проведение интоксикации крыс четырёххлористым углеродом существенно влияет на их рост и развитие. Отмечается прирост живой массы крыс первой группы и её снижение в группах, получавших гепатопротекторы. Однако менее выраженное снижение массы с некоторым увеличением её к концу опыта зафиксировано в третьей группе.

Биохимические исследования сыворотки крови животных представлены в табл. 2.

2. Биохимические показатели крови крыс

Показатели	Контрольная группа	Опытные группы
	Интактные	ССl 4	Биофлавноидный комплекс + ССl 4	Ларивитол + ССl 4
AСT, ед/л	338,2±5,94	365,1±6,10	329,1±6,96	362,8±7,70
AЛT, ед/л	95,7±4,50	123,4±5,10	93,5±4,20	120,5±3,46
Альбумины, г/л	31,3±0,71	30,4±0,82	39,2±0,81	31,6±1,2
Общий белок, г/л	60,5±1,0	57,6±0,76	63,9±0,86	61,0±0,87
Мочевина, ммоль/л	5,7±0,62	6,9±0,59	6,3±0,74	4,9±0,80
Креатинин, мг/дл	0,4±0,31	0,34±0,29	0,3±0,36	0,3±0,33
Билирубин, мг/дл	2,8±0,54	2,47±0,31	2,65±0,40	2,5±0,49
Холестерин, ммоль/л	1,49±0,13	1,2±0,12	1,3±0,15	1,38±0,11
Щелочная фосфатаза, ед/л	430,2±5,27	451,8±5,29	412,7±5,63	422,1±6,20

Из представленных в таблице данных видно, что во второй группе под действием четырёххлористого углерода происходило существенное повышение таких показателей как аспартатаминотрансфераза и аланинаминотрансфераза (на 7,9 и 28,9 % по сравнению с контролем). Повышение активности трансаминаз в сыворотке крови свидетельствует о повреждении клеток печени. Эти ферменты являются «прямыми» маркерами поражения печёночных клеток, которые связаны с выходом внутриклеточных субстанций во внеклеточное пространство (кровь) из-за повышенной проницаемости мембран гепатоцитов или их гибели.

Анализируя полученные результаты, следует отметить снижение уровня общего билирубина почти на 9% и увеличение альбуминов в сыворотке крови крыс третьей опытной группы, где наряду с четырёххлористым углеродом использовали биофлавоноидный комплекс лиственницы (на 25,2 % по сравнению с контролем). Увеличение уровня альбуминов следует оценить положительно, так как это указывает на качественное функционирование печени.

Повышение активности щелочной фосфатазы во второй группе после введения четырёххлористого углерода (на 5,0 %) характерно для холестатического     синдрома,     обусловленного     нарушением желчевыделительной функции гепатоцитов и поражением желчных канальцев (внутрипеченочный холестаз). После применения биофлавоноидного комплекса лиственницы уровень щелочной фосфатазы наоборот снизился на 4,1 % по сравнению с контролем, как и в случае скармливания ларивитола - понизился на 1,9 %.

Обсуждение результатов исследований и выводы. На модели экспериментального тетрахлорметанового токсического гепатита белых крыс нами были изучены        гепатопротекторные свойства биофлавоноидного комплекса лиственницы и проведено его сравнение с ларивитолом.

Поступление четырёххлористого углерода в организм крыс приводило к развитию цитолитического (повышение в сыворотке крови содержания аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы), холестатического (повышение активности щелочной фосфатазы и концентрации билирубина), гепатодепрессивного (снижение общего белка и альбуминов) синдромов поражения печени. Всё это свидетельствует об усилении процессов перекисного окисления липидов и ослаблении функционирования антиоксидантной системы организма. Это обусловлено образованием радикала СClз при метаболизме четырёххлористого углерода, что является пусковым звеном в механизме повреждающего действия яда. Образовавшиеся радикалы, взаимодействуя с липидами, стимулируют развитие перекисного окисления липидов и вызывают повреждение биологических мембран.

Применение крысам биофлавоноидного комплекса лиственницы в дозе 1,0 г/кг массы тела на фоне экспериментального токсического гепатита оказывало выраженное гепатопротекторное действие, которое проявлялось уменьшением нарушений функционального состояния печени

(ферменты переаминирования и щелочная фосфатаза находились в пределах физиологической нормы и их значения незначительно отличались от показателей интактных животных).

Использование ларивитола у подопытных животных четвёртой группы оказывало менее выраженное гепатопротекторное действие, но также приводило к нормализации уровня печёночных ферментов в сыворотке крови и нормализации функции печени.

Таким образом, проведённые нами исследования свидетельствуют о высоком гепатопротекторном действии обоих препаратов, с некоторым преимуществом биофлавоноидного комплекса лиственницы.

На основании полученных данных можно сделать вывод, что биофлавоноидный комплекс лиственницы и ларивитол можно рекомендовать в качестве гепатопротекторов при токсическом поражении печени животных.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Венгеровский, А. И. Доклиническое изучение гепатозащитных средств / А. И. Венгеровский, И. В. Маркова, А. С. Саратиков; Сибирский медицинский университет // Ведомости Фармакопейного Комитета: Приложение к журналу "Фарматека". — 1999. — N 2 . — С. 9-12. 2. Додонов Н. С. Влияние флавоноидов на перекисное окисление липидов и активность антиоксидантных систем при токсическом поражении печени: Дис.... канд. фарм. наук. Самара, 2005.188 с. 3. Косарев В.В., Бабанов С.А. Токсические (токсико-аллергические) гепатиты. // Consilium medicum. Гастроэнтерология. 2009. - №2. – С. 29-30. 4. Кравченко Л.В, Трусов Н.В., Ускова М.А, Аксенов И.B., Авреньева Л.И., Гусева Г.В., Васильева М.А., Селифанов А.В., Тутельян В.А. Характеристика острого токсического действия четырёххлористого углерода как модели окислительного стресса. // Токсикологический вестник 2009, №1, с.12-18. 5. Сергеева Е. О. Влияние флавоноидов на механизмы развития окислительного стресса при токсических поражениях печени: Дис.... канд. фарм. наук. Пятигорск, 2007.- 202 с.

ИЗУЧЕНИЕ ГЕПАТОПРОТЕКТОРНЫХ СВОЙСТВ БИОФЛАВОНОИДНОГО КОМПЛЕКСА ЛИСТВЕННИЦЫ

Харченко Ю.А., Авдонина О.О.

Резюме

Изучено гепатопротекторное действие побочного продукта, получаемого при производстве дигидроквертицина, названного биофлавоноидным комплексом лиственницы. На модели острого токсического гепатита белых крыс, вызванного введением четырёххлористого углерода, проведено сравнение фармакологического действия препарата с ларивитолом. Установлено, что биофлавоноидный комплекс лиственницы и ларивитол положительно влияют восстановление функции печени.

на

THE STUDY OF HEPATOPROTECTIVE PROPERTIES BIOFLAVONOID COMPLEX OF LARCH

Kharchenko Yu.A., Avdonina O. O.