Изучение основных показателей инактивированной вакцины против эширихиоза, псевдомоноза и энтерококковой инфекции поросят

Из инфекционной патологии болезней свиней значительное место занимают возбудители эшерихиоза, псевдомоноза и энтерок-ковой инфекции [4]. Особое место в инфекционной патологии принадлежит псевдомонозу.

Псевдомоноз в значительной степени является сдерживающим фактором развития животноводства и свиноводства, приносит значительный экономический ущерб данной отрасли, вызывая заболевания родополовых органов у свиноматок, хряков-производителей, а также значительную смертность у поросят сосунов [1, 3].

Микроорганизм Pseudomanas aeruginosa (синегнойная палочка) вызывающий данное заболевание за счет значительного количества факторов вирулентности (жгутиковый, адгезии, микополисахарид, экзотоксин, гемолизин, пиоцианин, протеазы и др.) [6], значительным распространением во внешней среде и сохранением вирулентности при росте на питательных средах, антибиотикорезистент-ности являются значительным этиологическим фактором заболеваемости животных и человека [2, 5].

Одной из основных проблем профилактики заболеваний бактериальной этиологии является разработка средств их специфической профилактики.

Целью работы являлось изучение основных показателей инактивированной вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза и эн- терококковой инфекции поросят.

Материалы и методы. Нами были проведены исследования инактивированной вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза и эн-терококковой инфекции поросят разработанной при нашем участии на ФКП «Армавирская биофабрика».

Исследования на стабильность вакцины проводились в соответствии с ГОСТ 28085089 «Препараты биологические. Методы бактериологического контроля смертности». На острую и хроническую токсичность на лабораторных животных проводились в лаборатории контроля качества ФКП «Армавирская биофабрика» с участием сотрудников биофабрики и ГБУ «Краснодарская краевая ветеринарная лаборатория».

Результаты исследований. При изучении стабильности вакцины против эшерихио-за, псевдомоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) серии №№ 1-3 в условиях хранения в соответствующих температурных режимах в течение наблюдения, вакцина сохраняет свои показатели.

При проверке на стерильность в специальных боксах лаборатории контроля качества биофабрики с соблюдение правил асептики из 5 флаконов серии №№ 1-3 произвели посевы на МПА, агар Сабуро, МПБ и МППБ под вазелиновым маслом в пробирки, по 2 пробирки каждой среды и во флаконы МПБ и МППБ под вазелиновым маслом. Через семь суток из первичных посевов во флаконы произвели пересев на аналогичные среды. Посевы на среде Сабуро выдерживали в термостатах при температуре 240 С, на средах МПА, МПБ, МППБ под вазелиновым маслом, при температуре 370 С в течение 14 суток, пересевы в течение 7 суток.

После окончания термостатирования признаков роста микроорганизмов на пита-ельных средах обнаружено не было. Опытно- промышленные партии вакцины являлись стерильными.

В лаборатории контроля качества ФКП «Армавирская биофабрика» было проведено исследование вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) на острую токсичность. В опытах использовали 40 белых мышей живой массой 16-18 г, которых разделили на 4 группы по 10 голов в каждой, а также на 20 кроликах породы шиншилла живой массой 2,5-3 кг, которых также разделили на 4 группы по 5 голов в каждой. Мышам вакцину вводили подкожно в области спины в следующих дозах (мл) – 0,125; 0,25; 0,5 и 1,0. Кроликам вакцину вводили внутримышечно в области бедра в дозах (мл) - 1,0; 5,0; 10,0 и 20,0. За клиническим состоянием животных производили ежедневно наблюдение в течение 10 суток.

Результаты опыта показали (Табл. 1 и 2), что ни в одной из опытных групп гибели лабораторных животных не было. Однако при введении мышам вакцины в дозе 1,0 мл, а кроликам 20,0 мл у животных развивалось заметное угнетение с полной потерей аппетита, а у отдельных особей отмечали диарею. На месте введения образовывалась припухлость, а спустя 48 ч появлялось уплотнение подлежащих тканей без образования нагноения и некроза. Общие признаки токсикоза исчезали через 24 ч, а уплотнения рассасывались через 7-8 дней.

При введении мышам вакцины в дозе от 0,125 до 0,5 мл и кроликам от 1,0 до 10,0 мл побочного действия препарата не наблюдали, все у всех подопытных животных габитус и поведение были физиологичными, припухлости, возникающие после инокуляции жидкости, рассасывались в течение 24 ч без признаков воспаления.

Таблица 1 – Результаты определения острой токсичности вакцины против эшерихиоза, псевдомо-ноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) при подкожном введении белым мышам

Доза, мл/гол	Количество животных	Пало	Выжило	% павших
0,125	10	0	10	0
0,25	10	0	10	0
0,5	10	0	10	0
1,0	10	0	10	0

Таблица 2 – Результаты определения острой токсичности вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) при внутримышечном введении кроликам

Доза, мл/гол	Количество животных	Пало	Выжило	% павших
1,0	5	0	5	0
5,0	5	0	5	0
10,0	5	0	5	0
20,0	5	0	5	0

Гибели лабораторных животных даже после максимально допустимых объемов, величину и параметры острой токсичности вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза, эн-терококковой инфекции поросят (инактивированной) определить не удалось, следовательно исследуемый биопрепарат относится к группе нетоксичных веществ.

В лаборатории контроля качества ФКП «Армавирская биофабрика» было проведено исследование вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) на хроническую токсичность. В опытах использовали 40 белых мышей живой массой 16-18 г, которых разделили на 4 группы по 10 гол в каждой, а также на 20 кроликах породы шиншилла живой массой 2,5-3 кг, которых также разделили на 4 группы по 5 гол в каждой. Мышам вакцину вводили пятикратно с интервалом в десять дней подкожно в области спины в следующих дозах (мл) – 0,125; 0,25; 0,5 и 1,0. Кроликам вакцину вводили пятикратно, с интервалом в десять дней внутримышечно в области бедра в дозах (мл) -1,0; 5,0; 10,0 и 20,0. За клиническим состоянием животных производили ежедневно наблюдение в течение 10 суток.

Результаты опыта показали (табл. 3 и 4), что ни в одной из опытных групп гибели лабораторных животных не было. Однако при 25 введении мышам вакцины в дозе 1,0 мл, а кроликам 20,0 мл у животных развивалось заметное угнетение с полной потерей аппетита, а у отдельных особей отмечали диарею. На месте введения образовывались припухлость и через 48 ч уплотнение подлежащих тканей без образования нагноения и некроза. Общие признаки токсикоза исчезали через 24 ч, а уплотнения рассасывались через 7-8 дней.

При пятикратном введении мышам вакцины в дозе от 0,125 до 0,5 мл и кроликам от 1,0 до 10,0 мл побочного действия препарата не наблюдали, все у всех подопытных животных габитус и поведение были физиологичными, припухлости, возникающие после инокуляции жидкости, рассасывались в течение 24 ч без признаков воспаления.

Таблица 3 – Результаты определения хронической токсичности вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) при подкожном введении белым мышам

Доза, мл/гол	Количество животных	Пало	Выжило	% павших
0,125	10	0	10	0
0,25	10	0	10	0
0,5	10	0	10	0
1,0	10	0	10	0

Таблица 4 – Результаты определения хронической токсичности вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) при внутримышечном введении кроликам

Доза, мл/гол	Количество животных	Пало	Выжило	% павших
1,0	5	0	5	0
5,0	5	0	5	0
10,0	5	0	5	0
20,0	5	0	5	0

Гибели лабораторных животных после     максимально допустимых объемов введения нет, величина и параметры хронической токсичности вакцины против эшерихиоза, псев-домоноза, энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) проявились незначительно, следовательно исследуемый биопрепарат нетоксичен.

Обсуждение результатов. Анализируя результаты проведенных исследований можно сделать вывод, что опытно-промышленные партии вакцин против эшерихиоза, псевдомо-ноза и энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) стерильны и сохраняют стабильные свойства.

При исследовании на острую токсичность при введении вакцины мышам в дозах от 0,125 до 0,5 мл и кроликам от 1,0 до 10,0 мл побочного действия не наблюдалось. При введении мышам вакцины в дозе 1,0 мл и кроликам 20,0 мл у животных отмечались признаки токсикоза и уплотнения тканей без некроза, но они приходили в норму через 7-8 дней. Аналогичные результаты были получены при исследовании на хроническую токсичность при 5-кратном введении с интервалом в 10 дней.

Заключение. Таким образом, проведенные исследования подтвердили стерильность, стабильность и отсутствие острой и хронической токсичности опытнопромышленных партий вакцины, что позволяет рекомендовать использование вакцины для производственных исследований на свиноматках, поросятах сосунах и хряках-производителях.

Резюме

В результате проведенных исследований установлено, что опытно-промышленные партии вакцины против эшерихиоза, псевдомоноза и энтерококковой инфекции поросят (инактивированной) стерильны и сохраняют стабильные свойства. При исследовании на острую токсичность при введении вакцины мышам и кроликам побочного действия не наблюдалось. Аналогичные результаты были получены при исследовании на хроническую токсичность. Таким образом, проведенные исследования подтвердили стерильность, стабильность, отсутствие острой и хронической токсичности опытно-промышленных партий вакцины, что позволяет рекомендовать их использование для производственных испытаний.