Изучение острой токсичности полиферментных препаратов «Гимизим» и «Нист» при их пероральном введении перепелам

Одно из ведущих мест среди отраслей животноводства, которые вносят весомый вклад в экономику нашей страны, является птицеводство.

В последнее время достаточно много внимания уделяется разведению перепелов и получению от них экологически чистой продукции. Это можно объяснить тем, что перепела невосприимчивы по многим видам возбудителей болезней, в отличие от других видов птиц. Их мясо и яйца относятся к диетическим продуктам и имеют высокие питательные свойства [3, 7, 8].

Несмотря на короткий период откорма, в рационах перепелов, также, как и в рационах других сельскохозяйственных птиц [2, 5, 10], показано применение кормовых добавок, ускоряющих рост и способствующих более быстрому набору массы [4, 6, 1]. Для повышения усвояемости корма и более быстрого увеличения продуктивности нами был использованы полиферментные препараты «Гимизим» и «НИСТ» в качестве кормовой добавки в кормлении перепелов.

Однако все используемые добавки требуют всестороннего изучения и, в первую очередь, их токсикологической оценки [9].

В связи с вышесказанным была проведена токсикологическая оценка полиферментных препаратов «Гимизим» и «НИСТ», которые представляют собой светло-коричневый сыпучий порошок с характерным запахом. Изучаемые препараты являются комплексными полиферментными препаратами для глубокого расщепления и усвояемости питательных веществ корма вне организма, а также расщепления антипитательных веществ кормов, затрудняющих пищеварение у животных. Они содержат комплекс протеолитических, амилолитических, липолитических, целлюлозолитических, пектолитических и ксиланазных ферментов, позволяющих увеличить усвояемость зернофуражных смесей на основе ячменя, пшеницы, и, что особенно важно, ржи.

Протеолитическая активность для препарата «Гимизим» составляет 2 ед./г и «НИСТ» – 4 ед./г, амилолитическая – 900 и 700 ед./г, экзо-β-глюконазная – 140 и 120 ед./г, а также препараты обладают целлюлазной, ксиланазной, липазной и фитазной активностью. В состав обоих препаратов входят антиоксидант, антисептик-спороцит, фунгицид, вещества, увеличивающие сыпучесть и гигроскопичность, адсорбент-носитель и протеолитические, амилолитические, целлюлозолитические, липолитические, пектолитические и фитолитические ферменты, обеспечивающие гидролиз питательных веществ вне организма до простых, легко усваиваемых организмом форм.

В предварительных исследованиях было установлено, что под воздействием ферментов, содержащихся в препаратах «Гимизим» и «НИСТ», белки корма гидролизуются до низших пептидов и отдельных аминокислот, полисахариды (целлюлоза и крахмал) в глюкозо-мальтозную смесь, а вещества с антипитательными свойствами белковой природы (пектины, фитиновая кислота и т.п.), расщепляются до таких форм, которые не оказывают отрицательного воздействия на процесс пищеварения и организм животных, что позволяет улучшить усвояемость комбикормов. Кроме того, вместе с ферментативным гидролизом питательных веществ, под действием высокой температуры происходит пастеризация кормов.

Поскольку все препараты, перед широким применением в животноводстве, должны пройти предварительную токсикологическую оценку, перед нами стояла задача изучить острую токсичность отечественных полиферментных препаратов «Гимизим» и «НИСТ», что являются актуальным началом для длительного применения в перепелководстве.

Впервые были проведены исследования по изучению острой токсичности полиферментных препаратов «Гимизим» и «НИСТ», а также научно обоснована их безопасность и возможность их применения в кормлении перепелов.

Материал и методы исследований. Исследования были проведены в условиях лаборатории кафедры технологии животноводства и зоогигиены ФГБОУ ВО Казанская ГАВМ. Опытные и контрольные группы формировали из клинически здоровых птиц по принципу аналогов, с учётом возраста и живой массы. В научном опыте было изучено влияние различных доз полиферментного препарата «Гимизим» и «НИСТ» на клиническое состояние перепелов.

Острую токсичность полиферментных препаратов проводили, используя метод Кербера, на 66 перепелках двухмесячного возраста массой тела 180200 г. Птицы были разделены на 6 групп по 6 птиц в каждой.

При введении птицам различных доз нативных полиферментных препаратов в виде 10 мл водной супензии, а также дистиллированной воды в контроле, использовали металлический зонд с напаенной оливой на конце, который вводили в железистый желудок птиц. Первая группа служила контролем, ей вводили воду в дозе 10 мл. Второй группе в желудок вводили 300 мг «Гимизим» или «НИСТ» в виде водной суспензии, третьей - 700 мг, четвёртой – 1100 мг, пятой – 1500 мг и шестой – 1900 мг (Таблица 1).

Таблица 1 – Схема опыта по введению различных доз препаратов «Гимизим» и «НИСТ» перепелам

Группа	Количество птиц, гол	Продолжительность опыта, часов	Характеристика кормления
1 контроль	6	48	ОР- основной рацион
2 опыт	6	48	ОР + 300 мг «Гимизим»/«НИСТ»
3 опыт	6	48	ОР + 700 мг «Гимизим»/«НИСТ»
4 опыт	6	48	ОР + 1100 мг «Гимизим»/«НИСТ»
5 опыт	6	48	ОР + 1500 мг «Гимизим»/«НИСТ»
6 опыт	6	48	ОР + 1900 мг «Гимизим»/ «НИСТ»

По формуле Кербера рассчитывали среднесмертельную дозу (LD 50 ), вызывающую гибель 50% птиц:

S (Z x d)

ЛД50 = ЛД100--------, где

m

ЛД 100 – доза, при которой погибли все птицы; Z – среднее арифметическое из числа погибших двух смежных доз; d – разница величин двух доз, стоящих рядом; m – количество птиц в группе

Экспериментальное определение LD 50 слагалось из двух этапов: ориентировочного и развёрнутого (предварительного и основного). В первом мы получаем предварительную информацию о диапазоне доз, близких к среднесмертельной. Далее, в развёрнутом опыте, испытывали 5 доз от 300 мг/кг и до 1900 мг/кг, а также наблюдалась контрольная группа (вводили дистиллированную воду в количестве 10 мл), наивысшая доза составляла LD 100 .

Результат исследований. Начало первых признаков интоксикации в шестой группе появились по истечении 40-50 минут, в виде угнетённого состояния, отказом от корма и воды, взъерошенностью перьев, тремора конечностей. Спустя 90 минут в шестой группе с признаками острой интоксикации пало 3 птицы, далее признаки интоксикации нарастали и по истечении 5 часов погибли ещё 3 перепёлки.

Таблица 2 – Определение острой токсичности полиферментного препарата «Гимизим» по методу Кербера

№ группы	Доза мг/кг	Количество птиц			Z	D	Z*D
		всего	пало	выжило
1	-	6	0	6	-	-	-
2	300	6	0	6	-	-	-
3	700	6	2	4	1	400	400
4	1100	6	4	2	3	400	1200
5	1500	6	5	1	4,5	400	1800
6	1900	6	6	0	5,5	400	2200

ЛД50 = 1900 - (400+1200+1800+2200) = 967 мг/кг

Клинические признаки интоксикации в пятой группе появились по истечении 80 минут, в виде угнетённого состояния, отказом от корма и воды, взъерошенностью перьев. По прошествии 1,5 часов в этой группе, с аналогичными клиническими признаками, пало 2 птицы, далее признаки интоксикации нарастали и по истечении 7 часов погибли ещё 3 перепёлки. Клиника отравления у птиц четвертой группы была выражена слабее. Первые их симптомы были отмечены по прошествии 3-4 часов после введения «Гимизим» и также выражались отказом от корма, птицы были заторможенными, у перепелов, которые погибали, отмечался тремор конечностей. По истечении 24 часов погибло 4 птицы, а у выживших двух перепёлок, по истечении 48 часов, признаки интоксикации исчезли и они остались живы. В третьей группе пало 2 птицы, через 8 и 20 часов. После 24 часов, признаки интоксикации, у оставшихся четырех перепёлок исчезли, и они остались живы.

Во второй группе у трех птиц из шести отмечались слабые признаки интоксикации, падежа птиц не наблюдалось.

При вскрытии трупов, патологоанатомическая картина погибших перепёлок была идентична, при этом, отмечали кровенаполнение сердца, в печени - застойные явления, отмечены точечные кровоизлияния на слизистой желудочно-кишечного тракта, в селезёнке -мозговой и корковый слои размыты. В пятой и шестой группах железистый и мышечный желудки, а также кишечник на всём протяжении были вздуты и наполнены газами и светлой жидкостью.

При введении различных доз препарата «НИСТ» первые признаки интоксикации в шестой группе появились по истечении 30-45 минут, в виде угнетённого состояния, отказом от корма и воды, взъерошенностью перьев, тремора конечностей. По прошествии 84 минут в пятой группе с признаками острой интоксикации погибло 3 птицы, далее с аналогичными признаками интоксикации в течение двух часов погибли ещё 3 перепёлки.

Таблица 3 – Определение острой токсичности полиферментного препарата «НИСТ» по методу Кербера

№ группы	Доза мг/кг	всего	Количество пти пало	ц выжило	Z	D	Z*D
1	2	3	4	5	6	7	8
1	-	6	0	6	-	-	-
2	300	6	0	6	-	-	-
3	700	6	3	3	1,5	400	600
4	1100	6	4	2	3,5	400	1400
5	1500	6	6	0	5	400	2000
6	1900	6	6	0	6	400	2400
600 + 1400 + 2000 + 2400 6

Клинические признаки интоксикации в пятой группе появились по истечении одного часа, также в виде угнетённого состояния, отказа от корма и воды, взъерошенностью перьев. По истечении 1,5 часов в этой группе с признаками острой интоксикации пало 2 птицы, далее с аналогичными признаками интоксикации спустя 4 часа погибли оставшиеся 4 перепёлки.

Признаки отравления у птиц четвёртой группы были выражены слабее. Первые их симптомы были замечены по прошествии трех часов после введения «НИСТ» и также выражались отказом от корма, птицы были заторможенными, у погибших птиц отмечался тремор конечностей. По истечении 18 часов с начала введения препарата погибло четыре птицы, через 48 часов, признаки интоксикации у оставшихся двух перепёлок исчезли, они стали принимать корм и воду и остались живы.

В третьей группе пало 3 птицы, одна через пять часов и две спустя 15 часов. У птиц этой группы также отмечались вялость, взъерошенность перьев. После 48 часов, клинические признаки у оставшихся четырех перепёлок нормализовались, и они все остались живы. Наблюдение за выжившими птицами продолжались в течение двух недель, во время которых клинические признаки у оставшихся перепёлок были в пределах физиологической нормы.

Во второй группе каких-либо признаков интоксикации не наблюдалось.

При вскрытии трупов погибших перепёлок, патологоанатомическая картина была аналогично таковой при введении токсичных доз «Гимизим» и характеризовалась кровенаполнением сердца; легкие и слизистая желудка без видимых изменений. В пятой и шестой группах желудки и кишечник на всём протяжении были вздуты и заполнены газами и светлой жидкостью

Заключение. Таким образом, при расчёте острой токсичности полиферментного препарата «Гимизим» среднесмертельная доза для перепёлок составляет 967 мг/кг. Среденесмертельная доза полиферментного препарата «НИСТ» составляет 833 мг/кг. Согласно ГОСТ 12.1.007.76 по степени опасности полиферментные препараты «Гимизим» и «НИСТ» относятся к 3 классу токсичности - умеренноопасные, а по гигиенической классификации - малотоксичные соединения (Л.И. Медведь, Ю.С. Каган, Е.И. Спыну, 1986).

Резюме

Целью научного эксперимента являлось изучение острой токсичности полиферментных препаратов «Гимизим» и «НИСТ» на перепелах. В ходе опыта было установлено, что среднесмертельная доза для препарата «Гимизим» составляет 967 мг/кг, а «НИСТ» - 833 мг/кг. Исходя из полученных результатов, было сделано заключение, что по степени опасности полиферментные препараты «Гимизим» и «НИСТ» относятся к 3 классу токсичности, то есть умеренно опасные, а по гигиенической классификации к малотоксичным соединениям. Исходя из полученных данных, можно сделать вывод о том, что исследуемые препараты не опасны и могут применяться в кормлении перепелок.