Изучение терапевтической эффективности Димикара при экспериментальном моделировании окислительного стресса у кроликов

Свободнорадикальное окисление является нормальным физиологическим процессом жизнедеятельности организма, протекающим с участием продуктов неполного восстановления молекулярного кислорода [3,4, 6].

В настоящее время свободнорадикальное окисление рассматривается как один из основных патогенетических механизмов в развитии различных заболеваний человека и животных. Усиление свободнорадикальных процессов при возникновении патологических процессов, а также нарушение баланса между анти- и прооксидантными системами приводит к развитию окислительного стресса, который в свою очередь вызывают повреждение клеток и тканей организма [4, 5].

Антиоксидантные препараты применяют при лечении заболеваний, сопровождающихся усилением перекисного окисления липидов и гипоксией. Благодаря своему широкому спектру фармакологического действия они оказывают влияние на основные звенья патогенеза многих заболеваний, связанных со свободнорадикальнымипроцессами и кисло-родзависимыми патологическими состояниями [1, 2, 6].

Современный отечественный рынок испытывает дефицит антиоксидантных ветеринарных препаратов для сельскохозяйственных животных. В связи с этим возникает необходимость в разработке и внедрении в производство новых высокоэффективных лекарственных форм для повышения резистентности организма животных.

Целью работы явилось изучение эффективности нового антиоксидантного препарата «Димикар» в лечении экспериментально смоделированного окислительного стресса у кроликов.

Препарат «Димикар» разработан на кафедре терапии и фармакологии Ставропольского ГАУ и представляет собой водный раствор светло-коричневого цвета, без запаха, предназначен для внутримышечного введения.

Материал и методы . Для постановки эксперимента использовали 30 кроликов в возрасте 7-9 месяцев, которых разделяли с учетом принципа аналогов на 3 группы по 10 животных в каждой. Животные из первой группы служили контролем. На кроликах второй группы проводили моделирование окислительного стресса, путем перорального введения сульфата железа (II) в дозе 0,04 мг на 1 мл воды для инъекций, один раз в сутки, на протяжении 7 дней. Применение сульфата железа (II) связано с тем, что он реагирует с целым рядом органических соединений в клетке животного, сдвигая его редокс-статус в прооксидантную сторону. Животных третьей группы подвергли аналогичной схеме воздействия сульфата железа(II), но, начиная со второго дня исследований, стали вводить препарат «Димикар» внутримышечно в дозе 3,4

мг/кг массы тела, для активизации системы антиоксидантной защиты организма.

У всех животных провели взятие крови из ушной вены до введения препаратов, через 1, 3, 5 и 7 суток после введения для последующего биохимического анализа. В крови определяли основные показатели системы антиоксидантной защиты: активность каталазы, супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы, глутатион восстановленный, а также продукты перекисного окисления липидов – диеновые конъюгаты, малоновый диальдегид, основания Шиффа. Произвели контрольное взвешивание кроликов на момент начала исследований, через 3 суток и по их завершению.

Результаты исследований. Полученные результаты исследования крови свидетельствуют об изменении активности основных ферментов системы антиоксидантной защиты организма у кроликов (табл. 1).

Таблица 1 - Показатели системы антиоксидантной защиты организма у кроликов, (n=10)

в В	Активность каталазы, Н 2 О 2 / сл·мин·103	Активность суперок-сиддис-мутазы, ед.акт. /мг гемоглобина	Активность глутатионпе-роксида-зы, мкМG-SH/л мин·103	Глутатион восстановленный, ммоль/л
До введения препаратов
1	23,59±1,23	1,61±0,13	7,97±0,22	0,35±0,02
2	23,75±1,30	1,63±0,12	7,95±0,24	0,37±0,03
3	23,68±1,27	1,62±0,10	7,94±0,26	0,38±0,03
Через 1 сутки после введения
1	23,78±1,38	1,60±0,11	8,00±0,30	0,34±0,01
2	21,90±1,33	1,59±0,12	7,68±0,29	0,33±0,02
3	22,06±1,29	1,60±0,09	7,71±0,27	0,35±0,03
Через 3 суток после введения
1	24,09±1,31	1,62±0,09	8,01±0,26	0,35±0,02
2	20,56±1,34	1,56±0,08	7,42±0,23	0,31±0,02
3	21,89±1,32	1,59±0,10	7,73±0,27	0,33±0,01
Через 5 суток после введения
1	24,47±1,30	1,64±0,10	7,98±0,32	0,36±0,02
2	19,11±1,29*	1,52±0,07	7,29±0,26*	0,28±0,02*
3	21,73±1,26	1,58±0,09	7,75±0,29	0,32±0,03
Через 7 суток после введения
1	24,85±1,25	1,65±0,07	7,99±0,28	0,35±0,01
2	18,33±1,27*	1,45±0,06*	7,14±0,25*	0,26±0,02*
3	21,52±1,24	1,58±0,08	7,76±0,28	0,33±0,01

Примечание: *р≤0,05 – разницастатистически достоверна в сравнении с данными контрольной группы

Активность каталазы в первой группе постепенно увеличивалась, но незначительно – от 0,81% до 1,58%, а группах, где производили моделирование окислительного стресса – наоборот, уменьшалась. Во второй группе активность фермента снижалась от 4,08% до 7,79%, а третьей – от 0,77% до 6,84%. Если рассматривать динамику активности каталазы за весь период эксперимента, то можно отметить, что в контрольной группе она увеличи- лась на 5,34%, во второй группе – уменьшилась на 22,82%, а в третьей – на 9,12%, соответственно.

Активность супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы была менее показательной, но динамика наблюдалась аналогичная. В контрольной группе активность ферментов за весь период опыта значительно не изменилась, во второй группе – уменьшилась на 11,04% и 10,19%, а в третьей – на 2,47% и 2,27%, соответственно.

Глутатион, восстановленный через 1 сутки после введения препаратов, умень-шился во всех группах, в первой – на 2,86%, во второй – на 10,81%, а в третьей – на 7,89%, соответственно. Данный показатель максимально уменьшился через 5 суток после введения препарата и достиг достоверных отличий. За весь период эксперимента уровень глутатиона во второй группе уменьшился на 29,73%, а в третьей группе – на 13,16%, соответственно.

Концентрация продуктов перекисного окисления в крови у кроликов постепенно увеличивалась во всех группах (табл. 2). Концентрация диеновых конъюгатов в крови животных из первой группы за весь период эксперимента увеличилась на 3,23%, во второй группе – на 40,0%, а в третьей – на 15,63%, соответственно. Концентрация малонового диальдегида увеличилась в первой группе на 1,21%, во второй – на 21,47%, а в третьей – на 9,76%.

Таблица 2 - Концентрация продуктов перекисного окисления липидовв крови кроликов, (n=10)

№ группы	Диеновые конъюгаты, ед. опт. пл. / мг липидов	Малоновыйдиальдегид, мкмоль/л	Основания Шиффа, отн.ед / сыворотки
До введения препаратов
1	0,31±0,01	1,65±0,07	0,25±0,01
2	0,30±0,01	1,63±0,06	0,27±0,02
3	0,32±0,02	1,64±0,05	0,26±0,02
Через 1 сутки после введения
1	0,32±0,02	1,66±0,08	0,24±0,01
2	0,33±0,02	1,74±0,09	0,29±0,03
3	0,34±0,03	1,71±0,07	0,28±0,02
Через 3 суток после введения
1	0,30±0,02	1,66±0,09	0,25±0,01
2	0,36±0,02*	1,81±0,10	0,33±0,02*
3	0,34±0,02	1,74±0,08	0,29±0,02
Через 5 суток после введения
1	0,31±0,01	1,65±0,06	0,26±0,01
2	0,40±0,03*	1,90±0,09*	0,34±0,02*
3	0,35±0,02	1,79±0,09	0,30±0,01*
Через 7 суток после введения
1	0,32±0,01	1,67±0,08	0,25±0,01
2	0,42±0,03*	1,98±0,11*	0,35±0,02*
3	0,34±0,02	1,80±0,09	0,29±0,01*

Примечание: *р≤0,05 – разницастатистически достоверна в сравнении с данными контрольной группы

Концентрация оснований Шиффа максимально увеличилась через 5 суток после введения препарата, в первой группе на 4,0%, во второй группе – на 25,93%, а в третьей – на 15,38% и достигла достоверных отличий. Динамика конечных продуктов окисления в контрольной группе практически не изменялась и находились в равных пределах, а во второй и третьей группах она увеличилась на 29,63% и 11,54%, соответственно.

В первой группе масса тела животных постепенно увеличивалась, а во второй и третьей группах происходило снижение массы тела кроликов, при этом максимальное уменьшение обнаружено при взвешивании через 3 дня после введения препарата (табл. 3). Во второй группе масса тела через 3 суток снизилась на 4,1%, а в третьей – на 2,9%, соответственно.

Таблица 3 - Динамика массы тела кроликов, (n=10)

№ группы	Масса тела, г
	До введения препарата	Через 3 суток после введения	Через 7 суток после введения
1	2140,8±198,3	2172,4±204,1	2208,7±179,4
2	1982,6±217,5	1901,3±230,2	1877,5±202,8
3	2228,4±239,4	2163,8±208,3	2157,1±220,6

Динамика массы тела за весь период опыта была положительной только в первой группе, где увеличение составило 1,6%, во второй группе масса тела уменьшилась на 5,3%, а в третьей – на 3,2%, соответственно.

Заключение. В результате проведенных исследований установлено, что введение сульфата железа (II)у кроликов повлекло за собой изменение антиоксидантного статуса организма, выражающееся в снижении активности основных ферментов системы антиоксидантной защиты и увеличении концентрации продуктов перекисного окисления липидов. Применение препарата «Димикар» кроликам в дозе 3,4 мг/кг по действующему веществу способствует снижению уровня свободных радикалов и нормализации антиоксидантных показателей в крови.

Таким образом, применение препарата «Димикар» сопровождается выраженным антиоксидантным эффектом и может быть рекомендован для клинического испытания на продуктивных животных в качестве антиоксидантного средства.

Резюме

В статье представлены результаты изучения нового антиоксидантного препарата «Димикар» при экспериментальном моделировании окислительного стресса на кроликах. Установлено, что его применение в дозе 3,4 мг/кг по действующему веществу способствует нормализации процессов перекисного окисления липидов и показателей антиоксидантной системы.