Изучение нейротропной активности новых лекарственных препаратов зверобоя травы

В настоящее время в медицинской практике наблюдается тенденция к все более широкому применению фитопрепаратов для лечения и профилактики различных заболеваний. Это связано с тем, что лекарственные средства на растительной основе сочетают в себе широту и мягкость терапевтического действия с отсутствием значительного числа побочных эффектов в случае рационального применения. Именно поэтому целесообразным, на наш взгляд, является применение фитопрепаратов для лечения хронических заболеваний, в том числе патологий центральной нервной системы (ЦНС). Депрессия является достаточно распространенным заболеванием ЦНС, причем существует тенденция к росту данной заболеваемости [3]. Среди главных причин этого явления можно назвать стресс, психоэмоциональное напряжение и экологическое неблагополучие окружающей среды. Перспективным источником растительных средств, на основе которого возможно получение отечественных эффективных антидепрессантных препаратов, является зверобоя трава.

Т рава зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L.) и зверобоя пятнистого (четырехгранного) (Hypericum maculatum Crantz.) широко применяется в нашей стране в качестве противовоспалительного, антимик робного

Куркин Владимир Александрович, доктор фармацевтических наук, профессор, заведующий кафедрой фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии.

Дубищев Алексей Владимирович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой фармакологии Правдивцева Ольга Евгеньевна, кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии Зимина Любовь Николаевна, аспирант

Аюпова Алия Алиевна, студентка

Боткин Евгений Александрович, студент и вяжущего лекарственного средства [1, 2]. В то же время, за рубежом этот вид сырья является основой для антидепрессантных препаратов, таких как «Деприм», «Негрустин» и «Ге-лариум Гиперикум» [3, 4]. Однако, несмотря на широкое применение препаратов на основе травы зверобоя, остается открытым вопрос относительно того, какая группа биологически активных соединений, обусловливает антиде-прессантный эффект. Следствием этого является отсутствие унифицированного подхода к анализу сырья и препаратов зверобоя. Создание импортозамещающих антидепрессантных препаратов возможно только на основе детального изучения химического состава сырья зверобоя, физико-химических и фармакологических свойств индивидуальных соединений. В литературных источниках сообщается о наличии антидепрессантных свойств гиперицина и гиперфорина, причем для последнего компонента нами также выявлена нейротропная активность [5]. Однако в лекарственных препаратах данные компоненты встречаются в незначительных количествах. Следовательно, работа по выделению индивидуальных соединений из травы зверобоя и исследованию их биологического действия в сравнении с комплексными препаратами представляется актуальным и важным. Ранее нами также был обнаружен выраженный антидепрессантный эффект для флавоноида гиперозида, однако не подтверждены данные зарубежных ученых относительно антидепрессантных свойств для рутина [6].

Разработанный нами подход к анализу сырья и препаратов травы зверобоя, сочетающий в себе определение суммы флавоноидов и ан-траценпроизводных и позволяющий проводить оценку содержания основных БАС в сырье и препаратах зверобоя, создал предпосылки для создания новых антидепрессантных лекарственных средств «Зверобоя настойка» и «Зверобоя экстракт сухой».

Целью нашей работы является изучение нейротропной активности новых лекарственных средств и некоторых индивидуальных биологически активных соединений зверобоя травы.

Как известно, депрессия проявляется проявлением страха и тревоги, поэтому оценку нейротропной активности проводили с использованием теста «Приподнятый крестообразный лабиринт» (анксиолитическая активность) и «Отчаяние» (антидепрессантная активность). Методика теста «Приподнятый крестообразный лабиринт» проводится с целью выявить анксиолитическую активность лекарственных препаратов. Она основана на способности животных под действием препаратов преодолевать естественный страх перед падением с высоты и открытыми площадками. При этом фиксируются время пребывания животного в открытых и закрытых рукавах, а также на центральной площадке в течение 5 минут. Тест «Отчаяние» позволяет выявить антидепрес-сантную активность лекарственных препаратов. В течение 5 минут фиксируется время активных попыток животных выбраться из воды. Исследования проводили на белых беспородных крысах обоего пола, при этом животные содержались в условиях вивария на обычном рационе. В каждом опыте нами были использованы по 8 животных. Исследуемые препараты вводили внутрижелудочно через зонд в течение 10 дней. Последний раз вводили за 30 минут до начала исследования. В качестве препаратов сравнения нами были использованы феназепам в дозе 0,5 мг на кг массы тела животного для оценки анксиолитического действия. Для сравнения антидепрес-сантного эффекта фитопрепартов нами использовался амитриптилин в дозе 5 мг на кг массы тела животного.

Нами был исследован новый лекарственный препарат «Зверобоя настойка», полученный на основе травы зверобоя продырявленного в соотношении сырье-экстрагент 1:5. Экстрагентом для нашего препарата являлся 70% этиловый спирт, в отличие от промышленного препарата, для которого используется 40% этиловый спирт. Как было показано ранее [4], «Зверобоя настойка» отличается от препарата с аналогичным названием, выпускаемого промышленным способом, более высоким содержанием основных БАС и более выраженным фармакологическим эффектом. Данный препарат вводили животным из расчета 100 мг на кг массы тела животного. Для этого 1 мл препарата разводили в 50 мл воды очищенной. В контроле использовали раствор, состоящий из 1 мл 70% спирта этилового и 50 мл воды очищенной.

Далее нами проводилось исследование «Зверобоя экстракта сухого», полученного из травы зверобоя продырявленного. Для этого ранее нами был получен жидкий экстракт зверобоя в соотношении сырье-экстрагент 1:1. В качестве экстрагента для этого препарата использовался 70% этиловый спирт. «Зверобоя сухого экстракта» был получен путем высушиванием жидкого экстракта. Для эксперимента мы использовали сухой экстракт в дозе 2 мг/кг. Вводили животным препарат, смешанный с 1% раствором крахмала. Контрольная группа крыс при этом получала 1% раствор крахмала.

В качестве одного из препаратов сравнения нами был использован «Деприм». Для этого таблетки освобождали от оболочки и растирали в фарфоровой ступке. Данный препарат также смешивали с раствором крахмала и вводили животным из расчета 10 мг/кг. Содержание основных БАС данных препаратов отражено в таблице 1. Кроме того, нами были исследованы биологические свойства биаспиге-нина — индивидуального БАС, выделенного нами ранее из травы зверобоя продырявленного с помощью колоночной хроматографии. Его вводили однократно, параллельно сравнивали эффекты однократного ведения амитриптилина и феназепама.

Таблица 1. Содержание основных БАС в исследуемых препаратах

Примечание к табл. 1-5: * — различия достоверны по отношению опыта и контроля при Р < 0,05; ** — при Р < 0,01

Таблица 2. Результаты исследования поведения животных в методике «Приподнятый крестообразный лабиринт»

Таблица 3. Результаты исследования поведения животных в методике «Приподнятый крестообразный лабиринт»

Таблица 4. Результаты исследования поведения животных в методике теста «Отчаяние»

Таблица 5. Результаты исследования поведения животных в методике теста «Отчаяние»

Полученные результаты наглядно свидетельствуют о выраженном антидепрессантном действии фитопрепаратов на основе зверобоя травы, сравнимом с эффектом амитриптилли-на. Как видно из результатов, приведенных в таблицах 1-5, под действием исследуемых препаратов существенно увеличивается время активных попыток животных выбраться из воды. Так, сухой экстракт зверобоя увеличивает ан-тидепрессантный эффект почти в 2 раза по сравнению с контролем. Настойка зверобоя продырявленного и «Деприм» увеличивают время движения животного в эксперименте на 25% и 48% соответственно. У исследованных фитопрепаратов обнаружена также некоторая анксиолитическая активность. Фитопрепараты значительно увеличивают время пребывания животных на открытых площадках приподнятого крестообразного лабиринта. Причем в случае исследования настойки зверобоя продырявленного время пребывания животного на центральной площадке приподнятого крестообразного лабиринта увеличивается в 2 раза. В случае сухого экстракта зверобоя и препарата «Деприм» в 2 раза возрастает время пребывания животных в открытых рукавах. Следует отметить, что «Зверобоя экстракт сухой», разработанный нами, показывает результаты, сопоставимые с зарубежным лекарственным средством «Деприм», а в некоторых случаях и превосходя его. Однако последний мы использовали в большей дозировке, учитывая процентное содержание основных БАС в анализируемых лекарственных средствах (табл. 1).

Выводы: обнаруженная нами антидепре-сантная активность флавоноидного вещества бисапигенина показывает, что этот компонент также влияет на развитие фармакотерапевти-ческого эффекта препаратов зверобоя. При исследовании антидепрессантной активности происходит увеличение времени движения животных на 58%. В случае исследования анксиолитической активности бисапигенина увеличивается время пребывания на центральной площадке на 81%, а пребывание в открытых рукавах возрастает в 6 раз. Это обстоятельство является очень важным, ведь данный компонент является уникальным для зверобоя травы. Следовательно, необходимым условием является обнаружение этого компонента при фитохимическом исследовании сырья и препаратов зверобоя травы.