Изучение иммунного статуса организма собак, вакцинированных против бешенства

Заболеваемость бешенством регистрируется на территории большинства стран мира, где ежегодно свыше 10 млн. человек получают различные повреждения от животных и более 4 млн. человек – специфическую антирабическую помощь [7].

По данным ряда исследователей [2; 3; 6], главным резервуаром и распространителем рабического вируса была и остается лисица. Однако, участились случаи заболевания собак и кошек [1]. Ни одно из погибших домашних животных не было вакцинировано. Важен и другой факт – участилось выявление бешенства у бродячих, безнадзорных собак и кошек.

На современном этапе борьба с бешенством включает уничтожение бродячих собак, снижение плотности популяции диких животных – переносчиков и резервуаров вируса бешенства, вакцинации восприимчивых животных [4; 5].

Как известно, в Российской Федерации для профилактики бешенства собак используют различные отечественные и зарубежные антирабические вакцины, зарегистрированные в Российской Федерации.

Цель исследований - изучение иммунного статуса организма собак после вакцинации различными антирабическими вакцинами.

Материалы и методы. Эксперименты проводили на собаках, принадлежащих ветслужбе Зонального Центра кинологической службы МВД по Республике Татарстан. Для профилактики бешенства собак использовали следующие вакцины: «Рабикан» (ФГУП «Щелковский биокомбинат») и «Мультикан» (ЗАО «НПО Нарвак», Москва), «Нобивак-Рабиес» («Интервет Интернэшнл»), согласно наставлениям по их применению. Изучение серологических, гематологических и иммунологических показателей крови собак проводили через 0,5-; 1-; 3-; 6-; 8-; 9-; 10- и 14 месяцев после вакцинации. Всего исследовано 19 проб крови и сывороток крови собак.

Исследования по оценке эффективности вакцинопрофилактики бешенства проводили с использованием «Иммуноферментной тест-системы для определения уровня антител к вирусу бешенства в сыворотках крови животных, вакцинированных против бешенства методом непрямого иммуноферментного анализа» и «Иммуноферментной тест-системы для определения уровня антител к вирусу бешенства в сыворотках крови животных методом блок - иммуноферментного анализа (блок-ИФА)», согласно инструкциям по их применению, разработанным в ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» и утвержденным в установленном порядке. В качестве контрольной положительной сыворотки использовали отраслевой стандартный образец антирабической сыворотки (референс-сыворотка) ВГНКИ, сер. NCA-03 c активностью 20 МЕ/мл.

Морфологические показатели крови: лейкоциты, лейкоцитарную формулу определяли общепринятыми методами.

Оценку специфического иммунного статуса проводили стандартными методами, включающими определение содержания

Т-лимфоцитов в периферической крови в реакции спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (М.А.Бажин, 1989; Р.В.Петров, 1992), В-лимфоцитов – методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами мыши (Д.К.Новиков, В.И.Новикова, 1996). Количество Т-хелперов и Т-супрессоров определяли в реакции розеткообразования (Е-РОК) с теофилином по методу A.Shore (1978). Коэффициент дифференцировки Т-лимфоцитов (КДТЛ) – методом R.Keane et al. (1982). Фагоцитарную активность нейтрофилов (ФАН) и фагоцитарное число (ФЧ) определяли по методу Кост и Стенко (1981) с использованием тест-культуры Staphilococcus aureus.

Результаты и обсуждение. Проведенными исследованиями сывороток крови собак, взятых через 0,5-; 1-; 3-; 6-; 8-; 9-; 10-; 14 мес. после вакцинации, установлен высокий уровень специфических антител к вирусу бешенства, составляющий от 1:80 до 1:1280 в непрямом ИФА и от 1:10 до 1:80 - в блок ИФА, что соответствует активности 0,625-5,0 МЕ/мл.

Как известно, защитный от бешенства титр антител составляет 0,5 МЕ/мл. Следовательно, уровень антител в исследуемых пробах сывороток крови собак, взятых в разные сроки после вакцинации, обеспечивает защиту животных от бешенства. Сравнительный анализ уровня антирабических антител в сыворотках крови собак, вакцинированных различными вакцинами показал одинаковый результат через 3 мес. после вакцинации, составляющий 1:640 (2,5МЕ/мл). В то же время необходимо отметить, что максимальный титр специфических антител в сыворотках крови животных, составляющий 1:1280 (5,0 МЕ/мл), наблюдали через 6 – 8 мес. после вакцинации антирабической вакциной «Рабикан» из штамма «Щелково-51», в последующие сроки отмечено снижение уровня специфических к вирусу бешенства антител: через 10 мес. - до 1:160 (0,625 МЕ/мл) и к 14 мес. – до 1:80 (0,315МЕ/мл).

В то время как при вакцинации собак вакцинами «Дипентавак» и «Мультикан-8» через 6 мес. уровень антирабических антител составил 1:320 (1,25 МЕ/мл), вакциной «Дефенсор» через 10 мес. – 1:160 (0,625 МЕ/мл).

При этом через 1 мес. после вакцинации антирабической вакциной «Рабикан» из штамма «Щелково-51», количество лейкоцитов в крови превышало таковое у невакцинированных против бешенства животных на 17,4%. В этот срок исследований в крови вакцинированных животных отмечено увеличение содержания Т- и В-лимфоцитов на 24,7- и 13,4% соответственно. Уровни фагоцитарной активности нейтрофилов (ФАН) крови и фагоцитарного числа (ФЧ) увеличились на 21,1- и 6,5% соответственно. Спустя 3 мес. после вакцинации вакцинами «Рабикан» у животных отмечено повышение количества лейкоцитов на 24,2%, лимфоцитов - на 12,3%, содержание иммунокомпетентных клеток - Т- и В-лимфоцитов возросло, в среднем на 22,9- и 30,0% соответственно, показатели фагоцитоза – на 65,8% по сравнению с показателями крови невакцинированных собак.

Проведенными исследованиями показано, что через 6 мес. после вакцинации продолжает отмечаться повышенное содержание в крови лейкоцитов – на 32,0%, иммунокомпетентных клеток – на 19,7- и 42,7% соответственно, повышается также ФАН – на 32,8%. Вместе с тем, через 10 мес. после вакцинации, содержание лейкоцитов, лимфоцитов, Т- и В-лимфоцитов, показатели ФАН и ФЧ восстановились до пределов физиологической нормы.

При исследовании крови собак через 2 недели после вакцинации антирабической вакциной «Мультикан-8», установлено незначительное повышение числа лейкоцитов, лимфоцитов, иммунокомпетентных клеток и ФАН. Через 9 и 10 мес. после вакцинации значительных отклонений от физиологической нормы в содержании лейкоцитов и лимфоцитов, ФАН и

ФЧ не отмечено, тогда как количество Т-лимфоцитов было выше нормы на 25,3- и 29,9%, а В-лимфоцитов – на 16,8- и 16,7% соответственно.

При исследовании крови собак, проведенных через 6 мес после иммунизации их антирабической вакциной «Дипентавак», установлено повышенное содержание в крови по сравнению с нормой следующих показателей: лейкоцитов – на 25,3%, лимфоцитов – на 11,2%, Т- и В-лимфоцитов соответственно – на 14,2- и 24,1%, ФАН – на 23,7%.

Через 10 мес. после вакцинации собак антирабической вакциной «Дефенсор» отклонений гематологических и иммунологических показателей от физиологической нормы не отмечено.

Значительные изменения наблюдались при гематологическом исследовании крови собак, иммунизированных вакциной «Нобивак Рабиес». Так, через 3 мес. после вакцинации количество лейкоцитов и лимфоцитов повысилось на 21,3- и 16,2%, иммунокомпетентных клеток – на 24,5- и 32,0%, показатели ФАН и ФЧ – на 42,3- и 69,2% соответственно.

Заключение. В результате проведенных исследований установлена высокая степень активизации неспецифических, клеточных и гуморальных факторов иммунитета у собак, вакцинированных различными антирабическими вакцинами, выражающаяся повышением уровня антирабических антител в сыворотках крови, количества лейкоцитов, иммунокомпетентных клеток и показателей фагоцитоза.

При этом титры антител в сыворотках крови собак, вакцинированных различными антирабическими вакцинами варьировали в различные сроки после вакцинации от 1:160 до 1:1280, что соответствует 0,625-5,0 МЕ/мл, обеспечивая защиту животных от бешенства.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Арутюнова, И.П. Бешенство антропургического типа – проблема больших городов /И.П.Арутюнова, Е.И.Будкин, О.М.Швец, И.В. Ермилов // Ветеринарная патология. – 2010. - №1. – С. 1719. 2. Ботвинкин, А.Д. Особенности эпидемиологии гидрофобии и экология вируса бешенства в условиях преобладания очагов природного типа /А.Д.Ботвинкин,: Автореф. дис. … докт. мед. наук. – М., 1992. – 58 с. 3. Гулюкин, М.И. Ситуация уже кризисная /М.И.Гулюкин, В.А.Ведерников // Ветеринарная жизнь. – 2008. - № 12. – С. 6-8. 4. Джупина, С.И. Эпизоотология бешенства животных в Западной Сибири /С.И.Джупина, С.А.Юрик // Эпизоотология, диагностика, профилактика и меры борьбы с болезнями животных. – Новосибирск, 1997. – С. 41-42. 5. Иванов, А.В. Бешенство: этиология, эпизоотология, диагностика /А.В.Иванов, Н.А.Хисматуллина, А.Н.Чернов, А.М.Гулюкин // Учебно-методическое пособие в иллюстрациях – М.: Колос, 2010. – 54 с. 6. Хисматуллина, Н.А. Разработка средств и методов иммунологического мониторинга и мер борьбы при бешенстве и лихорадке Ку животных /Н.А.Хисматуллина: Автореф. дис. … докт. биол. наук. – Казань, 2000. – 45 с. 7. Черкасский, Б.Л. Эпидемическая ситуация и меры профилактики бешенства

/Б.Л.Черкасский, О.С.Хадарцев, А.А.Мовсесянц // Вет. и мед. аспекты зооантропонозов.-Покров, 2003.-Ч.I.-С.98.

ИЗУЧЕНИЕ ИММУННОГО СТАТУСА ОРГАНИЗМА СОБАК, ВАКЦИНИРОВАННЫХ ПРОТИВ БЕШЕНСТВА

Гулюкин А.М., Хисматуллина Н.А., Гафарова А.З.,

Сабирова В.В., Горлик А.О.

Резюме

Установлена высокая степень активизации неспецифических, клеточных и гуморальных факторов иммунитета у собак, вакцинированных    различными    антирабическими    вакцинами, выражающаяся повышением уровня антирабических антител в сыворотках крови, количества лейкоцитов, иммунокомпетентных клеток и показателей фагоцитоза.

STUDY OF IMMUNE STATUS DOG, VACCINATED AGAINST RABIES

Gulyukin А.М., Khismatullina N.A., Gafarova A.Z.,

Sabirova V.V., Gorlik A.O.