Изучение эффективности схем применения противобруцеллезной вакцины конъюнктивальным методом

В Российской Федерации бруцеллез сельскохозяйственных животных широко распространен. По данным Россельхознадзора, несмотря на стабилизацию ситуации и снижение показателей заболеваемости в последнее время эпизоотическая обстановка по данному заболеванию остается сложной.

На начало 2019 г. в Российской Федерации зафиксировано 164 неблагополучных пункта по бруцеллезу крупного рогатого скота. Можно распределить неблагополучные пункты в федеральных округах: на первом месте – Северо-Кавказский, там зарегистрировано 105 (64,0%) неблагополучных пунктов. На втором месте – Южный – 19 (11,6%), на третьем – Приволжский – 18 (10,9%), четвертое место разделяют Сибирский и Дальневосточный – 11 (6,7%) неблагополучных пунктов [1; 2].

В связи со сложившейся ситуацией актуален вопрос о необходимости оптимизации противобруцеллезных мероприятий у животных, предусматривающей обеспечение эффективного контроля эпизоотического процесса бруцеллеза за счет создания в неблагополучных и угрожаемых стадах перманентного длительного иммунитета и постоянного эпизоотологического мониторинга.

Стабильно высокий уровень иммунитета крупного рогатого скота в течение длительного периода в новых эпизоотических, эпидемических и социально-экономических условиях особо необходим. Его создание на основе существующих схем специфической профилактики, предусматривающих использование живых вакцин из диссоциированных штаммов B. abortus 82 и 75/79-АВ, без значительных издержек стало сложным или невозможным, иными словами нетехнологичным. В мелких общественных и частных хозяйствах, где проблематична технология содержания строгого разделения половозрастных групп и формирования однородных в возрастном, эпизоотическом и иммунном отношении маточных гуртов. Ситуация с поствакцинальными реакциями, усложняющими объективную эпизоотическую оценку животных по бруцеллезу, усугубилась [3–6].

Заслуживает внимания конъюнктивальный метод введения вакцины из штамма B. abortus 19 мелкому рогатому скоту в дозе, уменьшенной в 10 раз, по сравнению с подкожным введением. Это позволило обеспечить необходимый уровень иммунитета животных к бруцеллам вида melitensis, возможность проведения поствакцинальных исследований и выявления инфицированных животных через 3 мес после вакцинации [7; 8].

Кроме того, большой интерес вызывают экспериментальные данные, полученные на морских свинках, искусственно инфицированных бруцеллами вида melitensis, доказывающие их отсутствие у опытных животных через 1 мес после конъюнктивальной иммунизации на фоне введения антибактериального препарата «Нитокс-200». В группе же инфицированных животных, в последующем подвергнутых конъюнктивальной иммунизации без предварительного введения препарата «Нитокс-200», выявлено 80% носителей бруцелл вида melitensis, а в контрольной группе инфицированных животных без введения препарата «Нитокс-200» и вакцины – 100% [9].

Цель исследований – изучение эффективности различных схем применения про-тивобруцеллезной вакцины на крупном рогатом скоте неблагополучного по бруцеллезу хозяйства.

Материалы и методы

Для изучения эффективности вакцины при разных схемах ее применения выбрано хозяйство Ставропольского края, неблагополучное по бруцеллезу крупного рогатого скота, и сформированы две группы животных: 1-я группа (стадо) – 120 гол., 2-я группа (стадо) – 104 гол. крупного рогатого скота. Животные обеих групп были исследованы общепринятыми методами лабораторной диагностики согласно «Наставлению по диагностике бруцеллеза» (2003) [10] и разработанным во ВНИИБТЖ диагностикумам.

Предварительно (до вакцинации) у животных обеих групп отобраны пробы сыворотки крови и исследованы в реакциях РБП, РА с ед. и R-антигеном, РСК с ед. и R-антигеном, РИД с О-ПС А, М и полиантигенами.

По схеме 1 животным 1-го стада ввели «Нитокс-200» в дозе 1 мл на 10 кг живого веса согласно Инструкции по применению препарата.

Через 10 сут после его введения провели вакцинацию конъюнктивальным методом выбранной вакциной с отработанными параметрами.

Далее через 30, 60, 90, 120 сут после вакцинации отобраны пробы сыворотки крови опытных животных и исследованы в реакциях РБП, РА с ед. и R-антигенами, РСК с ед. и R-антигенами, РИД с О-ПС А, М, полиантигенами.

По схеме 2 животным 2-го стада провели вакцинацию конъюнктивальным методом выбранной вакциной с отработанными параметрами без предварительного применения «Нитокс-200».

Через 30, 60, 90, 120, 150, 180 сут после вакцинации отобраны пробы сыворотки крови опытных животных и исследованы в реакциях РБП, РА с ед. и R-антигенами, РСК с ед. и R-антигенами, РИД с О-ПС А, М, полиантигенами.

После каждого исследования животных с положительными реакциями в высоких титрах: в РА – 200 МЕ и выше, РСК – 1 : 20 и выше и РИД удаляли из стада.

Результаты исследований

В табл. 1 и 2 представлены результаты изучения эффективности различных схем применения противобруцеллезной вакцины конъюнктивальным методом на крупном рогатом скоте неблагополучного по бруцеллезу хозяйства, с предварительным применением антибактериального препарата «Нитокс-200» перед введением вакцины из штамма B. abortus 19 и без его предварительного введения.

Таблица 1 Результаты исследования сывороток крови крупного рогатого скота, иммунизированного конъюнктивальным методом вакциной из штамма B. abortus 19 с предварительным введением «Нитокс-200»

Срок исследования после вакцинации (сут)	Количество исследованных животных (гол)	Положительные реакции
		РА + РСК (S)		РИД абс. (%)
		Всего абс. (%)	В высоких титрах (200 МЕ и 1 : 20) абс. (%)
До вакцинации	120	67 (55,8)	9 (13,4)	6 (5,0)
Через 30	111	35 (31,5)	3 (8,6)	–
Через 60	108	4 (3,7)	–	–
Через 90	104	–	–	–
Через 120	104	–	–	–

Из табл. 1 видно, что при серологическом исследовании 120 проб сыворотки от крупного рогатого скота (КРС) до вакцинации выявлено 67 гол (55,8%), положительно реагировавших на бруцеллез, в том числе 9 гол (13,4%) в высоких титрах (200 МЕ в РА и 1 : 20 в РСК и выше). В реакции иммунодиффузии (РИД) отмечены положительные результаты в 6 пробах (5% от общего числа исследованных животных).

При серологическом исследовании 111 проб сыворотки КРС на 30-е сут после иммунизации животных конъюнктивальным методом с предварительным введением

«Нитокс-200» положительные реакции на бруцеллез дополнительно выявлены еще у 35 животных (31,5% от числа исследованных), в том числе в высоких титрах реагировало 3 гол (8,6%). Во всех случаях РИД дала отрицательный результат.

При серологическом исследовании 108 проб КРС на 60-е сут после иммунизации конъюнктивальным методом с предварительным введением «Нитокс-200» положительные реакции на бруцеллез отмечены у 4 животных (3,7% от числа исследованных). Реакции на бруцеллез в высоких титрах не отмечены. Во всех случаях РИД была отрицательной.

При исследовании 104 проб сыворотки КРС на 90-е и 120-е сут после иммунизации получены двукратные отрицательные результаты серологических реакций.

При изучении эффективности применения противобруцеллезной вакцины конъюнктивальным методом без предварительного введения антибактериального препарата «Нитокс-200» получены результаты, представленные в табл. 2.

Таблица 2 Результаты исследования сывороток крови крупного рогатого скота, иммунизированного конъюнктивальным методом вакциной из штамма B. abortus 19 без предварительного введения «Нитокс-200»

Срок исследования после вакцинации (сут)	Количество исследованных животных (гол)	Положительные реакции
		РА + РСК (S)		РИД абс. (%)
		Всего абс. (%)	В высоких титрах (200 МЕ и 1 : 20) абс. (%)
До вакцинации	104	43 (41,3)	14 (32,5)	3 (2,9)
Через 30	90	30 (33,3)	29 (96,7)	1 (1,1)
Через 60	61	13 (21,3)	4 (30,8)	1 (1,6)
Через 90	57	7 (12,2)	2 (3,5)	—
Через 120	55	2 (3,6)	1 (1,8)	—
Через 150	54	—	—	—
Через 180	54	—	—	—

В результате серологических исследований 104 животных до вакцинации 43 гол (41,3%) положительно реагировали на бруцеллез, из них 14 (32,5) - в высоких титрах, в том числе 3 (2,9%) - с положительной РИД с О-ПС антигенами.

При серологическом исследовании 90 проб сыворотки КРС на 30-е сут после иммунизации животных конъюнктивальным методом без предварительного введения «Нитокс-200» положительные реакции на бруцеллез дополнительно выявлены еще у 30 животных (33,3% от числа исследованных), в том числе в высоких титрах реагировало 29 гол (96,7%). Положительные результаты РИД с О-ПС антигенами выявлены в одной пробе (1,1%).

При серологическом исследовании 61 пробы сыворотки КРС на 60-е сут после иммунизации конъюнктивальным методом без предварительного введения «Нитокс-200» положительные реакции на бруцеллез дополнительно выявлены еще у 13 животных (21,3% от числа исследованных), в том числе в высоких титрах выявлено 4 гол (30,8%). Положительные результаты РИД с О-ПС антигенами выявлены в одной пробе (1,6%).

На 90-е сут после иммунизации исследовано 57 гол КРС, выявлено 7 серопозитивных животных (12,2%), в том числе две гол (3,5%) в высоких титрах. Положительные результаты РИД с О-ПС антигенами не обнаружены.

Далее, на 120-е сут отобраны пробы от 55 гол опытных животных, которые исследовали серологическими методами, дополнительно выявлено еще 2 гол (3,6%), из них одно животное (1,8%) – в высоких титрах. Результаты РИД – отрицательные.

На 150-е и 180-е сут при исследовании 54 гол КРС серопозитивных реакций не выявлено.

Таким образом, в экспериментах, проведенных в неблагополучных по бруцеллезу стадах КРС, установлено: применение вакцины из штамма B. abortus 19 конъюнктивальным методом позволяет дополнительно выявить до 31,5–33,3% положительно реагирующих животных, а предварительное применение антибактериального препарата «Нитокс-200» повышает эффективность вакцинации в 3 раза и сокращает потери поголовья в 5,8 раз.

Заключение

В результате проведенных исследований установлено, что применение вакцины из штамма B. abortus 19 конъюнктивальным методом позволяет обеспечить высокий уровень иммунитета животных к бруцеллам и беспрепятственно проводить их диагностику через 2 мес. после вакцинации.

Доказана эффективность применения схемы, включающей предварительное применение антибактериального препарата «Нитокс-200» в неблагополучных по бруцеллезу стадах КРС, применяя которую оздоровления хозяйства можно добиться уже через 4 мес после иммунизации животных вакциной из штамма B. abortus 19 конъюнктивальным методом, тогда как без его предварительного введения оздоровительный эффект возможен в более поздние сроки и с большими потерями животных.

T.A. Yanchenko, N.N. Novikova, A.A. KozhakhmetovaOmsk Agrarian Scientific Center, Omsk

Research on the efficiency of schemes of antibrucella vaccine treatment by means of conjunctival method