Изучение иммунного фона крупного рогатого скота в хозяйствах Нижегородской области

Успешному развитию животноводства препятствует падеж животных, особенно молодняка из-за смешанных желудочно-кишечных и респираторных инфекций. Одним из основных причин возникновения смешанных желудочно-кишечных и респираторных инфекций телят на фоне стрессовых воздействий являются такие этиологические агенты, как вирусы инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, аденовирус и хламидий [2, 3, 4].

Следует подчеркнуть, что проблема получения и сохранения здоровых телят должна рассматриваться как комплексная, в которой, наряду с факторами окружающей среды и возбудителем, решающая роль отводится иммунологической реактивности новорожденного животного и его зависимости от состояния материнского организма [3, 5, 6]. Целью исследований явилось выяснение возможной циркуляции инфекционных агентов по уровню специфических антител в сыворотке крови коров -матерей.

Материалы и методы. Опыты проводили в условиях трех животноводческих хозяйств Краснооктябрьского района (ООО «Развитие», ООО «Трехозерское» и СПК «Пошатовский», а также в Областной ветеринарной лаборатории, Сергачской межрайонной ветеринарной лаборатории и в ветеринарной лаборатории Краснооктябрьского р-на.

Клинико-эпизоотологическое обследование хозяйств проводили согласно методики И.А.Бакулова и др. [1]. Серологические исследования сывороток крови коров основывались на выявлении антител к вирусам парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи и аденовирусу, а также хламидиям. Они проводились в лаборатории вирусологии ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ».

Антигемагглютинины к вирусу ПГ-3 определяли микрометодом в реакции торможения гемагглютинации с использованием микропанели с U-образными лунками. При этом использовали парагриппозный антиген типа-3, изготовленного Табольской биофабрикой. Диагностическим титром считали разведение сыворотки 1:32 (5,0 log2) и выше.

Антитела к вирусу ИРТ выявляли в реакции вируснейтрализации на культурах клеток TR и MDBK, а также - в реакции непрямой гемагглютинации со стандартным эритроцитарным диагностикумом ИРТ, изготовленным в ФЦТРБ-ВНИВИ. За диагностический титр принимали активность сыворотки 1:4 (2,0 log2) и выше в РВН и 1:16 (4,0 log2) и выше в РНГА.

Наличие специфических антител к вирусу диареи крупного рогатого скота устанавливали в реакции непрямой гемагглютинации со стандартным диарейным эритроцитарным диагностикумом, изготовленным в ФЦТРБ-ВНИВИ, и в реакции вируснейтрализации на культурах клеток TR и MDBK. Диагностическим титром считали разведение сыворотки 1:16 и выше в РНГА и 1:4 и выше в РВН.

Антитела к аденовирусу крупного рогатого скота определяли в реакции непрямой гемагглютинации со стандартным эритроцитарным аденовирусным диагностикумом, изготовленного в ФЦТРБ-ВНИВИ. Диагностическим титром считали разведение сыворотки 1:16 и выше.

Комплементсвязывающие и гемагглютинирующие антитела к группоспецифическому хламидийному антигену выявляли в реакциях связывания комплемента и РНГА. Сыворотки с титром 1:8 (3,0 log2) и выше в РСК, 1:32 и выше в РНГА считали диагностическими.

С целью выделения предполагаемых возбудителей смешанных респираторных инфекций телят от больных, вынужденно убитых и павших животных брали носовые и глазные смывы, кусочки различных органов и тканей (носовые перегородки, конъюнктива, слизистая оболочка трахеи, легкие, лимфатические узлы, селезенка, печень и кишечник). Из этих материалов готовили 10%-ные суспензии на растворе Хенкса, содержащего стрептомицин в количестве 500 мкг и пенициллин 100 мкг на 1 мл, которыми заражали перевиваемые линии культур клеток TR и MDBK. С этой целью культуру клеток предварительно трехкратно промывали 0,5%-ным гидролизатом лактоальбумина, чтобы удалить сывороточные антитела и ингибиторы, присутствующие в ростовой среде. Затем во флаконы вносили 0,2-0,5 мл суспензии патологического материала и оставляли на контакт при температуре 37оС в течение 1-3 часов. После инкубации исследуемых взвесь отсасывали пипеткой и монослой несколько раз промывали раствором ГЛА. Вслед за этим во флаконы с культурой клеток добавляли поддерживающую среду и ставили в термостат.

Флаконы с зараженной культурой клеток ежедневно просматривали под малым увеличением светового микроскопа на наличие цитопатического действия.

Результаты исследований. Как уже было сказано выше, для эксперимента было отобрано три хозяйства - ООО «Развитие», ООО «Трехозерское» и СПК «Пошатовский», которые имеют наибольший падеж скота в районе. Данные по поголовью и падежу вышеперечисленных хозяйств приведены в таблице 1.

1. Поголовье и количество падежа скота в некоторых хозяйствах Краснооктябрьского района

Название хозяйства	2009			2010			2011
	Пого ловье	Пало всего	В т.ч. молод няк	Пого ловье	Пало всего	В т.ч. молод няк	Пого ловье	Пало всего	В т.ч. молод няк
ООО «Развитие»	550	18	2	471	59	25	508	5	3
ООО «Трехозерское»	468	16	-	415	34	32	300	10	4
СПК «Пошатовский»	500	1	-	503	3	2	446	27	15

Как видно из данных таблицы, наибольший падеж за три года происходил в ООО «Развитие». При этом гибель во всех хозяйствах наблюдалась как среди молодняка, так и среди взрослого поголовья. Условия содержания во всех 3-х хозяйствах примерно одинаковые: скот содержится в типовых коровниках. Полы в стойлах деревянные, в навозных и кормовых проходах бетонные. Освещение искусственное и естественное. Навоз убирается при помощи скребковых транспортеров. Содержание - привязное. Анализ имеющейся ветеринарной документации показал, что падеж в хозяйствах происходил на фоне нарушений условий содержания и кормления: высокая скученность, совместное содержание животных различных половозрастных групп, загазованность и недостаточная освещенность помещений, отсутствие активного моциона в зимне-стойловый период, а также не сбалансированность рациона кормления по питательным веществам, микро- и макроэлементам, кормление недоброкачественными кормами. Например, при исследовании зернофуража из ООО «Развитие» Сергачская межрайонная ветлаборатория не однократно выявляла рост грибов из род Mucor и Aspergillus. При исследовании силоса из этого же хозяйства отмечали повышенное содержание масляной и пониженное содержание молочной кислот.

При патологоанатомическом вскрытии павших взрослых животных специалисты выявляли цирроз печени, геморрагическое воспаление слизистой оболочки сычуга, тонкого и толстого отделов кишечника, поражение легких и атрофию селезенки. При вскрытии павших телят в основном выявляли гиперемию слизистых оболочек носовых ходов, гортани и трахеи; пневмонию в различной степени выраженности, а также поражение желудочно-кишечного тракта. При бактериологическом исследовании патологического материала в разное время выделялись в основном диплококки, стрептококки и стафилококки, а в некоторых пробах, кроме того, выделяли кишечную палочку. Выделенные бактерии были чувствительны к антибиотикам пенициллинового и тетрациклинового ряда. В условиях областной ветеринарной лаборатории при проведении вирусологических исследований в двух пробах от павших телят, принадлежащих ООО «Развитие» и СПК «Пошатовский» был выделен возбудитель инфекционного ринотрахеита. Учитывая это были взяты пробы крови от семи телят переболевших с признаками поражения респираторного тракта на предмет наличия в сыворотке крови антител к возбудителю ИРТ. Исследования, проведенные в ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», выявили наличие антител к указанному вирусу. В связи с этим нами проведен серологический мониторинг у коров, принадлежащих указанным хозяйствам. ёСыворотки крови исследовались на наличие антител к вирусам парагриппа-3 (ПГ-3), парво-реовирусу в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА), инфекционного ринотрахеита (ИРТ) и вирусной диареи – болезни слизистых (ВД-БС) в иммуноферментном анализе (ИФА) 259

в условиях ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». Получены следующие данные.

ООО «Развитие». Во всех 25-и пробах выявлены антитела в титрах 1:40 - 1:1280 к вирусу ПГ-3, в 15-и пробах в титрах 1:400 - 1:800 к вирусу ВД-БС, в 19-и пробах в титрах 1:400 - 1:800 к вирусу ИРТ, в 11-и пробах в титрах 1:40 - 1:80 к реовирусу и в 14-и пробах в титрах 1:80 - 1:160 к парвовирусу крупного рогатого скота.

ООО «Трехозерское». В 2-х пробах выявлены антитела в титре 1:40 к вирусу ПГ-3, в 9-и пробах в титрах 1:400 - 1:800 к вирусу ВД-БС, в 3-х пробах в титрах 1:400 - 1:1600 к вирусу ИРТ, в 1-ой пробе в титре 1:80 к реовирусу и в 2-х пробах в титре 1:80 к парвовирусу крупного рогатого скота (всего исследовано 10 проб сыворотки).

СПК «Пошатовский». В 8-и пробах выявлены антитела в титрах 1:40 - 1:320 к вирусу ПГ-3, во всех 11-и пробах в титрах 1:400 - 1:800 к вирусу ВД-БС, в 7-и пробах в титре 1:400 к вирусу ИРТ, в 2-х пробах в титре 1:80 к реовирусу и в 4-х пробах в титре 1:80 к парвовирусу крупного рогатого скота (всего исследовано 11 проб сыворотки ).

Заключение. Исследование сыворотки крови крупного рогатого скота общественного сектора Краснооктябрьского района позволили выявить антитела к вирусу ПГ-3, ИРТ, ВД-БС а также к рео- и парвовирусу. При этом в отдельных пробах сывороток антитела обнаруживались в диагностических титрах против вирусов ПГ-3 + ИРТ + ВД-БС + рео + парвовирус, а в других пробах антитела обнаруживались в отношении перечисленных возбудителей в различных сочетаниях. Все это свидетельствует о возможной циркуляции этих возбудителей среди поголовья скота. Учитывая наличие падежа телят нельзя исключить смешанное течение желудочно-кишечных и респираторных болезней. Выделение возбудителя ИРТ в патологическом материале у двух павших телят подтверждает это предположение. В дальнейшем будут продолжены исследования по этой проблеме с целью разработки мер борьбы с указанными инфекциями в хозяйствах.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Бакулов И.А., Юрков Г.Г., Песковацков А.П.,

Ведерников В.А. Рекомендации по методике эпизоотологического исследования. - Покров, 1975. - 75 с. 2. Гаффаров Х.З., Иванов А.В., Непоклонов Е.А., Равилов А.З. Моно- и смешанные инфекционные диареи новорожденных телят и поросят. - Монография. - Казань, - Издательство «Фэн», 2002. - 590 с. 3. Красочко П.А. Биотехнологические основы конструирования и использования иммунобиологических препаратов для молодняка крупного рогатого скота: Автореферат дис... д-ра биол.наук. -Щелково, 2009. - 46 с. 4. Сисягина Е.П. Разработка средств и способов терапии и профилактики респираторных болезней телят: Автореферат дис... д-ра вет. наук. - Нижний Новгород, 2010. - 48 с. 5. Федоров Ю.Н., Верховский О.А., Костина М.А. Иммунодефициты животных: характеристика, диагностика и коррекция / Сб. мат. науч. сессии 260

Россельхозакадемии. – М., 1999. – Ч.1. – С.138-141. 6. Федоров Ю.Н. Иммунологический мониторинг в ветеринарии: тенденция развития, возможности и реальность / Ж. Ветеринарная патология. – 2003. - № 1. – С.79-85.

ИЗУЧЕНИЕ ИММУННОГО ФОНА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В ХОЗЯЙСТВАХ НИЖЕГОРОДСКОЙ ОБЛАСТИ

Сетдеков Р.А., Юсупов Р.Х., Гумеров В.Г., Юсупова Г.Р.

Резюме

В работе показано, что в сыворотке крови у коров, принадлежащих трем хозяйствам, где регистрируются болезни молодняка, обнаруживаются в диагностических титрах антитела к вирусам ПГ-3, ИРТ, ВД-БС, а также к рео- и парвовирусам. Делается вывод о возможной циркуляции этих возбудителей среди поголовья скота. Выделение возбудителя ИРТ в патологическом материале у двух павших телят подтверждает это предположение.

CATTLE IMMUNE BACKGROUND STUDY IN THE NIZHNY REGION FARMS

Srtdekov R.A., Yusupov R.H., Gumerov V.G., Yusupova G.R.