Изыскание экспресс метода диагностики туберкулеза крупного рогатого скота

Одной из важнейших проблем в животноводстве являются инфекционные болезни, среди которых была и остается проблема туберкулеза. Существующие методы диагностики туберкулеза, такие как: внутрикожная проба с ППД-туберкулином, серологические методы (РСК, ИФА), патологоанотомические, бактериологические, биологическая проба являются достоверными и взаимодополняющими друг друга, но все они занимают продолжительное время и трудоемки. В условиях современного сельскохозяйственного производства, особенно на крупных животноводческих комплексах, где концентрировано большое количество поголовья животных, проведение профилактических мероприятий по обеспечению надежного эпизоотического благополучия и продовольственной безопасности, разработка экспресс методов диагностики является практической необходимостью. С этой целью возникает потребность в более легком, простом и, самое главное, краткосрочном экспресс-методе постановки диагноза на туберкулез крупного рогатого скота (КРС).

Материалы и методы. Работа проводилась в Академии наук Республики Татарстан, Института прикладной физики РАН (Нижний Новгород) и на кафедре микробиологии федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана», Республиканской ветеринарной лаборатории. Иммуноферментный анализ, а так же биопроба на морских свинках проводились в Республиканской ветеринарной лаборатории. Внутрикожная туберкулиновая проба проводилась в хозяйствах РТ. Испытание и анализ метода высыхающей капли были проведены в институте прикладной физики РАН.

Для оценки экспресс-метода диагностики туберкулеза КРС в производственных условиях, отобраны кровь и молоко у коров из ООО «Вахитова» Кукморского района благополучного по туберкулезу (контрольная группа); в качестве опытных хозяйств использованы: ООО «Зай» Заинского района и ООО А/Ф «Вамин» Чистопольского района (ранее благополучные по туберкулезу хозяйства), а также КФХ «Зубов» Новошешминского района (неблагополучное по туберкулезу хозяйство). В то же время при плановых диагностических исследованиях среди КРС в данных хозяйствах ежегодно выявлялись реагирующие на туберкулин животные, а при контрольно-диагностическом убое и лабораторных исследованиях туберкулез не подтверждался. Для испытания эффективности метода высыхающей капли, экспресс – диагностики туберкулеза крупного рогатого скота, использованы образцы в количестве 90 проб, в том числе 30 проб цельной крови коров с трилоном Б, 30 - сыворотки крови, 30 проб молока, реагирующих на внутрикожное введение ППД-туберкулина. Для сравнительного контроля аналогичный биоматериал взят от коров благополучного по туберкулезу стада в количестве 30 проб (по10 проб каждого биоматериала). Исследуемые биологические жидкости также подвергали серологической реакции (ИФА) для оценки эффективности метода высыхающей капли. Кроме того опыты проведены на морских свинках в количестве 10 голов, предварительно зараженных микобактериями туберкулеза бычьего вида шт. 14 - 5 голов и 5 интактные-контроль. По истечению 11 недель после заражения от животных также были взяты образцы крови, на 12 неделе животные подвергнуты патологоанатомическому вскрытию. Параллельно проведены испытания диагностических возможностей технологии высыхающей капли [4, 1].

Результаты исследований. Исследование взятых проб проводились в сравнительной оценке с контрольными образцами, исключающими не точность исследований. В результате проведенных исследований было выявлено: образцы биологических жидкостей от КРС (кровь, молоко, сывортока крови) реагирующих на ППД-туберкулин, давали разные положительные результаты в различных исследованиях. В иммуноферментом анализе было выявлено следующее: в крови от исследуемых образцов установлена положительная реакция в 27 пробах, в сыворотке крови в 29, а в молоке в 27 из исследуемых 30 проб. Параллельно эти же образцы исследовались методом высыхающей капли, где результаты были таковы: молоко в 26 пробах, кровь в 28, в сыворотке крови в 27 пробах из 30 эксперементальных проб каждого образца. Помимо образцов от КРС были взяты и подвергнуты диагностике образцы от предварительно зараженных морских свинок. В результаты иммуноферментного анализа биологических образцов от морских свинок установлено положительная реакция на туберкулин в цельной крови 4, а в сыворотке крови у 5 из 5 подопытных животных. Эти же образцы при исследовании методом высыхающей капли получены анологичные результаты. По истечению 12 недель после заражения 5 морских свинок провели их патологоанатомическое вскрытие и установлены у всех подопытных животных положительные результаты на туберкулез, которые выражались генерализованной формой туберкулеза с поражением лимфатических узлов, печени и селезенки.

Результаты экспериментальных исследований по сравнительной оценке экспресс диагностики методом высыхающей капли с внутрикожной пробой с ППД-туберкулином, иммуноферментным анализом, патологоанотомическим и биологической пробой цельной крови, сыворотки крови, молока КРС и тканей органов морских свинок приведены в таблице.

Таблица. Результаты экспериментальных исследований.

Казаков, В.Г. Яхно. Новая технология исследования многокомпонентных жидкостей с использованием кварцевого резонатора. Теоретическое обоснование и приложения. // ЖТФ, 2009, 79,10, 22-29. 2. . Сафин М.А. Критерии снятия ограничений по туберкулезу при продолжительном выявлении реагирующего на туберкулин крупного рогатого скота. /М.А.Сафин, Р.С.Сибгатуллин, Ф.Г.Акберов// Ученые записки КГАВМ. – Казань, 2002. – С. 110-114. 3. Р.Г. Ильязов. Создание системы ветеринарной экспресс-диагностики и контроля качества продукции животноводства/Материалы Международной научной конференции 6-7 сентября 2013 года,г.Ашхабад,Туркменистан,с.218-219. 4. Yakhno T., Sanin A., Pelyushenko A., Kazakov V., Shaposhnikova O., Chernov A., Yakhno V., Vacca C., Falcone F., Johnson B.. Uncoated quartz resonator as a universal biosensor. // Biosensors and Bioelectronics, 2007, 22, 9-10, 2127-2131.

ИЗЫСКАНИЕ ЭКСПРЕСС МЕТОДА ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Ильязов Р.Г., Яхно Т.А., Хамзин Р.А., Хамидуллин И.Р.

Резюме

Сравнительная оценка экспресс-метода диагностики туберкулеза КРС с общепринятыми методами (ИФА, внутрикожная проба, патологоморфологическая и биопроба) установила ряд преимуществ, которые выражаются в простоте анализа, доступностью, оперативностью и объективностью для быстрого принятия решений по профилактике и борьбе с особо опасным заболеванием для человека и животных.

FINDING A RAPID METHOD OF TUBERCULOSIS DIAGNOSTIC IN CATTLE

Ilyazov R.G., Yakhno T.A., Khamzin R.A., Khamidullin I.R.