Изучение гепатопротекторых свойств гипоксена на модели экспериментального токсического гепатита белых крыс

Актуальным направлением современных исследований является разработка средств, направленных на повышение устойчивости печени к негативному влиянию различных ксенобиотиков. Наиболее часто поражения печени наблюдаются в крупных животноводческих хозяйствах, где высокая концентрация поголовья требует постоянного применения антибактериальных препаратов, вакцин и других средств, чтобы сдержать развитие инфекционных заболеваний среди животных [3, 11]. Считается, что нарушение обмена веществ вызывает поражение этого органа, что приводит к поражению гепатоцитов.

«Гепатопротекторный эффект могут оказывать фармакологические средства, улучшающие метаболические процессы в организме, ингибирующие перекисное окисление липидов и обладающие антиги-поксической активностью» [4, 8].

Изучению патогенеза токсического поражения печени посвятили свои работы многие учёные [5, 10]. В последние годы убедительно доказано, что процессы перекисного окисления липидов являются одним из важных механизмов повреждения гепатоцитов и прогрессирования хронических диффузных заболеваний печени [9].

По данным С.Б. Матвеева, именно среднемолекулярные вещества являются универсальным биохимическим маркером эндогенной интоксикации. «Такого рода вещества представлены промежуточными и конечными продуктами нормального и нарушенного белкового и липидного обмена, они накапливаются в организме в количествах, превышающих нормальные концентрации, и являются продуктами свободно радикального перекисного окисления липидов, промежуточного метаболизма, средне молекулярными пептидами» [6].

При поражении печени, независимо от этиологии, ведущим патоморфологиче-ским синдромом является нарушение клеточных структур, что приводит к повышению проницаемости и разрушению мембран гепатоцитов и их органелл и развитию гиперферментемии митохондриального фермента АсАТ и цитоплазматического фермента АлАТ [3].

Поэтому актуальным направлением современных исследований является поиск препаратов, обладающих гепатопротек-торным действием.

Исходя из этого, нами был испытан препарат, обладающий антиоксидантными свойствами – гипоксен.

Целью нашей работы было изучение гепатопротекторных свойств гепоксе-на на модели острого токсического гепатита на белых крысах.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи: вызвать токсический гепатит у белых крыс путём применения четырёххлористого углерода; установить гепатопротекторный эффект гипо-ксена и сравнить его эффективность с препаратом гептраном.

Материал и методы исследований. Острый токсический гепатит вызывали внутрибрюшинным введением белым крысам четырёххлористого углерода на вазелиновом масле из расчёта 0,4 мл на 100 г массы тела в течение 3-х суток одно- кратно [1].

Для лечения животных использовали гипоксен и гептран. Эффективность действия препаратов оценивали по клиническому состоянию белых крыс и биохимическим показателям сыворотки крови, при этом использовали биохимический анализатор.

Цифровой материал исследований подвергался математической обработке в описании Н.А. Плохинского [7] с вычислением средних арифметических (М), их среднестатистических ошибок (m) и критерия достоверности (р). Различия считали достоверными при р<0,05.

Гипоксен (натриевая соль [поли-(2,5-дигидроксифенилен)]-4 тиосульфокислоты) представляет собой порошок черного цвета, без запаха или со слабым специфическим запахом. Препарат выпускает ЗАО «Петрохим» (Белгород).

Гептран комплексный препарат, обладает гепатопротективным и антистрессовым действием, в 1 мл гептрана содержится 50 мг карнитина, 200 мг магния сульфата, 220 мг сорбитола, 30 мг циано- кобаламина, 8 мг кальция пантотената, 20 мг никотинамида, вспомогательные и формообразующие вещества.

Результат исследований. Для проведения опыта было отобрано 4 группы белых беспородных крыс-самцов массой 160-180 г по 6 голов в каждой.

Первая группа – контрольная; вторая, третья и четвёртая группы – опытные. Первой группе никаких препаратов не применяли (интактные животные). Крысам второй, третьей и четвёртой опытных групп внутрибрюшинно вводили 50 % эмульсию четырёххлористого углерода на вазелиновом масле в дозе 4,0 мл/кг массы тела в течение 3-х суток. Третьей опытной группе сразу после окончания введения четыреххлористого углерода в течение 7 дней применяли гипоксен из расчёта 50 мг/кг массы тела, четвёртой опытной группе в течение такого же периода времени выпаивали гептран в дозе 1 мл/л воды. Взятие крови проводили в конце экспериментального периода (через 14 суток (Таблица 1).

Таблица 1 – Биохимические показатели крови крыс

Показатель	Группа
	1	2	3	4
	контрольная	4-х хлористый углерод	гипоксен +4-х хлористый углерод	гептрал + 4-х хлористый углерод
Общий белок, г/л	68,9±1,45	66,0±1,58	72,3±1,40	72,7±1,51
Альбумины, г/л	32,7±1,29	30,4±0,96	38,1±1,39*	36,7±1,14
Креатинин, Мг/дл	0,48±0,22	0,50±0,39	0,54±0,31	0,49±0,36
Холестерол, ммоль/л	1,23±0,26	1,57±0,21	1,27±0,23	1,30±0,29
Щелочная фосфатаза, u/L	351,8±5,21	380,0±4,96*	350,8±5,29	357,3±5,49
Билирубин, Мг/дл	0,56±0,19	0,59±0,15	0,53±0,09	0,58±0,31
Мочевина, Mmol/L	6,79±0,57	7,14±0,69	6,47±0,64	7,11±0,65
Глюкоза, mmoL/L	9,26±0,98	5,92±0,96*	9,97±1,11	8,96±1,05
AST, ед/л	178,7±6,32	203,2±6,29*	180,9±6,89	181,3±5,76
ALT, ед/л	92,8±5,47	109,6±5,58*	94,4±4,35	97,6±5,29

Примечание *-р <0,05

Из данных таблицы видно, что введение крысам четырёххлористого углерода вызвало нарушение клеток печени, что сопровождалось увеличением в сыворотке крови активности AST и ALT (на 13,7 и 18,1 % соответственно, при р< 0,05).

После применения гипоксена ак- тивность AST и ALT в третей опытной группе увеличилась на 1,7 и 1,8 %, однако эти изменения не получили статистического подтверждения с контролем.

Что касается гептрала, то его действие было также эффективным, что проявлялось незначительным увеличением аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы: на 1,5 и выше контроля при р>0,05.

Во второй группе в сыворотке крови произошло статистически подтверждённое с контрольными показателями уменьшение общего белка на 4,2 % (р<0,05). Таким образом, 4-х хлористый углерод вызывает нарушение белкового обмена. Печень принимает активное участие в метаболизме метионина, то при поражении гепатоцитов нарушается механизм транссульфирования, вследствие чего происходит уменьшение в крови глутатиона и цистеина. При токсическом гепатите в результате ингибирования синтеза белка и деградации аминокислот отмечается гипо-проеинемия.

После применения гипоксена и гер-трала у крыс 3 и 4 опытных групп не наблюдалось нарушения белкового обмена.

Таким образом, можно предположить, что гипоксен и гептрал при токсическом поражении печени стимулируют обезвреживание продуктов распада белка, тем самым подавляют развитие эндогенной интоксикации.

После интоксикации 4-х хлористым углеродом произошло уменьшение глюкозы в сыворотке крови животных второй группы на 36,1 % по сравнению с контролем. Таким образом, при интоксикации в результате ингибирования гликонеогенеза и усиления гликогенолиза, на фоне резкого снижения содержания гликогена в печени начинается развиваться гипогликемия.

Следует отметить, что в третьей и четвёртой опытных группах произошло увеличение глюкозы. Таким образом, оба препарата эффективно препятствуют развитию гипогликемии.

Во второй опытной группе отмечалось повышение уровня щелочной фосфатазы на 8,0 %, по сравнению с контролем (р<0,05), что свидетельствует о поражении паренхимы печени. В третьей и четвёртой опытных группах после применения гипо-ксена и гептрала содержание этого фермента было в пределах физиологической нормы. Таким образом, проведённые исследования показали, что гепоксен и геп- трал оказывают гепатопротекторное действие на организм животных. Оба изучаемых препарата остановили развитие токсического гепатита в организме крыс, что проявилось снижением ферментов переа-минирования и щелочной фосфатазы, а также увеличением белка и глюкозы в сыворотке крови. Это свидетельствует о восстановлении функции гепатоцитов и нормализации работы организма.

Заключение. На основании проведённых исследований, гипоксен можно рекомендовать как эффективное гепатопро-текторное средство для сельскохозяйственных животных. Препарат рекомендуется применять с водой из расчёта 50,0 мг/кг массы тела.

Резюме

Острый токсический гепатит вызывали внутрибрюшинным введением белым крысам четырёххлористого углерода на вазелиновом масле из расчёта 0,4 мл на 100 г массы тела в течение 3-х суток однократно. В результате чего у животных произошло нарушение цитоплазматических мембран гепатоцитов, что сопровождалось увеличением в сыворотке крови ферментов переаминирования и щелочной фосфатазы, резким снижением глюкозы и общего белка. Применение гипоксена остановил этот патологический процесс. После применения препарата в сыворотке крови животных снизилась до физиологических значений активность ферментов переаминирования и щелочной фосфатазы, увеличилось количество белка и глюкозы, улучшилось физиологическое состояние белых крыс. Таким образом, гипоксен можно применять животным в качестве гепатопротекторного средства в дозе 50,0 мг/кг массы тела.