Изучение стабильности лекарственного средства «СВ» для сухих копытных ванн

Болезни пальцев и копытец крупного рогатого скота незаразной и инфекционной этиологии широко распространены во всех крупных и мелких сельхозпредприятиях, занимающихся молочным и мясным скотоводством [1, 12, 15].

В связи с этим, в ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», разработано новое лекарственное средство «СВ», предназначенное для проведения групповой и индивидуальной профилактики и лечения крупного рогатого скота методом сухих копытных ванн. В качестве активнодействующих и вспомогательных компонентов в «СВ» используются: бентонит, сульфат меди, сульфат цинка, поливиниловый спирт, перлит, камфорное масло и бензолсульфохлорамид натрия, которые тщательно смешивают до состояния гигроскопичного порошка. Все используемые компоненты препарата широко представлены на рынке страны, являются не дорогостоящими и доступными, поэтому конечная стоимость средства «СВ» вполне приемлема для крупных и средних сельхозпредприятий и мелких подсобных хозяйств [13].

Предварительные испытания разработанного средства «СВ» в ряде сельхозпредприятий Республики Татарстан, Нижегородской и Кировской областей, неблагополучных по болезням пальцев и копытец крупного рогатого скота незаразной и инфекционной этиологии, свидетельствуют о высокой эффективности данного средства и возможности дальнейшего внедрения его в систему мероприятий по борьбе с болезнями пальцев и копытец крупного рогатого скота [14].

Стабильность лекарственного средства является важным показателем его качества и связана со способностью сохранять химические, физические, микробиологические свойства в процессе хранения. Изучение стабильности проводят с целью получения данных о том, как меняются показатели качества и безопасности лекарственных средств под влиянием различных факторов окружающей среды, таких как температура, влажность, освещение и т.д.

Цель – изучение стабильности лекарственного средства «СВ» для проведения групповой профилактики и лечения коров с болезнями пальцев и копытец методом сухих копытных ванн.

Материал и методы исследования. Испытания по стабильности лекарственного средства проводили в лаборатории ветеринарной санитарии отделения биотехнологии ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» согласно ГФ РФ ОФС.1.1.0009.18 «Стабильность и сроки годности лекарственных средств» [10] через определенные интервалы времени (3, 6, 9 и 12 месяцев хранения). Образец анализировали по органолептическим, биологическим и физико-химическим показателям, используя одну серию лекарственного средства.

Лекарственное средство «СВ» хранили в течение всего периода исследования в бумажном пакете (из крафт-бумаги) объемом 1 дм3 при температуре от +10 °C до +25 °C в сухом, чистом вентилируемом помещении в защищенном от влаги и света месте.

Были изучены такие показатели качества, как внешний вид и цвет, наличие посторонних примесей, бактериальное обсеменение, безвредность, pH, растворимость в воде, герметичность упаковки, массовая доля влаги и золы, адсорбционная активность по метиленовому синему, йоду и желатину.

Внешний вид, цвет и наличие посторонних примесей определяли визуально.

Стерильность лекарственного средства изучали в соответствии с ОФС.1.2.4.0003.15 методом прямого посева [9].

Безвредность лекарственного средства определяли по ГОСТ 31926-13 на белых мышах пероральным и накожным методами. [5]. Для опыта брали клинически здоровых животных. Каждая группа состояла из белых мышей обоего пола массой 19-21 г. При введении «СВ» перорально, до опыта не кормили и не поили животных в течении 2 часов. Животных разделили на 4 группы. Первая группа считалась контрольной, второй группе вводили «СВ» в дозе 2000 мг/кг, третьей – 4000 мг/кг, четвертой – 6000 мг/кг внутрижелудочно в форме суспензии.

Наблюдение за животными ввели в течении 14 дней после введения лекарственного средства. Оценивали общее состояние, поведение и аппетит

Накожно исследовали «СВ» в двух дозах 300 мг/кг (первая группа), 30 мг/кг (вторая группа). Готовую смесь наносили на выстриженный участок кожи животных. В течение всего периода опыта проводили клинические наблюдения за общим состоянием животных. Реакцию кожи регистрировали через 15; 30 мин, 24; 48 и 72 ч и оценивали в сравнении с симметричным (контрольным) участком кожи того же животного. Отмечали наличие или отсутствие функциональных нарушений кожи (различной степени эритемы, отека, изменения температуры кожи). Выраженность эритемы оценивали в баллах по классификации С.В. Суворова.

При отсутствии падежа, мышей усыпляли медицинским эфиром и вскрывали. Вскрывали животных с соблюдением санитарно-гигиенических норм. Отмечали наличие или отсутствие функциональных нарушений внутренних органов (желудочно-кишечного тракта, печени, селезенки, почек) при вскрытии мышей.

Герметичность упаковки определяли по ГОСТ 33772-2016 [3].

Определение рН проводили на рН-метре рН-150 МИ. Для этого навеску средства «СВ» массой 10 г помещали в коническую колбу вместимостью 250 см3, приливали 90 см3 дистиллированной воды. Затем колбу закрывали пробкой, ее содержимое встряхивали в течение 5 мин. Суспензию переливали в стеклянный стакан и замеряли рН с помощью прибора. Допускаемое расхождение между результатами трех параллельных измерений не должно превышать 0.1 единицы pH [2].

Для определения растворимости к 1,0 г «СВ» приливали 1,0 мл дистиллированной воды. Учет растворимости проводили после охлаждения раствора до 20±2 °C и встряхивания в течение 1-2 мин.

Для определения массовой доли влаги [4], пробу лекарственного средства помещали в предварительно взвешенные бюксы, которые закрывали крышками и взвешивали. После взвешивания с них снимали крышки и отправляли в сушильный шкаф на 60 минут при температуре 105 °C. По окончанию сушки бюксы закрывали крышками и переносили в эксикатор для охлаждения до комнатной температуры в течение 25 минут, затем бюксы взвешивали, результаты взвешивания вычисляли по формуле.

Массовую долю влаги в процентах вычисляли по формуле (1):

X =

Ml - М2

Ml - MO

* 100

где М1 – масса бюксы с пробой до высушивания, г

М2 – масса бюксы с пробой после высушивания, г

М0 – масса бюксы без пробы, г.

Массовую долю золы определяли согласно     ОФС.1.2.2.2.0013.15     [8].

Адсорбционную активность изучали в отношении индикаторов метиленового синего согласно ГОСТ 4453-74 [7], йода – ГОСТ 6217-74 [6], желатина – методике В.И. Решетникова [11].

Статистическая обработка данных проводилась в программном продукте Statistica 6.0 c использованием методов описательной и сравнительной статистики.

Таблица 1 – Изучение стабильности «СВ» по физико-химическим показателям

№ п/п	Показатели качества	Критерии приемлемости	Точки контроля во времени
			0 мес	3 мес	6 мес	9 мес	12 мес
1	рН	Не более 6,0 %	4,98± 0,01	4,90± 0,01	4,85± 0,01	4,80± 0,01	4,65± 0,01
2	Массовая доля	Не более	8,10±	9,10±	9,51±	9,64±	9,87±
	влаги	15,0 %	0,01	0,01	0,01	0,01	0,01
3	Массовая доля золы	Не более 60,0 %	55,2	55,8	56,1	56,7	57,4

При изучении основных физикохимических показателей таких как pH, массовая доля влаги, массовая доля золы отмечены колебания их значений. Так pH за весь период исследования снизился на 6,6 %, массовая доля влаги увеличилась на 21,9 %, а массовая доля золы на 4,0 %. При через 12 месяцев хранения не вышли за критерии приемлемости, указанные в таблице 1.

На рисунке 1 показаны изменения адсорбционной активности «СВ» в процессе хранения.

этом перечисленные показатели качества

4,7 4.63 4.57 4.5 4 32

Illi

Желатин                      Метиленовый синий

■ Омес иЗмес ибмес и9мес 12мес

Под

■ Омес вЗмес вбмес и9мес 12мес

Рисунок 1 – Адсорбционная активность «СВ» по йоду, желатину и метиленовому синему

Адсорбционная активность «СВ» по индикаторам метиленовому синему, йоду, и желатину в течении всего периода срока хранения лекарственного средства снизилась по сравнению с исходными значениями (0 мес) на 8,1, 5,2 и 6,7 %.

Заключение.    На основании проведенных исследований стабильности лекарственного средства «СВ» в процессе хранения в течении 12 месяцев, изучаемые показатели не вышли за критерии приемлимости, что говорит о стабильности образца.

Таким образом, лекарственное средство «СВ» после дальнейшего всестороннего изучения его свойств может быть внедрено в систему мероприятий по борьбе с болезнями пальцев и копытец в сельхозпредприятиях, неблагополучных по заболеваниям дистального отдела конечностей.